豬流行性腹瀉病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）是六大豬冠狀病毒之一,仔豬感染致死率可高達100%。該病毒在蝙蝠等野生動物體內(nèi)、在臨床癥狀消失數(shù)周的豬欄中亦有發(fā)現(xiàn),說明其傳播途徑廣,潛伏時間長。試紙條和酶聯(lián)免疫吸附（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）存在定量困難或假陽性問題。因此,開發(fā)便攜、精確的PEDV檢測方法,對于解決食品和環(huán)境問題十分有意義。表面增強拉曼散射（Surface enhanced Raman Scattering,SERS）具有指紋圖譜、免水干擾等優(yōu)點,被廣泛應用于環(huán)境監(jiān)測、食品安全和生物分析等領(lǐng)域。本研究以“三明治”夾心傳感模型為基礎(chǔ),以生物素功能化的金納米粒子（Bio-Au NP）和負載金納米粒子的磁珠（Magnetic bead modified with gold nanoparticles,MB@Au NP）構(gòu)建SERS信號探針,分別結(jié)合鏈霉親和素-生物素（SA-Bio）放大系統(tǒng)和磁分離富集技術(shù),設(shè)計了兩種分別檢測PEDV抗體的SERS傳感平臺。本文研究主要內(nèi)容和結(jié)果如... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 緒論
    1.1 PEDV的歷史與危害
    1.2 PEDV的檢測方法
        1.2.1 傳統(tǒng)的PEDV檢測方法
        1.2.2 近來的納米分析方法檢測PEDV
    1.3 SERS概述
        1.3.1 SERS的發(fā)展、機理和優(yōu)勢
        1.3.2 SERS探針
    1.4 SERS的分析檢測應用
        1.4.1 SERS檢測離子、分子
        1.4.2 SERS檢測生物標志物
        1.4.3 SERS檢測病毒
    1.5 論文設(shè)計思路和技術(shù)路線圖
        1.5.1 設(shè)計思路
        1.5.2 技術(shù)路線圖
第二章 金顆粒信號標簽(AuNP tag)結(jié)合鍍金玻片傳感平臺用于PEDV的檢測
    2.1 前言
    2.2 主要儀器與試劑
        2.2.1 主要儀器
        2.2.2 主要試劑
    2.3 實驗方法
        2.3.1 AuNP tag制備及傳感平臺構(gòu)建
        2.3.2 AuNP tag制備過程的表征實驗
        2.3.3 可行性實驗
        2.3.4 條件優(yōu)化實驗
        2.3.5 傳感器中單一器件缺失實驗
        2.3.6 傳感平臺信號空間穩(wěn)定性試驗
        2.3.7 線性實驗
        2.3.8 特異性實驗
        2.3.9 加標回收實驗
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 AuNP tag制備過程的表征
        2.4.2 實驗可行性驗證
        2.4.3 實驗條件優(yōu)化
        2.4.4 每個傳感器件對SERS強度影響
        2.4.5 信號均一性
        2.4.6 線性結(jié)果
        2.4.7 特異性結(jié)果
        2.4.8 血清樣品中的Ab_1加標回收
    2.5 本章小結(jié)
第三章 磁珠信號標簽(MB tag)結(jié)合玻碳電極傳感平臺用于PEDV的檢測
    3.1 前言
    3.2 主要儀器和試劑
        3.2.1 主要儀器
        3.2.2 主要試劑
    3.3 實驗方法
        3.3.1 MB tag及傳感平臺構(gòu)建過程
        3.3.2 可行性和信標對比實驗
        3.3.3 信號來源驗證實驗
        3.3.4 條件優(yōu)化實驗
        3.3.5 無探針傳感平臺信號的空間分布實驗
        3.3.6 完整傳感平臺信號的空間分布實驗
        3.3.7 傳感平臺信號隨時間變化實驗
        3.3.8 單個器件缺失實驗
        3.3.9 線性實驗
        3.3.10 特異性實驗
        3.3.11 加標回收實驗
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 MB tag的表征
        3.4.2 實驗可行性和優(yōu)勢
        3.4.3 信號來源驗證
        3.4.4 條件優(yōu)化
        3.4.5 GCE傳感信號均一性
        3.4.6 完整GCE傳感平臺信號均一性
        3.4.7 傳感的信號重現(xiàn)性
        3.4.8 單一器件缺失證明GSH等的作用
        3.4.9 線性實驗結(jié)果
        3.4.10 特異性結(jié)果
        3.4.11 加標回收
    3.5 本章小結(jié)
第四章 總結(jié)及展望
    4.1 全文總結(jié)
    4.2 展望
參考文獻
附錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉病毒的免疫電鏡診斷的研究[J]. 王繼科,劉長明,馬思奇,王明,魏鳳祥,于文濤,周金法.  中國畜禽傳染病. 1991(02)



本文編號：3200771