動力學(xué)毛細管電泳法求解蛋白質(zhì)與單鏈脫氧核糖核苷酸結(jié)合的解離常數(shù)及可靠性分析
發(fā)布時間:2019-10-15 13:08
【摘要】:平衡混合物的非平衡毛細管電泳(NECEEM)可用于測定復(fù)合物的解離常數(shù)(K_d)。該文以單鏈脫氧核糖核苷酸結(jié)合蛋白(SSB)和單鏈脫氧核糖核苷酸(ssDNA)相互作用為模型,分析了相互作用強弱的電泳圖譜特征,測定了不同條件下復(fù)合物的K_d,建立了基于積分偏差的誤差分析方法。結(jié)果表明,SSB與ssDNA相互作用強弱所致的電泳圖差異、SSB與ssDNA的濃度比、毛細管分離溫度均影響K_d的計算。此外,基于25℃時SSB與5′-GGTTGGTGTGGTTGG-3′(15mer)人凝血酶適配體作用模型的數(shù)值分析結(jié)果表明,在現(xiàn)有實驗條件下,手動積分峰面積時產(chǎn)生的面積偏差對K_d計算結(jié)果有影響,但在10%的偏差區(qū)間內(nèi),所求K_d值的最大相對偏差小于7%,所求K_d值的誤差可忽略。該文證實了基于NECEEM求解動力學(xué)相關(guān)參數(shù)的方法可靠。
【作者單位】: 北京理工大學(xué)生命學(xué)院;公安部第一研究所;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(21675012,21375008,21175011)~~
【分類號】:Q50;O658.9
本文編號:2549649
【作者單位】: 北京理工大學(xué)生命學(xué)院;公安部第一研究所;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(21675012,21375008,21175011)~~
【分類號】:Q50;O658.9
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1 雷鳴,黃德盈,蘭金貴;La(Ⅲ)與脫氧核糖核苷酸的相互作用[J];中南民族學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版);1998年04期
2 ;[J];;年期
,本文編號:2549649
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