本文關(guān)鍵詞：雙抗夾心ELISA檢測轉(zhuǎn)Bar基因抗除草劑大豆

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【摘要】：為快捷有效地檢測轉(zhuǎn)Bar基因抗除草劑大豆,利用已制備的抗除草劑Bar基因編碼蛋白,膦絲菌素乙酰轉(zhuǎn)移酶(phosphinothricin acetyltransferase,PAT)單克隆抗體和多克隆抗體,建立PAT蛋白雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測方法,對轉(zhuǎn)Bar基因抗除草劑大豆不同組織材料進行定量檢測。結(jié)果顯示,最佳檢測條件為捕獲抗體質(zhì)量濃度0.125μg/m L,包被酶標板,37℃孵育1 h后4℃靜置過夜,檢測樣品37℃孵育1.5 h,檢測抗體質(zhì)量濃度6.25μg/m L,37℃孵育1.5 h;PAT蛋白的最低檢測限為0.04 ng/m L,大豆蛋白體系中為8 ng/m L;重復性變異系數(shù)小于3%。利用上述檢測條件,對實驗建立的轉(zhuǎn)Bar基因抗除草劑大豆進行PAT蛋白定量檢測,成功地在根、莖、花、葉、種子不同部位檢測到該蛋白的表達。
【作者單位】： 吉林省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所東北作物有害生物綜合治理重點實驗室吉林省農(nóng)業(yè)微生物重點實驗室;東北農(nóng)業(yè)大學植物保護學院;吉林農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院;
【關(guān)鍵詞】： Bar 雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附 大豆 檢測
【基金】：吉林省自然科學基金項目(20130101089JC) 吉林省中青年科技領(lǐng)軍人才及優(yōu)秀創(chuàng)新團隊項目(20121812) 國家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(2014ZX08004)
【分類號】：S565.1
【正文快照】： 草丁膦是一種低毒除草劑,其有效成分為膦絲值對應的PAT蛋白單克隆抗體或組合為捕獲抗體。檢測菌素(phosphinothricin,PPT),Bar基因為抗除草抗體為實驗室已制備保存的PAT蛋白兔源多克隆抗體,劑基因,編碼膦絲菌素乙酰轉(zhuǎn)移酶(phosphinothricin根據(jù)方陣滴度法確定捕獲抗體和檢測抗，

本文編號：1057298