核酸是在生命活動(dòng)中扮演重要角色的一類生物大分子,其中一些短片段的核酸近年來(lái)受到了廣泛關(guān)注,如細(xì)胞外游離DNA（cfDNA）、微小RNA（microRNA）等。因?yàn)檫@些核酸往往是疾病標(biāo)志物或治療的靶點(diǎn),所以這些核酸的檢測(cè)具有重要的價(jià)值。然而,由于它們往往以較低濃度存在于外泌體、血液或唾液等復(fù)雜樣品中,因此其檢測(cè)面臨著“能否測(cè)得到”和“能否測(cè)得準(zhǔn)”的問(wèn)題。為此,本文通過(guò)磁分離來(lái)消除樣品中共存組分的影響,實(shí)現(xiàn)待測(cè)對(duì)象的分離和富集,進(jìn)而通過(guò)核酸信號(hào)放大技術(shù)提高檢測(cè)靈敏度,實(shí)現(xiàn)了血清、細(xì)胞培養(yǎng)液等復(fù)雜樣品中核酸的高靈敏檢測(cè),具體包括:1.基于磁珠輔助的催化發(fā)夾組裝和“DD-A”FRET信號(hào)檢測(cè)復(fù)雜樣品中的核酸本方法設(shè)計(jì)了三條DNA發(fā)夾探針,分別是修飾在磁珠上的Capture、雙標(biāo)供體（FAM）的H1和單標(biāo)受體（TAMRA）的H2。首先,磁珠上的Capture捕獲樣品中的目標(biāo)物,同時(shí)Capture暴露出一段可以觸發(fā)CHA的片段;接著,通過(guò)磁場(chǎng)的作用即可將目標(biāo)物分離和富集出來(lái);最后,磁珠被重懸于含有H1和H2的緩沖液中并引發(fā)CHA,結(jié)果形成大量的H1/H2復(fù)合物,從而觀察到明顯的FRET信號(hào)。然而在... 

【文章來(lái)源】：湖南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：91 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

SP探針濃度的優(yōu)化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Small nucleolar RNAs （snoRNAs） as potential non-invasive biomarkers for early cancer detection[J]. Wen-Dan Chen,Xiao-Feng Zhu.  Chinese Journal of Cancer. 2013(02)
[2]聯(lián)合檢測(cè)外周血hTERT mRNA及GGT mRNA-H表達(dá)對(duì)小肝癌早期診斷的價(jià)值[J]. 隋璐璐,劉小方,許政.  中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志. 2011(01)



本文編號(hào)：3385381