發(fā)布時間：2017-10-17 13:37

  本文關鍵詞：甘肅紅豆草BAN基因克隆與雙標記選擇表達載體構建

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【摘要】：為探討編碼花青素還原酶BAN基因的功能及其與縮合單寧合成的關系,根據BAN基因序列設計特異引物,采用RT-PCR技術獲得甘肅紅豆草BAN的相似基因;利用生物信息學相關軟件分析,預測其c DNA序列編碼的蛋白質結構和功能;采用Real-time PCR法檢測該基因在甘肅紅豆草各組織中的表達;構建含有BAN基因的雙標記選擇載體。結果表明,克隆的BAN基因與報道的BAN基因序列相似性達到99.41%,其ORF長為1 020 bp,可編碼339個氨基酸殘基,具有花青素還原酶保守結構域和重要功能位點;三級結構預測顯示,預測模型與花青素還原酶單體結構(C2RH8A)相似,屬于短鏈脫氫/還原酶超家族成員,表明其可能具有花青素還原酶的功能。BAN基因在各組織中均表達,其表達量依次為莢果、葉、蕾、花、莖。以此為靶序列,構建攜帶抗除草劑bar和綠色熒光蛋白GFP基因的雙標記選擇植物表達載體,將為縮合單寧合成、代謝的進一步研究及抗除草劑和抗臌脹病牧草新品種的培育奠定基礎。
【作者單位】： 甘肅農業(yè)大學草業(yè)學院/草業(yè)生態(tài)系統(tǒng)教育部重點實驗室/中-美草地畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展研究中心;河南科技大學農學院;甘肅農業(yè)大學生命科學院;西北民族大學生命科學與工程學院;
【關鍵詞】： 甘肅紅豆草 基因克隆 表達分析 載體構建
【基金】：甘肅省科技廳科技支撐計劃項目(1104NKCA087) 國家自然科學基金項目(31502012)
【分類號】：S541.4
【正文快照】： 縮合單寧(原花青素)是植物類黃酮生物合成途徑的終端產物,在自然界中廣泛存在,主要存在于植物的果實、種子、花和外皮中,也存在于蔬菜、水果和糧食中�？s合單寧也是一種重要的生物源強效抗氧化劑和自由基清除劑,其在生物體內具有抗紫外線、抗病、抗蟲,清除自由基,調節(jié)種子休眠

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本文編號：1049159