本文關鍵詞：RNAi沉默Rac1基因對結腸癌細胞增殖及裸鼠成瘤的影響

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【摘要】：目的探討RNAi沉默Rac1基因對結腸癌細胞增殖及裸鼠成瘤的影響。方法 1細胞實驗:體外培養(yǎng)結腸癌細胞SW480,隨機分為空白對照組、陰性對照組、shRNA-Rac1組,陰性對照組、shRNA-Rac1組分別轉染空載質粒慢病毒、shRNA-Rac1慢病毒。采用RT-PCR技術、Western blotting法檢測各組Rac1 mRNA及其蛋白表達;采用MTT法檢測各組轉染24、48、72、96 h的細胞增殖情況。2動物實驗:取shRNA-Rac1組、陰性對照組轉染后細胞分別接種于裸鼠皮下,建立結腸癌裸鼠移植瘤模型(分別記為觀察組、對照組),觀察裸鼠成瘤及移植瘤生長情況,喂養(yǎng)35天脫臼處死,完整剝離腫瘤組織,稱取瘤體質量并測量腫瘤體積。同時檢測瘤體Rac1蛋白表達情況。結果 1細胞實驗:與陰性對照組比較,shRNA-Rac1組Rac1 mRNA及其蛋白表達明顯降低(P均0.05);與陰性對照組比較,shRNA-Rac1組各時間點細胞增殖速度明顯降低(P均0.05)。2動物實驗:對照組癌細胞接種4~8天均可見瘤體形成,觀察組接種35天僅2只成瘤,且瘤體形成時間較對照組晚10天。接種35天,觀察組、對照組瘤體體積分別為(32.54±43.13)、(948.13±523.50)mm3,瘤體質量分別為(0.023±0.031)、(0.873±0.372)g,兩組比較P均0.01。與對照組比較,觀察組瘤體組織Rac1蛋白陽性表達率明顯降低(P0.05)。結論抑制Rac1表達能降低結腸癌細胞增殖速度,抑制裸鼠移植瘤生長。
【作者單位】： 海南醫(yī)學院附屬醫(yī)院;海南醫(yī)學院;
【關鍵詞】： 結腸癌 Rac RNA干擾 裸鼠成瘤 細胞增殖
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81260321)
【分類號】：R735.35
【正文快照】： 結腸癌是臨床常見的惡性腫瘤之一,在我國其病死率居所有惡性腫瘤的第五位,復發(fā)和轉移是患者死亡的主要原因[1,2]。Rac1是Rac亞家族的一個重要成員,是細胞內重要的信號轉導分子。近年研究發(fā)現(xiàn),Rac1在人類大部分侵襲性腫瘤中高表達,如胃癌、乳腺癌、肺癌等[3~8],并與腫瘤的侵襲

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本文編號：1041107