基于稀土配合物熒光探針的時間分辨熒光生化分析技術由于可有效消除生物樣品背景熒光的干擾,使得其在高靈敏度生化分析領域呈現(xiàn)出廣泛的應用價值,而設計合成對生物活性組分具有特異性識別與熒光響應功能的稀土配合物熒光分子探針,對于時間分辨熒光生化分析技術的發(fā)展與應用起著關鍵的作用。在本博士論文的研究中,通過適當?shù)呐湮惑w結構修飾,設計合成了幾種對次氯酸及生物硫醇具有特異性識別與熒光響應功能的新型稀土配合物熒光分子探針,在探針性質表征充分的基礎上,探究了其在時間分辨熒光生物成像測定中的應用性能。以聯(lián)三吡啶多羧酸銪（Ⅲ）配合物為發(fā)光基團,利用在其配位體中引入2,4-二硝基苯肼衍生物基團的方法,設計合成了一種次氯酸（HOCl）特異性響應銪（Ⅲ）配合物熒光探針NPPTTA-Eu3+。分子內光誘導電子轉移（PET）的存在使得探針的熒光十分微弱,但與HOCl的反應可切除二硝基苯胼基團,使得銪（Ⅲ）配合物的熒光恢復。該探針對HOCl的熒光響應具有速度快、特異性好等優(yōu)點,使其可用于水溶液中HOCl的高靈敏度時間分辨熒光測定（檢測下限達1.1 nM）�；谠撎结�,成功實現(xiàn)了活體RAW264.7細胞中內源性及大型蚤中外... 

【文章來源】：大連理工大學遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：123 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．６?Ｅｕ１１１和Ｔｂ１１１離子配合物的發(fā)光原理??Ｆｉｇ．?１．６?Ｅｍｉｓｓｉｏｎ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ?ｏｆ?ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ?Ｅｕ３＋?ａｎｄ?Ｔｂ３＋ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ??

器預留一定的延遲時間，待短壽命的背景熒光及散射光衰減消失后再采集來自樣??品的長壽命熒光信號，因此可極大地降低本底噪音，進而顯著提高分析檢測的信??噪比與靈敏度［６（）１。圖１．７為時間分辨熒光檢測的原理示意圖。??Ｃｙｃｌｅ?ｔｉｍｅ?（１ｍｓ）???Ｆｌａｓｈ?ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ??．？￥＊?ｉ?Ｓｈｏｒｔ－ｌｉｖｅｄ?ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ??Ｊ?Ｌｏｎｇ－ｌｉｖｅｄ?ｌａｎｔｈａｎｉｄｅ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ??ｇ?Ｄｅｌａｙ?！??售?ｔｉｍｅ?Ｃｏｕｎｔｉｎｇ，ｔＴｍｅ＾?｜??］?＼?，’，，，，，?Ｒｅｃｏｖｅｒｙ?ｔｉｍｅ??￣ｉ?１?ｉ?ｉ???〇?２００?６００?１〇〇〇??Ｔｉｍｅ／卩?ｓ??圖１．７時間分辨熒光檢測的原理??Ｆｉｇ．?１．７?Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｏｆ?ｔｉｍｅ－ｇａｔｅｄ?ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ?ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ??近年來，熒光顯微鏡成像及傳感技術作為監(jiān)測生物系統(tǒng)中生物活性組分的含??量、分布和轉輸過程的重要工具和方法，在生物學、臨床醫(yī)學以及新藥研發(fā)等方??面發(fā)揮著重要的作用［６１】。作為熒光顯微鏡生物成像技術的一個重要組成部分，基??于稀土配合物探針的時間分辨熒光成像技術在蛋白標記陽］、病原微生物檢測［？－６７］??及免疫細胞化學［６８］等多個方面得到了廣泛的應用與發(fā)展。與傳統(tǒng)利用有機染料探??針的穩(wěn)態(tài)熒光生物成像相比，時間分辨熒光成像技術通過利用激發(fā)后經過一定的??延遲時間再成像的方式

針及ＬｙｓｏＴｍｃｋｅｒ?Ｂｌｕｅ共培養(yǎng)后的共聚焦成像測定證明了探針的溶酶體定位性能，??而大型蚤體內一氧化氮的時間分辨熒光成像實驗結果進一步證明了?ＴＲＰ－ＮＯ在??復雜生物樣品測定中的適用性。圖１．１２給出了幾種可用于活性氧／氮物種檢測的??稀土配合物熒光探針的結構。??。續(xù)Ｑ氣蹲＇ｘ：ｎａ??〇乂?ＰＥＴ?ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ?。乂?ＰＥＴ?ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ?［?Ｗ?」３??ＴＰＲ１?丨?Ｅｕ（ｐｆｄａｐ）３（ｔｐｙ）ｌ??ＬＪ??＇ｈｏ?ｒ－９?Ｌｏｎｇ－ｌｉｖｅｄ?〇２??病＾里。聲：一??。弋?？０Ｈ?“。?Ｅｘｃ＾�。模茫欤蓿辏�??ＴＰＲ２?ＰＥＴ?ｓｗｉｔｃｈ?ｏｈ?＿?Ｎ?Ｎ＊＾］?＾??ｈｙｄｒｏｘｙｌ３ｔ６ｄ?ｂｙ?ＯＨ?ｅｔ?ｃｏｏ－＊＾〇〇＊?ｃｏｏ?＊＾ｃ〇〇??〇?＼?ｒ?〇、、?、ｖ?ＴＲＰ－ＮＯ??ＨＯ?丫Ａ?匕？＇?Ｒ３??Ｎ＾Ｎ?．－Ｈ２０?Ｉ！?］?Ｎ?１??〇人?１?Ｒ，?＝?ＣＯＯＨ．?Ｒ２?＝?Ｒ３?＝Ｈ?。乂?ｒ！’’．Ｉ?１１?：??；ｃｒ？＝ｈ＝ｈｈ?酬啊成（，－??６?Ｒ，＝?Ｒ２?＝?Ｒ３?＝ＣＯＮＨＭｅ??圖１．１２幾種基于稀土配合物的活性氧／氮物種熒光探針??Ｆｉｇ．?１．１２?Ｓｅｖｅｒａｌ?ｌａｎｔｈａｎｉｄｅ?ｃｏｍｐｌｅｘ－ｂａｓｅｄ?ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ?ｐｒｏｂｅｓ?ｆｏｒ?ＲＯＳ?ａｎｄ?ＲＮＳ??１５??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]檢測活性氧物種的氧雜蒽類光學探針的研究進展[J]. 陳巍,馬會民.  分析化學. 2012(09)
[2]分析化學在生命科學中的應用進展[J]. 姚武.  黃山學院學報. 2006(03)



本文編號：3590671