本文關(guān)鍵詞：色譜質(zhì)譜技術(shù)在化學(xué)藥物雜質(zhì)研究中的應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：《化學(xué)藥物雜質(zhì)研究的技術(shù)指導(dǎo)原則》中規(guī)定：任何影響藥物純度的物質(zhì)統(tǒng)稱為雜質(zhì)。雜質(zhì)的研究是藥品開發(fā)的一項(xiàng)重要內(nèi)容，雜質(zhì)是否能被全面準(zhǔn)確地加以控制，直接關(guān)系到藥品的質(zhì)量可控性與安全性。所以在藥物的研究、生產(chǎn)、供應(yīng)和臨床使用等方面，必須保證藥物的純度。規(guī)范地進(jìn)行雜質(zhì)的研究，并將其控制在一個(gè)安全、合理的限度范圍之內(nèi)，，才能保證藥物的有效和安全。 近年來，隨著各類藥害事件發(fā)生頻率的提高及國人對食品、藥品安全性的關(guān)注程度的提高，CFDA對藥物臨床前研究中的雜質(zhì)相關(guān)分析越來越重視，對雜質(zhì)研究的要求已被提到一個(gè)空前的高度。雜質(zhì)研究是否全面，準(zhǔn)確已逐漸成為藥物臨床前申報(bào)是否成功的瓶頸之一。但與雜質(zhì)研究的標(biāo)準(zhǔn)日益提高嚴(yán)重不適應(yīng)的是目前研究的技術(shù)手段過于單一，過于陳舊。在傳統(tǒng)的藥物質(zhì)量控制研究過程中，雜質(zhì)分析主要以色譜方法為主，大多數(shù)搭配單一檢測器，這就給藥物的雜質(zhì)研究帶來以下幾個(gè)問題： 第一、單一檢測器難以對不同物化特性的雜質(zhì)進(jìn)行全面檢測，容易造成雜質(zhì)的遺漏。 第二、色譜方法只能對能夠獲取對照品的雜質(zhì)進(jìn)行鑒別，檢測靈敏度及檢測信息的局限性導(dǎo)致其在發(fā)現(xiàn)及鑒別痕量雜質(zhì)及未知雜質(zhì)方面存在困難。 第三、色譜方法在檢測限及線性范圍方面的局限性導(dǎo)致其在低豐度雜質(zhì)的定量檢測方面亦存在困難。 本研究針對目前化學(xué)藥物雜質(zhì)研究中存在的問題，將不同種類的色譜-質(zhì)譜技術(shù)引入其中，遵循從簡單到復(fù)雜，從個(gè)體到系統(tǒng)的原則，探索使用色譜-質(zhì)譜技術(shù)對化學(xué)藥物臨床前研究中的雜質(zhì)分析相關(guān)問題進(jìn)行探討，從實(shí)際案例中總結(jié)色譜-質(zhì)譜技術(shù)在藥物雜質(zhì)的定性、定量分析中的可行性及方法、策略。 文章共分為以下幾部分： 1.超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在藥物雜質(zhì)定性鑒別中的應(yīng)用 應(yīng)用超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜對兩種藥物鹽酸環(huán)噴托酯滴眼液和原料藥三羥芐基芐絲肼中的雜質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，鹽酸環(huán)噴托酯滴眼液在氧化條件下易產(chǎn)生一個(gè)雜質(zhì)，該雜質(zhì)保留時(shí)間在主成分之后。通過一級質(zhì)譜、二級質(zhì)譜以及主成分的裂解規(guī)律確定了該雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)。對三羥芐基芐絲肼進(jìn)行了進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確認(rèn)，通過液相質(zhì)譜分離發(fā)現(xiàn)了4個(gè)雜質(zhì)，利用UHPLC-Q-TOF/MS中提供的準(zhǔn)確的分子量進(jìn)行了分子式篩選，通過二級質(zhì)譜的數(shù)據(jù)對4個(gè)雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了確認(rèn)，并確定了其裂解規(guī)律。 實(shí)驗(yàn)表明，UHPLC-Q-TOF/MS在在線分析藥物痕量雜質(zhì)結(jié)構(gòu)中具有方便、快捷的優(yōu)勢，可以大大提高了實(shí)驗(yàn)的效率。 2.鹽酸普拉格雷片的雜質(zhì)分析 本章首先結(jié)合四大光譜（NMR，UV，IR，MS）對三類仿制藥鹽酸普拉格雷片劑中3個(gè)雜質(zhì)的對照品進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析，供后續(xù)研究使用。