硅基銀片的等離子體熒光增強(qiáng)效應(yīng)及其在蛋白質(zhì)核酸檢測(cè)中的應(yīng)用
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更多相關(guān)文章: 金屬表面等離子體熒光增強(qiáng) 熒光免疫分析 Ag@Si基片 蛋白質(zhì)檢測(cè) 核酸檢測(cè)
【摘要】:熒光免疫分析具有高靈敏度、定量化、快速分析以及對(duì)樣品損壞小等優(yōu)點(diǎn),然而常用的熒光染料,尤其在近紅外波段,其量子產(chǎn)率較低,這在一定程度上限制了它的實(shí)際應(yīng)用,因此,提高熒光免疫分析技術(shù)中的熒光強(qiáng)度是一個(gè)重要的實(shí)際問(wèn)題;另一方面,金屬表面等離子體熒光增強(qiáng)效應(yīng)已在生物傳感器和生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)等實(shí)際應(yīng)用中顯示了巨大的潛力,它在提高熒光信號(hào)強(qiáng)度、增強(qiáng)探測(cè)靈敏度等方面展示了優(yōu)良的效果。最近有研究證明,與傳統(tǒng)的玻璃基底的金屬納米結(jié)構(gòu)薄膜相比,以半導(dǎo)體硅片作為基底的雜化金屬納米結(jié)構(gòu)薄膜具備更強(qiáng)的表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)效應(yīng)。因此,在本論文的工作中,我們進(jìn)一步研究了此類(lèi)硅基底金屬納米島狀結(jié)構(gòu)雜化材料—硅基銀膜(即Ag@Si基片)在熒光增強(qiáng)方面,尤其是改進(jìn)傳統(tǒng)免疫熒光檢測(cè)方面的作用。多色蛋白質(zhì)免疫熒光檢測(cè)結(jié)果顯示,Ag@Si基片具有波長(zhǎng)依賴(lài)的熒光增強(qiáng)能力,即,在532 nm波長(zhǎng)范圍熒光強(qiáng)度增強(qiáng)約1.2倍,然而在800 nm波長(zhǎng)增強(qiáng)倍數(shù)達(dá)到57倍左右。此外,對(duì)于傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)或核酸熒光標(biāo)記的細(xì)胞或組織切片樣品,Ag@Si基片能夠?qū)⑵錈晒鈴?qiáng)度信號(hào)提高3.0至4.1倍(800 nm波長(zhǎng)范圍),并令熒光顯微照片的信噪比獲得明顯改善?傊,此類(lèi)Ag@Si基片能夠方便的應(yīng)用于傳統(tǒng)的免疫熒光檢測(cè)樣品,展現(xiàn)出良好的適應(yīng)性、重要的增強(qiáng)熒光信號(hào)及改進(jìn)信噪比的能力,這些優(yōu)點(diǎn)展示了其不僅在生物研究、而且在醫(yī)療領(lǐng)域的巨大的實(shí)際應(yīng)用潛力。
【關(guān)鍵詞】:金屬表面等離子體熒光增強(qiáng) 熒光免疫分析 Ag@Si基片 蛋白質(zhì)檢測(cè) 核酸檢測(cè)
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:O657.3
【目錄】:
- 中文摘要4-5
- Abstract5-10
- 第一章 前言10-22
- 1.1 金屬增強(qiáng)熒光及其增強(qiáng)機(jī)制10-14
- 1.1.1 金屬增強(qiáng)熒光10-11
- 1.1.2 金屬增強(qiáng)熒光的熒光增強(qiáng)機(jī)制11-14
- 1.2 影響金屬增強(qiáng)熒光效果的因素14-18
- 1.2.1 金屬納米材料種類(lèi)14-15
- 1.2.2 金屬與熒光分子間的距離15-17
- 1.2.3 金屬納米粒子的形貌和尺寸17-18
- 1.3 固體銀膜增強(qiáng)熒光的研究18-20
- 1.3.1 固體銀膜18-19
- 1.3.2. 硅基銀膜(Ag@Si)等離子體基片19-20
- 1.4 本論文的主要研究?jī)?nèi)容20-22
- 第二章 實(shí)驗(yàn)技術(shù)與方法22-28
- 2.1 實(shí)驗(yàn)表征技術(shù)22-26
- 2.1.1 微陣列可見(jiàn)光及近紅外光掃描成像系統(tǒng)22-23
- 2.1.2 熒光顯微鏡23-26
- 2.2 樣品制備方法26-28
- 2.2.1 免疫組化法26-27
- 2.2.2 熒光原位雜交技術(shù)27-28
- 第三章 蛋白質(zhì)與核酸檢測(cè)中的Ag@Si基片等離子體共振增強(qiáng)熒光成像28-47
- 3.1 研究背景28-29
- 3.2 實(shí)驗(yàn)材料29-30
- 3.2.1 蛋白分析材料29
- 3.2.2 熒光免疫組化(IHC)標(biāo)記材料29
- 3.2.3 熒光原位雜交(FISH)標(biāo)記材料29-30
- 3.2.4 實(shí)驗(yàn)使用細(xì)胞30
- 3.3 實(shí)驗(yàn)方法30-33
- 3.3.1 Ag@Si表面以及純硅片表面的微陣列刻印及分析過(guò)程30
- 3.3.2 熒光免疫組化標(biāo)記和熒光原位雜交標(biāo)記細(xì)胞與組織切片樣品的制作過(guò)程30-32
- 3.3.3 掃描儀和顯微鏡的熒光表征32
- 3.3.4 數(shù)據(jù)分析32-33
- 3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-47
- 3.4.1 等離子體Ag@Si基片的表征33-34
- 3.4.2 蛋白質(zhì)微陣列分析中Ag@Si片的增強(qiáng)影響34-36
- 3.4.3 Ag@Si基片在免疫組化法標(biāo)記細(xì)胞與組織切片中的熒光增強(qiáng)效果36-42
- 3.4.4 Ag@Si基片在熒光原位雜交組織樣品中的增強(qiáng)效應(yīng)42-45
- 3.4.5 討論45-47
- 第四章 Ag@Si基片對(duì)SiNPs的熒光增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)47-56
- 4.1 研究背景47
- 4.2 實(shí)驗(yàn)材料47-48
- 4.3 實(shí)驗(yàn)方法48
- 4.3.1 硅量子點(diǎn)的合成48
- 4.3.2 硅量子點(diǎn)混合固體膜制作48
- 4.3.3 PS小球混合固體膜制作48
- 4.4 結(jié)果分析48-55
- 4.4.1 硅量子點(diǎn)以及PS小球的表征圖48-49
- 4.4.2 不同混合膜在純硅片與Ag@Si基片表面的熒光強(qiáng)度比較49-55
- 4.5 本章總結(jié)55-56
- 第五章 全文總結(jié)56-57
- 參考文獻(xiàn)57-65
- 攻讀學(xué)位期間公開(kāi)發(fā)表的論文及科研成果65-66
- 致謝66-67
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