熒光探針具有響應(yīng)快速、靈敏高效、檢測(cè)限低、成本經(jīng)濟(jì)等優(yōu)勢(shì),被廣泛應(yīng)用于基因測(cè)序、早期疾病診斷、生物分析、食品檢測(cè)等領(lǐng)域�；谥c(diǎn)介導(dǎo)的鏈置換技術(shù)所構(gòu)建的熒光生物傳感器,不僅具備上述優(yōu)勢(shì),還提高了熒光探針的可編程性,有效的增強(qiáng)了對(duì)復(fù)雜目標(biāo)的識(shí)別能力。同時(shí),它能與核酸適配體、DNA邏輯電路和酶催化等技術(shù)良好結(jié)合,拓寬了多種生物分析物的檢測(cè)識(shí)別范圍。目前該機(jī)制在支點(diǎn)激活和調(diào)控方面還存在短板,其支點(diǎn)區(qū)域具有堿基序列依賴性,且支點(diǎn)穩(wěn)定性不高,設(shè)計(jì)步驟繁瑣,不利于應(yīng)用范圍廣的熒光生物傳感器的構(gòu)建。針對(duì)目前問題,本論文設(shè)計(jì)了一種基于交叉支點(diǎn)介導(dǎo)DNA鏈置換的熒光探針,并應(yīng)用在單堿基錯(cuò)配識(shí)別和目標(biāo)寡核苷酸的識(shí)別。通過交叉支點(diǎn)等多種方案激活后續(xù)鏈置換反應(yīng),實(shí)時(shí)熒光監(jiān)測(cè)和聚丙烯酰胺凝膠電泳實(shí)驗(yàn)表明了該方案的可行性。具體研究工作如下:（1）交叉支點(diǎn)的構(gòu)建及DNA鏈置換反應(yīng)的研究:我們構(gòu)建了一種新型交叉支點(diǎn)介導(dǎo)鏈置換機(jī)理,該交叉支點(diǎn)是由兩組DNA序列完全獨(dú)立的寡核苷酸鏈R和T組成,激活下一步DNA鏈置換反應(yīng)并調(diào)控鏈置換反應(yīng)速率。對(duì)多條寡核苷酸的單堿基錯(cuò)配試驗(yàn)和支點(diǎn)長度影響鏈置換速率實(shí)驗(yàn),優(yōu)化了該體系的識(shí)別能力... 

【文章來源】：湘潭大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PNA雜交原理圖MALDI-TOFMS實(shí)驗(yàn)SherryXiChen等[10]提出了一種條件性DNA熒光探針，能有效地區(qū)分雙鏈DNA(dsDNA)中多種單堿基錯(cuò)配，且實(shí)現(xiàn)了DNA長片段中單個(gè)堿基的有效識(shí)別

圖1.2雙鏈支點(diǎn)交換機(jī)制的示意圖

基于GO的DNA熒光傳感分析示意圖


本文編號(hào)：3409540