端粒是一種重要的生物結(jié)構(gòu),它存在于染色體的末端并且保護染色體內(nèi)的生命遺傳信息。但是生物體內(nèi)DNA復(fù)制的缺陷導(dǎo)致端粒的長度隨著細胞分裂次數(shù)的增加而縮短。端�？s短到一定長度時會造成染色體之間的融合以及遺傳信息的損壞,從而造成細胞的死亡。端粒酶是一種負責延長端粒的特別聚合酶,它可以把DNA復(fù)制損失的端粒長度填補起來,可以讓端粒不會因細胞分裂而有所損耗,使得細胞分裂的次數(shù)增加。端粒酶存在于所有的細胞中,在正常的細胞中端粒酶活性會受到抑制并未對端粒產(chǎn)生保護作用。但在腫瘤細胞中,抑制作用會被減弱,從而造成細胞的無限增殖且不會凋亡。因此,正常體細胞與腫瘤細胞之間不同的端粒酶活性可以作為腫瘤標志物以及潛在的化療靶點。端粒重復(fù)序列放大的方案（TARP）是目前最傳統(tǒng)的端粒酶活性檢測方法。該方法利用一個合成的非端粒重復(fù)DNA序列作為引物;然后,引物在端粒酶的作用下不斷地延伸;最后,用聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）放大延伸的產(chǎn)物并且通過凝膠電泳方法進行檢測。但是,該方法存在著方法檢測范圍小且受裂解液影響較大等缺點局限其應(yīng)用。本論文利用球形核酸結(jié)構(gòu)（SNA）構(gòu)建二種端粒酶活性檢測方法。1.我們設(shè)計一種可以檢測端粒酶活... 

【文章來源】：南京師范大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．２端粒隱縮??

的六個核苷酸加在端粒或者引物的３＇端；第四步，端粒酶沿著新合成ＤＮＡ鏈不??斷地易位并延伸端�；蛘咭�；端粒酶易位步驟為端粒酶攜帶著模板ＲＮＡ轉(zhuǎn)移??到ＤＮＡ的新的３端進行新一輪端粒合成［１６］。合成的循環(huán)如圖１．３所示。??因為端粒酶可以防止端粒在細胞分裂時候變短，所以端粒酶對癌細胞的無限??增殖起著至關(guān)重要的作用。在正常的細胞中端粒酶活性受到抑制并未對端粒產(chǎn)生??保護作用［１７］。在８５％－９０％的腫瘤細胞中端粒酶的活性沒有受到抑制，從而造成??細胞的無限增殖并不會凋亡［１８］。因此，正常體細胞與腫瘤細胞之間不同的端粒??酶活性表達程度可以作為腫瘤標志物以及潛在的化療靶點［１９１。????ｈＴＲ??????Ｔｈｅ?ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ??Ｉ??ＫＴＥＲＴ？?ｅｎｄ?ｂｉｎｄｓ?ｔｏ?ｔｈｅ??ｔｃｌｏｍｃｒａｓｅｃｏｍｐｌｅｘ??Ｒｅｉｔｅｒａｔｉｖｅ?＿????Ｔｅｌｏｍｅｒａｓｃ?ｃａｔａｌｙｚｅｓ??ａｄｄ，ｌ：ｏｎ?＾?ＩＮ?ＣＡＭＸＣＣＡＡＵｃｎｊｍ?＾ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ?ｏｆｉｈｅ??ｔｒａｎｓｌｏｃａｌ，ｏｎ?．?Ｇ－ｒｉｃｈｔｅｌｏｍｅｒｉｃ??ＣＡＡＵＣＣＣＡＡＵＣ?Ｔｈｅ?ｅｎｚｙｍｅ?ｃｏｍｐｌｅｘ??：ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｅｓ?ａｌｏｎｇ?ｉｈｅ??ｎｅｗｌｙ?ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ?ｓｉｒａｎｄ??Ｆｉｇｕｒｅ?１．３?Ｔｈｅ?ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ?ｅｘｔｅｎｄ?ＤＮＡ．ｔ，ｑ??圖１．３端粒酶延伸ＤＮＡ的過程??１．２．３端粒酶活性的檢測方法??在布萊克本與格雷德等先驅(qū)提出細胞內(nèi)存在端粒酶以后

．匕ｔ?％公’參??Ｎ?ｃｙｃｌｅｓ，?ｓ??３：、＇?：?ｉｔ??Ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ?ＥＸＯ?ＩＩＩ?Ｓｏｌｉｄ－ｓｔａｔｅ?Ａｇ／ＡｇＣｌ?Ｐｒ．４．３?Ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＤＮＡ－ｍｅｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ?ｂａｓｅｄ?ｓｉｇｎａｌ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ａｓｓａｙ?ｆｏｒ?ｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｕｓｉｎｇ?ｅｎｚｙｍｅ－ａｓｓｉｓｔｅｄ?ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ?ｃｕｒｒｅｎｔ－ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ?ａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ?ｓｏｌｉｄ－ｓｔａｔｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ?ｐｒｏｃｅｓｓ．［２９］??于酶抑制背景電流和高特性固態(tài)電化學(xué)過程的ＤＮＡ－金屬化的信號放大人端粒酶活性檢測。??


本文編號：2982622