發(fā)布時間：2021-08-22 09:21

　　L-抗壞血酸（又名維生素C）是一種人體必須的營養(yǎng)元素,在人體多種生理活動中均起到重要作用,但由于其不穩(wěn)定性極大限制了應用。2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸（AA-2G）是一種L-抗壞血酸衍生物,具有穩(wěn)定性好、生理活性與L-抗壞血酸最接近等優(yōu)勢。AA-2G主要通過酶法合成,環(huán)糊精葡萄糖基轉移酶（CGTase）被認為是合成AA-2G的最佳酶源。本研究利用海洋微生物Y112所產的CGTase催化L-抗壞血酸和β-環(huán)糊精合成AA-2G,首先采用單因素試驗優(yōu)化游離酶合成AA-2G的條件,進一步通過響應面法對AA-2G的轉化條件進行了考察。然后采用吸附交聯(lián)包埋法固定化CGTase,研究了固定化CGTase的穩(wěn)定性,并探討了與游離酶相比利用固定化CGTase轉化合成AA-2G的優(yōu)勢,為今后酶法轉化合成AA-2G的研究提供了理論基礎。研究結果分述如下:游離CGTase轉化合成AA-2G的條件優(yōu)化:采用單因素試驗初步優(yōu)化游離酶合成AA-2G的條件,考察pH、加酶量、底物濃度、溫度、底物配比、反應時間對AA-2G產量的影響,并通過Plackett-Burman試驗設計對影響AA-2G合成的6個因素進... 

【文章來源】：上海海洋大學上海市

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

AA-2G標準樣品、VC標準品及轉化反應液HPLC圖

18h，24 h，36h，42 h，48h。由圖2-3 可知，AA-2G 的產量隨著反應時間的延長而逐漸增大，當反應時間延長至 24 h時，AA-2G 的產量最高，超過 24 h 后 AA-2G 產量開始減少，所以選擇 24 h 進行后續(xù)酶法轉化合成 AA-2G 條件優(yōu)化研究。(b)VCAA-2G(c)VC

圖 2-3 轉化時間對合成 AA-2G 的影響Fig. 2-3 Effect of time on the synthesis ofAA-2G度對酶法轉化合成 AA-2G 的影響度對 CGTase 酶法轉化合成 AA-2G 的影響，保持其他條件為 15℃，25℃，30℃，35℃，40℃，45℃，50℃，55 ℃進，隨著轉化溫度的升高，AA-2G 的產量也在不斷增加，溫繼續(xù)升高溫度，AA-2G 的產量呈現(xiàn)下降的趨勢，這可能是轉化反應速度加快，而超過 40℃后溫度過高造成酶活有部 40℃進行后續(xù)酶法轉化合成 AA-2G 條件優(yōu)化研究。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]海藻酸鈉包埋法固定L-阿拉伯糖異構酶的研究[J]. 王靜,揣玉多,湯衛(wèi)華,侯婷.  食品研究與開發(fā). 2017(16)
[2]維生素C對蝦類營養(yǎng)免疫作用的研究進展[J]. 鄧雪瑩.  廣東飼料. 2017(06)
[3]淺談維生素C在養(yǎng)豬生產中的應用[J]. 王仁華.  湖南飼料. 2017(03)
[4]α-環(huán)糊精葡萄糖基轉移酶的高效表達及酶法制備AA-2G條件優(yōu)化[J]. 邢琳,張秀華,釗倩倩,劉飛,顏震,陳勉,侯重文,朱希強,凌沛學.  中國生化藥物雜志. 2016(11)
[5]1株產α-環(huán)糊精葡萄糖基轉移酶菌株的產酶條件優(yōu)化[J]. 張曉磊,郝建華,鄭鴻飛,劉均忠,孫謐.  中國海洋藥物. 2015(05)
[6]環(huán)糊精葡萄糖基轉移酶的釀酒酵母表面展示及其生產2-O-α-D-吡喃葡萄糖基抗壞血酸[J]. 熊艷軍,宿玲恰,王蕾,吳敬,陳晟.  微生物學報. 2015(10)
[7]亞位點+1處突變提高軟化類芽胞桿菌環(huán)糊精糖基轉移酶底物麥芽糊精特異性[J]. 許喬艷,韓瑞枝,李江華,堵國成,劉龍,陳堅.  生物工程學報. 2014(01)
[8]功能化離子液體修飾的SBA-15固定化Burkholderia cepacia脂肪酶[J]. 唐蘇蘇,胡燚,余定華,鄒彬,江凌.  催化學報. 2012(09)
[9]維生素C化學修飾研究概述[J]. 馬娟,羅廣紹.  科技資訊. 2012(09)
[10]維生素C及其衍生物的制備工藝和應用[J]. 賈博.  河北化工. 2011(08)

碩士論文
[1]固定化CGTase生物轉化合成AA-2G及轉化過程優(yōu)化研究[D]. 單麗媛.江南大學 2016
[2]酶法轉化合成2-氧-α-D-吡喃葡萄糖基抗壞血酸[D]. 張子臣.江南大學 2010



本文編號：3357473