本文關鍵詞：基于細胞組學技術提高膠球藻C-169中性脂染色的有效性

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【摘要】：本研究基于流式細胞儀、熒光酶標儀、激光共聚焦掃描顯微鏡等細胞組學分析技術,系統(tǒng)研究了藻液細胞濃度、Nile Red濃度、助溶劑種類和濃度,以及染色溫度、染色時間、振蕩時間等對檢測藻細胞中性脂相對含量(以平均熒光強度表示)的影響,提高了膠球藻C-169中性脂染色的有效性。結果表明,Nile Red熒光染色的最佳藻細胞濃度為106 m L,染料濃度在0.05~0.2μg/m L之間較適宜且不會產(chǎn)生過量的熒光干擾;添加15%~30%(V/V)丙三醇能顯著增強染料進入細胞的通透性;25~40℃范圍內(nèi)膠球藻染色后的熒光強度較強但無顯著差異(p0.05);染色時間超過10 min及振蕩時間超過30 s均未顯著提高膠球藻C-169染色后的平均熒光強度。系統(tǒng)優(yōu)化后的染色方法可從細胞水平上顯著提高中性脂熒光檢測的精確性,同時為其他微藻采用這一熒光探針快速測定中性脂含量提供了快速有效方法。
【作者單位】： 華南理工大學食品科學與工程學院;
【關鍵詞】： 膠球藻C- 細胞組學 流式細胞術 Nile Red 中性脂
【正文快照】： 微藻是世界上分布最廣、種類變化最大的低等植物類群,每年光合作用固定的二氧化碳占全球CO2固定量的50%以上,是能量轉換和碳元素循環(huán)的重要載體[1]。微藻具有光合作用效率高、生長周期短、環(huán)境適應能力強等特點,某些富含油脂的品種其單位面積油脂產(chǎn)量可達陸生油料作物的30倍以

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