食源性致病菌嚴重威脅人類身體健康,長期以來備受關(guān)注。檢測食源性致病菌的方法包括培養(yǎng)計數(shù)法、免疫學方法、分子生物學方法和生物傳感方法等�？咕�(antimicrobial peptide,AMP)是一種新型生物識別元件,已應(yīng)用于檢測食源性致病菌的生物傳感器中。本文利用AMP在細菌表面豐富識別位點的優(yōu)勢,實現(xiàn)AMP的識別和信號放大的雙功能,構(gòu)建一系列快速、靈敏檢測大腸桿菌0157:H7的比色傳感方法。主要內(nèi)容如下:1、免疫磁分離技術(shù)在分離大腸桿菌O157:H7中的應(yīng)用免疫磁分離技術(shù)能從食品樣本中特異性的分離富集食源性致病菌。本章對大腸桿菌0157:H7的捕獲率高達90%。同時,本文利用磁分離-洗脫法,將磁珠表面捕獲到的細菌洗脫,回收率為85%。該方法有望降低磁珠的非特異性吸附,降低背景信號,為后續(xù)檢測方法開發(fā)奠定良好的基礎(chǔ)。2、基于生物素-抗菌肽和生物素-辣根過氧化物酶競爭作用檢測大腸桿菌0157:H7本章通過偶聯(lián)生物素的AMP(bio-AMP)和偶聯(lián)生物素的辣根過氧化物酶(bio-HRP)在鏈霉親和素磁珠(MNB-SA)表面的競爭反應(yīng)實現(xiàn)大腸桿菌0157:H7的比色法檢測。實驗過程中,b...

【文章頁數(shù)】：133 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１?２００６－２０１５十年中國食源性疾病暴發(fā)情況Ｗ??Ｆｉｇ．?１．１?Ｆｏｏｄｂｏｍｅ?ｐｏｉｓｉｏｎｉｎｇ?ｉｎ?Ｃｈｉｎａ?ｆｒｏｍ?２００６－２０１５．??

展中國家和地區(qū)為甚，非洲每年有９１００萬人感染食源性疾病，其中１３．７萬人死??亡Ｗ。在中國，食源性疾病的暴發(fā)事件也極為普遍，平均每年感染數(shù)１０萬例，涉??及人數(shù)１０００多萬，其中，由食源性致病菌引起的占一半以上（圖１．１）?［３］。因為??監(jiān)測系統(tǒng)尚在完善中，所以實際生活中發(fā)生....

圖１．２掃描電鏡下大腸桿菌照片??Ｆｉｇ．?１．２?ＳＥＭ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?Ｅ．?ｃｏｌｉ?ｂａｃｔｅｒｉａ．??

大腸桿菌〇１５７：Ｈ７造成多起食源性疾病的暴發(fā)，被列為最重要的食源性??致病菌之一。大腸桿菌０１５７：Ｈ７的形態(tài)及各方面理化性質(zhì)簡單介紹如下：??形態(tài)：桿狀，尺寸在１－３?ｐｍ，無芽孢，周身鞭毛（如圖１．２）。??生化特性：除２４小時之內(nèi)不發(fā)酵山梨醇之外，其他常見的生化特性均與其....

圖１．４常見ＥＬＩＳＡ原理圖??

－細菌－抗體”三明治結(jié)構(gòu)檢測大腸桿菌０１５７：Ｈ７，經(jīng)過一夜的增菌，能在碎牛肉和??乳制品中檢測到０．２－０．９ｃｆｌｉ／ｇ。食品工業(yè)中常用的質(zhì)量控制方法是酶聯(lián)免疫吸附??法，基本原理如圖１．４所示，相比于傳統(tǒng)的培養(yǎng)和菌落計數(shù)法，ＥＬＩＳＡ具有特異??性好，快速方便，省時省力等優(yōu)....

圖１．６比色法檢測食源性致病菌的原理圖引用獲愛思唯爾版權(quán)許可??

浙江大學博士學位論文?第一章緒論??實現(xiàn)對細菌的比色檢測（原理如圖１．６）。??Ｎｏｆｏｏｄｂｏｍｅ?Ｘ?ＮａＣ＊?＾??＾?ｂａｃｔｅｒｉａ?ｇｅｎｏｍｅ?＇?＾?＼?＿?＊ＴＴ＾ｐｐ?＇??／１Ｎ?八?＃?康??．賽：??］＞ｔｉｍ??．．?－＾＾７?Ｆｏｏｄｂｏｒｎｃ?Ｂａ....

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