本文關(guān)鍵詞：過表達(dá)CD44v6基因?qū)θ舜竽c癌SW480細(xì)胞侵襲遷移能力的影響

  更多相關(guān)文章： 大腸癌 侵襲 轉(zhuǎn)移 CDv 過表達(dá)

【摘要】：目的:研究CD44v6基因過表達(dá)對(duì)SW480細(xì)胞侵襲和遷移能力的影響.方法:慢病毒介導(dǎo)的CD44v6過表達(dá)細(xì)胞(CD44v6組)和空載體對(duì)照細(xì)胞(NC組)由前期實(shí)驗(yàn)構(gòu)建.采用熒光顯微鏡觀察增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)表達(dá)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)CD44v6 mRNA表達(dá)水平、免疫熒光檢測(cè)Flag標(biāo)簽蛋白三種方法重新鑒定過表達(dá)細(xì)胞模型;CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性;劃痕試驗(yàn)和Transwell試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲和遷移能力.結(jié)果:綠色熒光蛋白觀察顯示細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率近100%;實(shí)時(shí)熒光定量PCR顯示CD44v6組細(xì)胞CD44v6 mRNA表達(dá)水平較對(duì)照組.顯著升高(P0.001);Flag標(biāo)簽蛋白免疫熒光染色顯示過表達(dá)CD44v6蛋白主要定位于細(xì)胞膜.CCK-8結(jié)果顯示2組細(xì)胞增殖無明顯差異;劃痕試驗(yàn)結(jié)果顯示CD44v6組細(xì)胞劃痕愈合指數(shù)較對(duì)照組顯著增高(P0.05);Transwell試驗(yàn)結(jié)果顯示CD44v6組細(xì)胞遷移和侵襲相關(guān)指數(shù)均較對(duì)照組顯著增高(均P0.05),且CD44v6抗體處理后,CD44v6組細(xì)胞遷移和侵襲相關(guān)指數(shù)均較前顯著減低(均P0.05).結(jié)論:CD44v6基因過表達(dá)能顯著增強(qiáng)SW480細(xì)胞侵襲和遷移能力.
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤外科;
【關(guān)鍵詞】： 大腸癌 侵襲 轉(zhuǎn)移 CDv 過表達(dá)
【基金】：溫州市科技局基金資助項(xiàng)目,No.Y20140713 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院科研孵化基金資助項(xiàng)目,No.FHY2014013~~
【分類號(hào)】：R735.34
【正文快照】： ■背景資料C D 4 4 v 6是最為公認(rèn)的大腸癌腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物之一,被認(rèn)為與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移及不良預(yù)后相關(guān).但目前研究大多局限于臨床相關(guān)性水平,缺乏細(xì)胞及動(dòng)物水平的功能機(jī)制研究.建立可靠的細(xì)胞模型,對(duì)深入研究分子機(jī)制具有重要意義. ■同行評(píng)議者肖秀英,副主任醫(yī)師,上海交通，

本文編號(hào)：1017520