本文關(guān)鍵詞：馬尾藻源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的檢測(cè)、制備及應(yīng)用研究

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【摘要】：馬尾藻(Sargassum),屬馬尾藻科,在我國(guó)是資源豐富的一類褐藻,其綜合利用率較低。研究表明,馬尾藻中含有豐富的植物激素等生物活性物質(zhì),它們對(duì)于促進(jìn)植物的生長(zhǎng)、發(fā)育和抗逆等具有顯著的功效。目前對(duì)于馬尾藻中的植物激素研究較少,利用率較低。因此,本研究通過(guò)生物酶解技術(shù)提取其中的植物激素并建立液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)檢測(cè)馬尾藻中4種的植物激素的方法,以正交設(shè)計(jì)的方法獲得最佳工藝,并以植物激素含量和馬尾藻多糖為指標(biāo),對(duì)自制馬尾藻源生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑進(jìn)行了質(zhì)量評(píng)價(jià),最終將制備的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑通過(guò)豆芽、辣椒和小白菜進(jìn)行了培育試驗(yàn)。本研究的主要結(jié)果如下：1.本研究?jī)?yōu)化了馬尾藻中植物激素的檢測(cè)方法。利用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜方法(UPLC-MS/MS)可同時(shí)檢測(cè)吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、脫落酸(ABA)、玉米素(ZT)4種植物激素。優(yōu)化后的前處理和凈化方法為：提取溶劑為70%甲醇,并采用超聲提取法,其濃縮物經(jīng)過(guò)PCX+PAX固相小柱凈化,結(jié)果表明4種植物激素的回收率為80-105%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.06%-6.42%。在0.01-1 μg/mL內(nèi),各種植物激素的相關(guān)系數(shù)均大于0.9990。該方法的檢出限為0.025-0.2 μg/kgo2.本研究通過(guò)單因素設(shè)計(jì)優(yōu)化了馬尾藻源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的浸提工藝,得到料液比為1：3,浸提溫度為35℃,反應(yīng)時(shí)間為2h時(shí)IAA含量提取最佳為11.26μg/Kg。本研究也優(yōu)化了生物酶解提取馬尾藻源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的工藝條件,通過(guò)正交設(shè)計(jì)確定了生物酶解的最佳條件：纖維素酶和果膠酶的用量分別為0.15 g/50 g和0.30g/50 g,酶解溫度為30℃,反應(yīng)pH為7,酶解時(shí)間為3 h。通過(guò)浸提工藝和酶解工藝的結(jié)合使用,所得的植物激素含量：IAA 17.65 μg/Kg, ABA 0.44 μg/Kg, IB A 0.95 μg/Kg, ZT 1.56 μg/Kg,馬尾藻多糖含量為2.42%.3.本研究以綠豆、辣椒和小白菜為試驗(yàn)對(duì)象,采用種子浸泡的方式進(jìn)行種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)的試驗(yàn),初步研究促生長(zhǎng)功效。結(jié)果表明,200倍和400倍稀釋的馬尾藻源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)于綠豆、辣椒和小白菜種子的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)以及幼苗的根長(zhǎng)、單株高、單株鮮重、葉片面積和葉綠素含量均具有顯著影響。綜合考慮選用400倍稀釋的馬尾藻源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑用于綠豆、辣椒和小白菜種子的萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)。
【關(guān)鍵詞】：馬尾藻 酶解 內(nèi)源性植物激素 超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑
【學(xué)位授予單位】：福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：O657.63;TQ452
【目錄】：

