蛋白質(zhì)是生物體內(nèi)最重要的生物大分子之一,由于具有極好的生物學(xué)特性,在食品、生物醫(yī)學(xué)、生物制藥等諸多領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。蛋白質(zhì)的分離純化技術(shù)作為蛋白質(zhì)研究的前提和基礎(chǔ)備受關(guān)注。但傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)只能簡單地分離得到蛋白粗產(chǎn)品,無法滿足現(xiàn)代化工業(yè)生產(chǎn)對于高純蛋白的要求。因此,本文以苯乙烯為原料采用乳液聚合法制備聚苯乙烯（PS）納米球,通過改性分別制備了磺化聚苯乙烯（SPS）納米球、羧基化聚苯乙烯（PS-COOH）納米球、金屬螯合聚苯乙烯(PS-ANTA-M²⁺)納米球和金屬螯合磁性聚苯乙烯(Fe₃O₄@PS-ANTA-M²⁺)納米球,并用于蛋白質(zhì)分離純化研究。旨在開發(fā)一種低成本、高負(fù)載量、可重復(fù)利用的蛋白質(zhì)分離純化介質(zhì),實(shí)現(xiàn)操作簡單、高效快速的蛋白質(zhì)分離純化流程。主要研究工作與結(jié)果如下:（1）SPS納米球的制備及其在蛋白質(zhì)分離應(yīng)用。以苯乙烯為單體采用乳液聚合法制備PS納米球,通過濃硫酸改性得SPS納米球。納米球粒徑均一且單一分散,納米球表面磺化度達(dá)到2.36±0.08 mmol/g,對蛋白質(zhì)具有高... 

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRCT
第一章 緒論
    1.1 前言
    1.2 蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)
        1.2.1 根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小不同的分離技術(shù)
        1.2.2 根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度不同的分離技術(shù)
        1.2.3 根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷不同的分離技術(shù)
        1.2.4 根據(jù)親和配體特異性的分離技術(shù)
        1.2.5 根據(jù)蛋白質(zhì)其他特性的分離技術(shù)
    1.3 功能化聚合物的研究現(xiàn)狀
        1.2.1 聚合物微球的制備
        1.2.2 聚合物微球的功能化
    1.4 本課題的研究目的、意義、技術(shù)路線及內(nèi)容
        1.4.1 研究目的及意義
        1.4.2 技術(shù)路線與研究內(nèi)容
第二章 SPS納米球的制備表征及其在蛋白質(zhì)分離應(yīng)用
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 乳液聚合法制備SPS納米球
        2.3.2 SEM分析
        2.3.3 ITC分析
        2.3.4 吸附時間對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
        2.3.5 初始底物濃度對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
        2.3.6 溶液pH對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
        2.3.7 溶液溫度對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
        2.3.8 金屬鹽對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
        2.3.9 SPS納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附熱力學(xué)分析
        2.3.10 SPS納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附動力學(xué)分析
        2.3.11 考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白質(zhì)含量
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 SEM分析
        2.4.2 ITC分析
        2.4.3 吸附時間對蛋白質(zhì)吸附的影響
        2.4.4 初始底物濃度對蛋白質(zhì)吸附的影響
        2.4.5 溶液pH對蛋白質(zhì)吸附的影響
        2.4.6 溶液溫度對蛋白質(zhì)吸附的影響
        2.4.7 金屬鹽對蛋白質(zhì)吸附的影響
        2.4.8 SPS納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附熱力學(xué)分析
        2.4.9 SPS納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附動力學(xué)分析
    2.5 本章小結(jié)
第三章 PS-ANTA-M~(2+)納米球的制備表征及其在蛋白質(zhì)分離純化應(yīng)用
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 乳液聚合法制備PS-COOH納米球
        3.3.2 固定化ANTA和金屬離子
        3.3.3 羧基含量測定
        3.3.4 PS-ANTA-M~(2+)納米球表征
        3.3.5 目標(biāo)蛋白分離純化
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 丙烯酸對羧基含量的影響
        3.4.2 PS-COOH納米球的分散性能分析
        3.4.3 PS-ANTA-M~(2+)納米球的表征
        3.4.4 ITC分析
        3.4.5 PS-ANTA-M~(2+)納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的分離純化研究
    3.5 本章小結(jié)
第四章 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球的制備表征及其在蛋白質(zhì)分離純化應(yīng)用
    4.1 前言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 制備油酸修飾的Fe_3O_4納米顆粒
        4.3.2 制備Fe_3O_4@PS-COOH納米球
        4.3.3 固定化ANTA和金屬離子
        4.3.4 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球表征
        4.3.5 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附性能研究
        4.3.6 目標(biāo)蛋白分離純化
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球的表征
        4.4.2 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附性能研究
        4.4.3 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的分離純化研究
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論和展望
    一、結(jié)論
    二、研究創(chuàng)新點(diǎn)
    三、展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
附件


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[7]超濾技術(shù)及其應(yīng)用與發(fā)展[J]. 曹明,王勇.  廣州化工. 2011(19)
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碩士論文
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[3]磁性納米材料改性及固定化脂肪酶的研究[D]. 張大準(zhǔn).河南大學(xué) 2011
[4]生物醫(yī)用磁性納米材料的制備及應(yīng)用[D]. 劉光.蘇州大學(xué) 2011
[5]改性葡聚糖和蛋白質(zhì)作為功能高分子的研究[D]. 羅成果.鄭州大學(xué) 2006



本文編號：3715059