本文關鍵詞：熒光免疫層析試紙條制備及定量檢測關鍵技術研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：免疫層析試紙檢測技術檢測速度快、操作簡單、成本低廉,已經在臨床診斷、食品藥品、環(huán)境監(jiān)測和醫(yī)學檢測等領域得到廣泛的應用。目前免疫層析技術朝著高靈敏度和定量化檢測的方向發(fā)展。但是傳統(tǒng)的金標試紙條靈敏地不夠高,只能給出定性化的檢測結果,在疾病早期超痕量檢測、果蔬農藥殘留檢測、相應的行業(yè)標準制定等需要定量檢測的應用場合已經無法滿足需求。熒光免疫層析檢測技術在繼承了免疫層析技術快速、專一和簡單的優(yōu)點時,可以有效地提高檢測靈敏度,并為免疫層析試紙條的定量檢測創(chuàng)造了便利條件。本課題針對性地設計了一套用于檢測熒光免疫層析試紙條的高通量檢測器。該儀器基于共聚焦式誘導熒光檢測(IFD)系統(tǒng)和步進電機驅動的二維掃描結構搭建完成完成。光學部分以LED作為激發(fā)光源、以光電二極管作為光電傳感器。采用自制鏡籠模塊搭建共聚焦式光學結構,降低了系統(tǒng)成本,減小了系統(tǒng)的體積。機械部分主要由步進電機結合精密絲杠和齒輪齒條結構搭建完成,保證了基于點源探測器的IFD系統(tǒng)可以實現多通道的試紙條檢測能力。硬件部分,以FPGA作為主控芯片對機電結構進行控制,同時對LED光源進行調制,并利用高速ADC芯片采集光電信號,然后完成基于FPGA平臺的數字相敏檢波算法的實時實現,提高檢測系統(tǒng)對噪聲和干擾的抑制能力。在此基礎上,本課題還探究了基于量子點標記技術的試紙條制備關鍵技術。本課題用市售的檢測N末端B型鈉尿肽原(NT-proBNP)的試紙條組裝成的8通道試紙卡來檢驗系統(tǒng)的多通道、高靈敏度的定量檢測能力。實驗結果表明,所設計的熒光ICTS檢測儀檢測的線性區(qū)間為9.375~600 pg?mL,熒光信號強度值y(V)與樣品濃度x(pg?mL)擬合公式為y=0.0025x+0.9225,相關系數為0.9493,8通道檢測耗時僅2min,實現了對試紙條進行高通量的定量檢測。在此基礎上探究了量子點與生物分子的偶聯問題,量子點偶聯產物的純化,偶聯產物的生物學活性,試紙條材料選擇及試紙條的設計組裝等關鍵問題,取得了階段性的成果,為后期應用于本檢測系統(tǒng)的試紙條的制備提供了重要基礎。
【關鍵詞】：免疫層析試紙 LED誘導熒光檢測 數字相敏檢波 高通量
【學位授予單位】：北京理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：O657.3
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 第1章 緒論10-23
• 1.1 研究背景和意義10
• 1.2 國內外研究現狀10-22
• 1.2.1 國外研究現狀10-17
• 1.2.2 國內研究現狀17-22
• 1.3 本文的研究內容和論文結構22-23
• 第2章 熒光免疫層析試紙條檢測儀設計23-51
• 2.1 熒光免疫層析試紙條檢測儀具體設計23-44
• 2.1.1 儀器光學和結構設計23-30
• 2.1.2 系統(tǒng)硬件設計30-38
• 2.1.3 數字相敏檢波算法38-43
• 2.1.4 上位機GUI設計43-44
• 2.2 結果與討論44-49
• 2.2.1 數字相敏檢波算法的實現44-47
• 2.2.2 儀器檢測性能測試47-49
• 2.2.3 儀器功耗49
• 2.3 本章小結49-51
• 第3章 熒光免疫層析試紙條實驗51-68
• 3.1 免疫層析技術51-53
• 3.1.1 層析技術51-52
• 3.1.2 抗原-抗體生物學反應52
• 3.1.3 熒光免疫層析檢測技術52-53
• 3.2 量子點標記技術53-56
• 3.2.1 量子點標記蛋白的機制53
• 3.2.2 量子點標記物的制備53-54
• 3.2.3 量子點標記物的純化與質量鑒定54-56
• 3.3 實驗部分56-61
• 3.3.1 實驗藥品和儀器56-58
• 3.3.2 基于量子點標記技術的熒光免疫層析試紙條的制備58-61
• 3.4 結果與討論61-66
• 3.4.1 量子點和蛋白偶聯物的純化61
• 3.4.2 量子點與蛋白的偶聯效果61-62
• 3.4.3 結合墊的選材62-63
• 3.4.4 試紙條的制備63-64
• 3.4.5 試紙條上的抗原抗體反應驗證64-65
• 3.4.6 影響試紙條性能的因素分析65-66
• 3.5 本章小結66-68
• 總結68-70
• 參考文獻70-75
• 附錄75-77
• 致謝77

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6 李Y，

本文編號：365191