• 摘要9-11
• Abstract11-13
• 第一章 綜述13-35
• 1 馬尾藻的研究概況13-16
• 1.1 馬尾藻簡(jiǎn)介13-14
• 1.2 馬尾藻的研究?jī)r(jià)值14-16
• 2 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑概況16-33
• 2.1 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑簡(jiǎn)介和研究16-19
• 2.2 植物激素的簡(jiǎn)介和研究進(jìn)展19-24
• 2.3 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的檢測(cè)24-31
• 2.3.1 前處理方法25
• 2.3.2 凈化方法25-27
• 2.3.3 檢測(cè)方法27-31
• 2.4 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的制備方法31-33
• 2.4.1 物理機(jī)械法32
• 2.4.2 化學(xué)提取法32
• 2.4.3 生物法32-33
• 3 本文的研究目的意義和內(nèi)容33-35
• 第二章 超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定馬尾藻中4種內(nèi)源性植物激素35-50
• 1 前言35
• 2 材料與方法35-37
• 2.1 材料35-36
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料35-36
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑36
• 2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液36
• 2.2 儀器與設(shè)備36
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法36-37
• 2.3.1 樣品前處理36-37
• 2.3.2 樣品凈化37
• 2.4 超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)條件37
• 2.4.1 超高效液相色譜條件37
• 2.4.2 質(zhì)譜條件37
• 3 結(jié)果與討論37-49
• 3.1 前處理提取溶劑的優(yōu)化37-38
• 3.2 凈化方法的優(yōu)化38-40
• 3.3 色譜條件的優(yōu)化40-42
• 3.4 質(zhì)譜條件的優(yōu)化42-45
• 3.5 方法評(píng)價(jià)45-48
• 3.5.1 方法的標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍和檢出限45-47
• 3.5.2 方法的準(zhǔn)確度和精密度47-48
• 3.6 方法應(yīng)用48-49
• 4 本章小結(jié)49-50
• 第三章 馬尾藻植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的制備工藝50-64
• 1 前言50-51
• 2 材料與方法51-54
• 2.1 材料51
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料51
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑51
• 2.2 儀器與設(shè)備51
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法51-54
• 2.3.1 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑加工工藝流程51-52
• 2.3.2 浸提52
• 2.3.3 酶解52-53
• 2.3.4 浸提工藝設(shè)計(jì)53
• 2.3.5 酶解條件正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)53-54
• 2.3.6 馬尾藻可溶性糖含量的測(cè)定54
• 3 結(jié)果與討論54-63
• 3.1 浸提工藝優(yōu)化54-57
• 3.1.1 浸提工藝料液比的確定54-55
• 3.1.2 浸提工藝時(shí)間的確定55-56
• 3.1.3 浸提工藝溫度的確定56-57
• 3.1.4 浸提工藝優(yōu)化的結(jié)果57
• 3.2 酶解正交試驗(yàn)結(jié)果57-61
• 3.3 酶解正交驗(yàn)證試驗(yàn)61
• 3.4 馬尾藻可溶性糖標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制和樣品測(cè)定61-62
• 3.5 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑質(zhì)量指標(biāo)評(píng)價(jià)62-63
• 4 本章小結(jié)63-64
• 第四章 馬尾藻源生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的功效驗(yàn)證64-77
• 1 前言64
• 2 材料與方法64-67
• 2.1 材料64-65
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料64-65
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑65
• 2.2 儀器與設(shè)備65
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法65-67
• 2.3.1 不同稀釋倍數(shù)海藻生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的制備65
• 2.3.2 發(fā)芽試驗(yàn)65-66
• 2.3.3 室內(nèi)栽培試驗(yàn)66
• 2.3.4 種子發(fā)芽的指標(biāo)檢測(cè)方法66
• 2.3.5 幼苗各類指標(biāo)檢測(cè)方法66-67
• 3 結(jié)果與討論67-76
• 3.1 馬尾藻源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的稀釋倍數(shù)和種子測(cè)定天數(shù)的確定67
• 3.2 不同稀釋倍數(shù)馬尾藻源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)種子發(fā)芽的影響67-72
• 3.3 不同稀釋倍數(shù)馬尾藻源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)幼苗生長(zhǎng)的影響72-76
• 4 本章小結(jié)76-77
• 第五章 結(jié)論與展望77-79
• 5.1 結(jié)論77-78
• 5.2 展望78-79
• 在學(xué)期間發(fā)表論文及專利等79-80
• 參考文獻(xiàn)80-89
• 致謝89-90

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本文編號(hào)：591763