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蛋白印跡考馬斯亮藍(lán)顯色水凝膠對目標(biāo)分子的特異性識別

發(fā)布時間:2021-01-03 19:11
  一直以來,蛋白質(zhì)都是生物體生命活動的核心物質(zhì),在生物體內(nèi)扮演著催化、運輸、免疫調(diào)節(jié)等角色。也正因此,蛋白質(zhì)的分離與檢測越來越受人關(guān)注。傳統(tǒng)單一的蛋白質(zhì)檢測手段由于其特異性差、操作繁瑣等局限性的存在,促使越來越多的科研工作者投入到蛋白質(zhì)檢測領(lǐng)域中。考馬斯亮藍(lán)蛋白質(zhì)檢測法由于其檢測速度快等優(yōu)點而備受關(guān)注,但色素與蛋白質(zhì)作用時所缺少的特異性作用是該方法的不足之處。而常用蛋白質(zhì)檢測手段中,具有良好特異性的免疫印跡法又由于抗體的制備與保存問題導(dǎo)致成本過高、推廣困難。源于生物免疫作用的分子印跡技術(shù)能夠制備出名為分子印跡聚合物的抗體類似物,利用該技術(shù)制備聚合物具有操作簡便、材料易保存等優(yōu)點。該技術(shù)的出現(xiàn)能夠很好的解決免疫印跡法的不足之處。因此,為了將兩種技術(shù)結(jié)合起來,本文研究了考馬斯亮藍(lán)與蛋白質(zhì)的作用機理,并用于指導(dǎo)考馬斯亮藍(lán)蛋白檢測法與分子印跡技術(shù)的聯(lián)用,制備出分子印跡顯色水凝膠。首先,我們研究了pH對考馬斯亮藍(lán)溶液顏色、吸收峰及其與蛋白質(zhì)作用的影響。通過改變考馬斯亮藍(lán)與蛋白質(zhì)的濃度,考察顯色的規(guī)律。證明了考馬斯亮藍(lán)分子存在的三種形態(tài)均能與牛血清白蛋白發(fā)生作用,作用后得到的締合物吸收峰在610 n... 

【文章來源】:福州大學(xué)福建省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:80 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

蛋白印跡考馬斯亮藍(lán)顯色水凝膠對目標(biāo)分子的特異性識別


圖1-2考馬斯亮藍(lán)分子結(jié)構(gòu)式??Fig.?1-2?The?structure?of?preparation?of?coomassie?brilliant?blue??

示意圖,分子印跡技術(shù),原理,示意圖


圳、傳感器疾病檢測[71,7\人造抗體[73,7?等各個領(lǐng)域。??分子印跡聚合物的基本制備過程[75]可用圖1-3表示。首先,讓模板分子與功??能單體預(yù)組裝;其次,加入適當(dāng)?shù)慕宦?lián)劑并引發(fā)單體間的聚合;之后用適當(dāng)?shù)南??脫劑破壞模板分子與功能單體間的相互作用,將模板分子從聚合物上洗脫下來,??便可得到分子印跡聚合物。MIPs可選擇性吸附目標(biāo)分子,而且可以能夠反復(fù)洗??脫與再次吸附,次數(shù)由材料的性質(zhì)決定。????SrfI.wL.ly?A??^?mW?■??Ten^lale?j??———-■?W??kJ?mZM??圖1-3分子印跡技術(shù)原理示意圖??Fig.?1-3?The?schematic?of?molecular?imprinting?technique??分子印跡技術(shù)按單體與模板分子在溶劑中的作用方式的不同,大致可以分為??四種,共價鍵法、非共價鍵法和半共價鍵法。??8??

示意圖,示意圖,共價鍵,多巴胺


?蛋白印跡考馬斯亮藍(lán)顯色水凝膠對目標(biāo)分子的特異性識別???1)共價鍵法又稱為預(yù)組裝法(見圖1-4),由\^1扭76]團隊提出。功能單體??與模板分子之間的結(jié)合位點依靠共價鍵完成,聚合后,再斷裂共價鍵以洗脫模板??分子。共價鍵法所用的物質(zhì)有硼酸酯、縮醛酮、螯合物、席夫堿、酯等[77]。該??方法的不足之處在于識別能力不高,不適用于快速識別。因為共價鍵的作用力強、??解離速度慢,所形成復(fù)合物的過程速度緩慢。Gu[78]等以多巴胺為模板,將聚合??物涂于玻璃碳電極上,通過硼氫化學(xué)鍵與空間位阻的雙識別性能來設(shè)計分子印跡??傳感器,并將該傳感器成功應(yīng)用于檢測人血漿樣本中的多巴胺。??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]酪氨酸酶催化乳清蛋白聚合耦聯(lián)超濾的效果研究[J]. 王文瓊,張?zhí)m威,韓雪.  食品與發(fā)酵工業(yè). 2017(09)
[2]聚乙二醇沉淀蛋清蛋白質(zhì)的規(guī)律及在卵白蛋白分離中的應(yīng)用[J]. 聞崇煒,趙燁清,石莉,歐陽臻.  食品科學(xué). 2018(01)
[3]考馬斯亮藍(lán)G-250與牛血清白蛋白的相互作用研究[J]. 王永剛,王世偉,李云春,冷非凡,馬建忠,王曉力,莊巖.  現(xiàn)代食品科技. 2016(01)
[4]蛋白質(zhì)組學(xué)實驗技術(shù)及其應(yīng)用[J]. 趙靜,王宏偉,田二杰,周變?nèi)A.  動物醫(yī)學(xué)進展. 2015(01)
[5]生物質(zhì)譜技術(shù)研究進展及其在蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用[J]. 楊倩,王丹,常麗麗,孫勇,靳翔,王旭初.  中國農(nóng)學(xué)通報. 2015(01)
[6]蛋白質(zhì)分子印跡技術(shù)的研究進展及應(yīng)用前景[J]. 孫寅靜,羅文卿,潘俊.  藥學(xué)學(xué)報. 2011(02)
[7]考馬斯亮藍(lán)顯色劑變色反應(yīng)機理的研究[J]. 曹穩(wěn)根,焦慶才,劉茜,陳雷.  化學(xué)學(xué)報. 2002(09)

博士論文
[1]牛血清白蛋白表面印跡材料的制備及其大分子識別特性之研究[D]. 史楠.中北大學(xué) 2015

碩士論文
[1]分子印跡技術(shù)及其研究進展[D]. 韓霜.東北石油大學(xué) 2014



本文編號:2955337

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