由于生物學反應的復雜性,傳統(tǒng)的體相檢測技術(shù)可以檢測到反應過程的總體變化,但很難對生物反應的分子過程和瞬時狀態(tài)進行直觀的檢測。近些年來興起并逐漸成熟的單分子技術(shù)包括單分子熒光共振能量轉(zhuǎn)移、磁鑷等提高了人們實時研究生物大分子行為和機理的能力;本文利用體相和單分子熒光技術(shù)研究蛋白質(zhì)和DNA相互作用過程和機制,我們可以全面地了解到生物反應的過程,極大地增強了人們理解復雜生命過程的能力。含有鐵-硫團簇大腸桿菌的Din G蛋白（Ec Din G）能夠使Cy3熒光染料發(fā)生淬滅,但具體機理不太清楚。通過加入氧化劑過氧化氫、還原劑DTT探究鐵-硫團簇和Cy3之間可能發(fā)生的電子轉(zhuǎn)移,證明了Cy3淬滅可作為研究解旋酶與DNA具體運動的特異性和靈敏探針。核酸是遺傳信息的載體,由脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）組成,已知所有生物體的生命活動都離不開核酸的轉(zhuǎn)錄、復制、翻譯等一系列反應,而這其中需要解旋酶打開核酸間的氫鍵。一旦解旋過程出現(xiàn)問題,生物體將出現(xiàn)疾病而不能正常生存,因此研究和理解解旋酶解旋不同核酸結(jié)構(gòu)的解旋行為和潛在的機制尤為重要。細胞在受到外部條件干擾時,核酸結(jié)構(gòu)很容易遭到破壞。耐輻射奇球菌具... 

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 解旋酶
        1.2.1 解旋酶簡介
        1.2.2 解旋酶性質(zhì)
    1.3 DNA熒光修飾
    1.4 G4結(jié)構(gòu)DNA
        1.4.1 G4結(jié)構(gòu)DNA的研究方法
    1.5 選題背景與科學意義
    參考文獻
第二章 實驗技術(shù)與方法
    2.1 引言
    2.2 熒光和熒光壽命測試
    2.3 全內(nèi)反射熒光顯微鏡
        2.3.1 全內(nèi)反射熒光顯微鏡基本原理
        2.3.2 全內(nèi)反射熒光顯微鏡基本應用
    2.4 磁性鑷子
    2.5 FRET技術(shù)
    參考文獻
第三章 FeS團簇與熒光標記DNA相互作用光學性質(zhì)的研究
    3.1 引言
    3.2 實驗準備
        3.2.1 DNA底物的制備
    3.3 實驗過程
    3.4 實驗結(jié)果
    3.5 小結(jié)
    參考文獻
第四章 DrRecD2蛋白對DNA解旋行為機制的研究
    4.1 引言
    4.2 實驗準備
        4.2.1 反應小室的制備
        4.2.2 蛋白質(zhì)表達和純化
        4.2.3 DNA制備
    4.3 實驗過程
        4.3.1 單分子熒光共振能量轉(zhuǎn)移數(shù)據(jù)采集
        4.3.2 磁鑷數(shù)據(jù)采集
        4.3.3 圓二色性(CD)的表征
    4.4 實驗結(jié)果
        4.4.1 DrRecD2解旋較短鏈長DNA
        4.4.2 DrRecD2解旋較長鏈長DNA
        4.4.3 DrRecD2解旋G4結(jié)構(gòu)DNA
    4.5 小結(jié)
    參考文獻
第五章 工作總結(jié)與展望
縮略詞表
攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文目錄
致謝



本文編號：3652335