通過核磁分析對物質(zhì)中的信號峰進(jìn)行了歸屬，推斷出了其具體結(jié)構(gòu)，質(zhì)譜分析對得到的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了分子量及分子式的確認(rèn)，紅外光譜對3中物質(zhì)中的官能團(tuán)進(jìn)行了分析，紫外光譜儀確定了3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的最大吸收波長。然后利用UHPLC-Q-TOF/MS對鹽酸普拉格雷片中的降解雜質(zhì)進(jìn)行分析。將鹽酸普拉格雷原料藥和制劑于一定的降解條件下（酸、堿、氧化、高溫、光照）放置一定時(shí)間后進(jìn)行分離分析。在空白對照樣品中共發(fā)現(xiàn)了6個(gè)工業(yè)雜質(zhì)，在進(jìn)行降解的樣品中共找到了13個(gè)降解雜質(zhì)。最終結(jié)合質(zhì)譜數(shù)據(jù)、文獻(xiàn)調(diào)研以及藥物的合成路線確定了各雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)以及相應(yīng)的裂解規(guī)律。文章闡明了鹽酸普拉格雷片中潛在的降解雜質(zhì)的來源及降解規(guī)律，可為藥品生產(chǎn)過程提供了一定的參考和借鑒。 3.鹽酸美金剛片的降解實(shí)驗(yàn)研究 本章首先利用氣相色譜方法對仿制藥品鹽酸美金剛片中的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行定量方法開發(fā)，在方法專屬性檢查中發(fā)現(xiàn)降解實(shí)驗(yàn)中存在著嚴(yán)重的物料不守恒現(xiàn)象，即雜質(zhì)的上升量遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于主成分的下降量，經(jīng)過條件優(yōu)化不能得到改善，說明原方法對鹽酸美金剛片有關(guān)物質(zhì)的檢查存在著一定的不足。利用UHPLC-Q-TOF/MS對降解樣品進(jìn)行檢測并發(fā)現(xiàn)了新的雜質(zhì)，初步解釋了氣相色譜中的不守恒現(xiàn)象。深入研究后，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在酸、堿、高溫、氧化破壞中基本上可以達(dá)到物料守恒的要求，光照破壞中主成分的下降率和雜質(zhì)的上升率均不明顯，說明樣品在光照下是穩(wěn)定的。最后對在液相色譜-質(zhì)譜中發(fā)現(xiàn)的降解雜質(zhì)進(jìn)行研究，確定了7個(gè)雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)。本實(shí)驗(yàn)同時(shí)也說明了在實(shí)驗(yàn)過程中多種方法結(jié)合的必要性，實(shí)驗(yàn)結(jié)合多種分析儀器對鹽酸美金剛片進(jìn)行研究，為該藥物質(zhì)量控制方法的完善提供了依據(jù)。 4.鹽酸美金剛片中雜質(zhì)的限量檢查 繼前一章對鹽酸美金剛片的定性分析后，本章將對其可能存在的重要的雜質(zhì)進(jìn)行限量分析，其中包括三個(gè)工藝雜質(zhì)（1,3-二甲基金剛烷、3,5-二甲基-1-金剛烷醇、1-溴-3,5-二甲基金剛烷）和2個(gè)降解雜質(zhì)（甲�；澜饎偘�、美金剛-乳糖結(jié)合物）。其中1,3-二甲基金剛烷、3,5-二甲基-1-金剛烷醇、1-溴-3,5-二甲基金剛烷、甲�；澜饎偘窞樾》肿踊衔铮脷庀嗌V法進(jìn)行研究；美金剛-乳糖結(jié)合物為大分子化合物，且沒有紫外吸收的官能團(tuán)，故利用HPLC-ELSD進(jìn)行研究。結(jié)果表明，兩種方法的靈敏度可達(dá)到要求，且5個(gè)物質(zhì)的線性關(guān)系良好，儀器精密度良好，樣品在一定時(shí)間內(nèi)穩(wěn)定，回收率均在80%-120%之間。 兩種限量方法相輔相成，對鹽酸美金剛中的雜質(zhì)進(jìn)行全面的限量控制，可作為保證該藥品雜質(zhì)控制的有效手段。 本研究從新藥臨床前申報(bào)的具體需求出發(fā)，綜合運(yùn)用色譜-質(zhì)譜技術(shù)解決化學(xué)藥物雜質(zhì)研究中的各類定性、定量問題。將高分辨串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用于藥物雜質(zhì)的定性鑒別，建立了高靈敏度和高準(zhǔn)確度的藥物雜質(zhì)分析方法。為將色譜-質(zhì)譜技術(shù)從實(shí)驗(yàn)室過渡到藥物研發(fā)領(lǐng)域做出了有益探索，為建立更高標(biāo)準(zhǔn)的藥物質(zhì)量控制體系尤其是雜質(zhì)控制提供了參考和借鑒。
【關(guān)鍵詞】：藥物雜質(zhì) 鹽酸普拉格雷片 鹽酸美金剛片 色譜-質(zhì)譜技術(shù)
