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溶酶體靶向的碳點(diǎn)在pH檢測(cè)中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2022-01-05 15:37
  碳點(diǎn)(Carbon dots,CDs)由于具有尺寸小、可調(diào)的光致發(fā)光特性、低毒性、優(yōu)異的穩(wěn)定性和生物相容性等特點(diǎn),在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。我們通過(guò)水熱法成功地制備了熒光CDs,通過(guò)各種分析技術(shù)對(duì)其基本的理化性能進(jìn)行了表征,并針對(duì)其在pH檢測(cè)中的應(yīng)用展開(kāi)了研究。本論文的主要工作內(nèi)容如下:我們選用對(duì)苯二胺和硫脲作為反應(yīng)的起始原料,利用水熱法制備了熒光CDs,其尺寸為7.8±0.65 nm。通過(guò)對(duì)CDs的結(jié)構(gòu)分析,發(fā)現(xiàn)其表面含有豐富的親水性官能團(tuán),如:胺基、羧基和羥基等,它們賦予了其良好的水溶性。此外,CDs還具有優(yōu)良的光致發(fā)光的特性和穩(wěn)定性。最重要的是,CDs的熒光具有出色的pH響應(yīng)能力、優(yōu)異的可逆性和抗干擾性能。我們通過(guò)溶酶體共定位實(shí)驗(yàn)證明了CDs具有溶酶體靶向的功能,與商業(yè)化的溶酶體探針(LTR)相比,CDs具有更高的光穩(wěn)定性。我們借助共聚焦激光掃描顯微鏡和活體熒光成像系統(tǒng),證明了CDs不僅可以檢測(cè)活細(xì)胞和炎癥細(xì)胞內(nèi)pH的變化,而且能在線(xiàn)追蹤生物體內(nèi)炎癥部位的pH的波動(dòng)。本工作為研究pH相關(guān)的生理和病理過(guò)程提供了一個(gè)新的思路。 

【文章來(lái)源】:長(zhǎng)春工業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】:60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 CDs的發(fā)展
    1.2 CDs的制備
        1.2.1 自上而下
            1.2.1.1 電弧放電法
            1.2.1.2 激光消融法
            1.2.1.3 電化學(xué)氧化法
        1.2.2 自下而上
            1.2.2.1 水熱法/溶劑熱法/熱解法
            1.2.2.2 微波法
    1.3 CDs的結(jié)構(gòu)
    1.4 CDs的性質(zhì)
        1.4.1 光學(xué)性質(zhì)
            1.4.1.1 紫外可見(jiàn)吸收
            1.4.1.2 光致發(fā)光
        1.4.2 毒性
    1.5 CDs的生物應(yīng)用
        1.5.1 生物成像
        1.5.2 傳感
        1.5.3 藥物/染料/基因的傳遞
        1.5.4 抗菌和抗氧化活性
    1.6 立題背景和研究意義
        1.6.1 立題背景
        1.6.2 研究意義
第2章 pH響應(yīng)型熒光碳點(diǎn)的制備及表征
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.3 CDs的制備
        2.2.4 CDs的基本表征
        2.2.5 CDs熒光壽命的計(jì)算
        2.2.6 CDs的穩(wěn)定性
        2.2.7 磷酸氫二鈉(DHP)-檸檬酸(CA)緩沖溶液的配制
        2.2.8 熒光CDs的pH滴定實(shí)驗(yàn)
        2.2.9 pKa值的計(jì)算
        2.2.10 CDs熒光的pH可逆性和抗干擾性
        2.2.11 統(tǒng)計(jì)分析
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 CDs結(jié)構(gòu)表征
        2.3.2 光學(xué)性質(zhì)
        2.3.3 穩(wěn)定性
        2.3.4 pH響應(yīng)性
        2.3.5 pH響應(yīng)性的機(jī)理
        2.3.6 CDs熒光的pH可逆性和抗干擾性
    2.4 本章小結(jié)
第3章 靶向溶酶體的碳點(diǎn)基熒光探針用于監(jiān)測(cè)體內(nèi)和體外的pH變化
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.4 細(xì)胞的生物相容性
        3.2.5 細(xì)胞內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)
        3.2.6 溶酶體共定位實(shí)驗(yàn)
        3.2.7 細(xì)胞在不同pH中的成像
        3.2.8 細(xì)胞炎癥實(shí)驗(yàn)
        3.2.9 pKa值的計(jì)算
        3.2.10 活體熒光成像
        3.2.11 統(tǒng)計(jì)分析
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 生物相容性
        3.3.2 細(xì)胞內(nèi)吞
        3.3.3 溶酶體共定位
        3.3.4 CDs在細(xì)胞中的光穩(wěn)定性
        3.3.5 不同pH中的細(xì)胞成像
        3.3.6 細(xì)胞炎癥實(shí)驗(yàn)
        3.3.7 體內(nèi)熒光成像
    3.4 本章小結(jié)
第4章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
攻讀碩士學(xué)位期間研究成果



本文編號(hào):3570612

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