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不同原料殼寡糖的制備及抑菌活性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-10 21:20
【摘要】:甲殼素是一種天然高分子聚合物,廣泛存在于自然界中,殼聚糖是脫乙酰甲殼素。殼寡糖是殼聚糖的降解物,殼聚糖和殼寡糖均具有多種生物活性,如抑菌、抗腫瘤、抗氧化、增強(qiáng)免疫力等,廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)等行業(yè)。通常,殼聚糖是從蝦、蟹等的外骨骼中提取制備的。然而,蝦蟹制備殼聚糖受到季節(jié)、地域的限制;此外,隨著近年來(lái)海洋污染的增加,蝦和螃蟹來(lái)源的殼聚糖可能對(duì)人類(lèi)的健康造成一些危害;限制了殼聚糖的應(yīng)用。棘孢木霉的細(xì)胞壁中含有幾丁質(zhì),但有關(guān)棘孢木霉中殼聚糖提取制備的報(bào)道很少;棘孢木霉提取制備多糖、蛋白等后剩余的菌渣通常在露天直接填埋,造成了環(huán)境污染及生物資源浪費(fèi)。本文分別以蝦殼粉和棘孢木霉菌渣為原料制備殼寡糖,比較不同來(lái)源殼寡糖在結(jié)構(gòu)特性及抑菌活性上的差別。主要研究方法和結(jié)果如下:分別以蝦殼粉和棘孢木霉菌渣作為原材料采用堿法制備殼聚糖,得到殼聚糖粗品,命名為CT_1和CT_2,得率為10.78±0.02%和9.53±0.02%。采用紅外光譜法得出CT_1和CT_2均有殼聚糖的特征吸收峰,說(shuō)明CT_1和CT_2的均是殼聚糖。采用GB29941-2013食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)得CT_1和CT_2的脫乙酰度分別為82.40±0.57%和87.59±0.42%;黏度分別為23.25±0.02mPa·s和5.63±0.01 mPa·s。采用可見(jiàn)光分光光度法測(cè)得CT_1和CT_2的殼聚糖含量分別為33.90±0.09%和42.15±0.02%。采用高效液相色譜(HPLC)法測(cè)得CT_1的分子量分布范圍約為800 kDa和9 kDa;CT_2的分子量分布范圍大約為18kDa。采用單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn),利用殼聚糖酶分別對(duì)CT_1和CT_2降解,得到殼寡糖,命名為COS_1和COS_2。COS_1的最佳制備工藝為:酶解溫度43℃,酶解時(shí)間7h,加酶量30U/g殼聚糖,底物濃度6%(w/v);殼聚糖的水解率為91.98±0.12%。COS_2的最佳制備工藝為:酶解溫度40 ℃,酶解時(shí)間6h,加酶量30U/g殼聚糖,底物濃度8%(w/v);殼聚糖的水解率為91.03±0.57%。苯酚-硫酸法測(cè)得COS_1和COS_2的糖含量分別為 88.5±1.14%和 90.2±0.97%。通過(guò)薄層色譜(TLC)、HPLC 和 MALDI-TOF質(zhì)譜分析表明:COS_1是由殼三糖、殼四糖、殼五糖、殼六糖和四乙;瘹ち墙M成的混合物;COS_2是由殼三糖、殼五糖和殼六糖組成的混合物。抑菌性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:COS_1和COS_2對(duì)根霉、毛霉、青霉、曲霉均沒(méi)有抑制效果;對(duì)沙門(mén)氏菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌均有抑制作用且COS_2抑制效果比COS_1好。
【圖文】:

不同原料殼寡糖的制備及抑菌活性研究


圖3-l邋CT,和CT2的紅夕圈(a表示CT,邋,,邋b表示CT2)逡逑Fig.邋3-1邋The邋FT-IR邋profile邋of邋CT|邋and邋CT]逡逑

標(biāo)準(zhǔn)曲線,殼聚糖,標(biāo)準(zhǔn)曲線,出峰時(shí)間


根據(jù)高效液相色譜圖的出峰時(shí)間計(jì)算得出CT,和CT2所對(duì)應(yīng)的分子質(zhì)量的大致范逡逑圍。逡逑由圖3-3可知CT,在高效液相色譜圖中的出峰時(shí)間主要為8.644邋mill和丨4.352逡逑min,代入回歸方程計(jì)算得CTi的分子質(zhì)量分布范圍約為800邋kDa左右和9邋kDa左右。逡逑由圖3-4可知CT2在高效液相色譜圖中的出峰時(shí)間主要為13.7%邋min,代入回歸方程逡逑計(jì)算得CT2的分子質(zhì)量分布范圍約為18邋kDa左右。說(shuō)明,以蝦殼粉為原料提取制備逡逑的殼聚糖主要以大分子為主,而以棘孢木霉菌渣為原料提取制備的殼聚糖主要以小分逡逑子為主;文獻(xiàn)報(bào)道的以蝦殼、真菌及其菌渣制備的殼聚糖的分子量分布范圍約為5.2逡逑kDa[99],邋10kDa[2131,邋27kDa[221,100kDal99],邋126kDam等。逡逑27逡逑
【學(xué)位授予單位】:天津科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類(lèi)號(hào)】:O636.1

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本文編號(hào):2657916

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