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R917;O657.63
【目錄】：

• 摘要7-10
• Abstract10-13
• 縮略詞13-14
• 第一章 前言14-18
• 一、 課題背景介紹14-17
• 二、 課題的研究內(nèi)容和意義17-18
• （一） 課題的研究內(nèi)容17
• （二） 課題的研究意義17-18
• 第二章 超高效液相色譜 四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在藥物雜質(zhì)定性鑒別中的應(yīng)用18-33
• 第一節(jié) 概述18-19
• 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)部分19-33
• 一、 鹽酸環(huán)噴托酯滴眼液中氧化雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)確定19-24
• （一） 材料與試劑19
• （二） 色譜條件19
• （三） 質(zhì)譜條件19-20
• （四） 供試品制備20
• （五） 結(jié)果20-24
• 二、 三羥芐基芐絲肼中雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)鑒定24-32
• （一） 材料與試劑24
• （二） 色譜條件24
• （三） 質(zhì)譜條件24-25
• （四） 供試品制備25
• （五） 結(jié)果25-32
• 三、 小結(jié)與討論32-33
• 第三章 鹽酸普拉格雷的雜質(zhì)分析33-77
• 第一節(jié) 概述33-34
• 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)部分34-77
• 一、 鹽酸普拉格雷雜質(zhì)對照品結(jié)構(gòu)確證34-53
• （一） 儀器與試藥34
• （二） 核磁測試34-46
• （三） 高分辨質(zhì)譜分析46-48
• （四） 紫外光譜測試48-50
• （五） 紅外光譜測試50-53
• 二、 鹽酸普拉格雷中降解雜質(zhì)分析53-76
• （一） 材料與試劑53
• （二） 色譜條件53-54
• （三） 降解條件54
• （四） 供試品的制備54-76
• 三、 小結(jié)與討論76-77
• 第四章 鹽酸美金剛片的降解實(shí)驗(yàn)研究77-95
• 第一節(jié) 概述77-78
• 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)部分78-95
• 一、 鹽酸美金剛片降解實(shí)驗(yàn)的氣相色譜法研究78-84
• （一） 儀器78
• （二） 試劑和試藥78
• （三） 色譜條件78
• （四） 供試品制備78-79
• （五） 結(jié)果79-84
• 二、 鹽酸美金剛片降解實(shí)驗(yàn)的液相色譜 質(zhì)譜研究84-94
• （一） 儀器84
• （二） 試劑和試藥84
• （三） 色譜條件84
• （四） 質(zhì)譜條件84-85
• （五） 萃取法提取樣品的質(zhì)譜研究結(jié)果85
• （六） 樣品處理的溶劑優(yōu)化85-87
• （七） 鹽酸美金剛片降解實(shí)驗(yàn)物料守恒研究87-94
• 三、 小結(jié)與討論94-95
• 第五章 鹽酸美金剛片中雜質(zhì)的限量測定95-132
• 第一節(jié) 概述95-97
• 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)部分97-132
• 一、 基于氣相色譜法的鹽酸美金剛片中雜質(zhì)限量測定97-120
• （一） 材料和方法97-98
• （二） 方法學(xué)考察98-119
• （三） 限量測定119-120
• 二、 基于液相色譜法的鹽酸美金剛片中雜質(zhì)美金剛 乳糖結(jié)合物的限量測定120-131
• （一） 材料和方法120-121
• （二） 方法學(xué)考察121-130
• （三） 限量測定130-131
• 三、 小結(jié)與討論131-132
• 全文總結(jié)132-133
• 參考文獻(xiàn)133-138
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文和參加科研工作情況138-139
• 致謝139

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：色譜質(zhì)譜技術(shù)在化學(xué)藥物雜質(zhì)研究中的應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：256188