【摘要】：建立了超高效液相色譜-質譜聯(lián)用(UPLC/PDA-QDa)同時對大麻植物中Δ9-四氫大麻酚(Δ9-THC)、大麻酚(CBN)和大麻二酚(CBD)進行定性與定量分析的方法。繳獲的大麻植物用甲醇超聲萃取,采用甲醇(含0.1%甲酸)和超純水為流動相,等度洗脫,流速為0.2 m L/min,經(jīng)Waters UPLC BEH C_(18)柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)分離,利用光電二極管陣列檢測器(PDA)在220 nm波長下檢測,并通過質譜檢測器(QDa)對目標洗脫峰進行追蹤確證。在0.5~20μg/m L濃度范圍內,3種大麻酚類化合物的質量濃度與峰面積呈良好的線性關系,R≥0.999;低、中、高添加水平的平均回收率為82%~102%,相對標準偏差(RSD)在0.4%~4.1%之間。本方法穩(wěn)定、簡便、靈敏,能夠滿足檢測需求。根據(jù)Δ9-THC、(Δ9-THC+CBN)/CBD、Δ9-THC/CBD或CBN/CBD表型指數(shù),區(qū)分不同產(chǎn)地大麻的化學表型,為大麻植物的檢測分析和質量控制提供了有效手段。
【圖文】：

OHOC5H11（-）鄄駐9鄄trans鄄tetrahydrocannabinol駐9鄄四氫大麻酚(駐9鄄THC,C21H30O2,MW=314.5)OHOC5H11Cannabinol大麻酚(CBN,C21H26O2,MW=310.4)OHOHC5H11(CBD,C21H30O2,MW=314.5)Cannabidiol大麻二酚圖13種大麻酚類的分子結構式Fig．1Chemicalstructuresofthreecannabinoids2實驗部分2．1儀器與試劑ACQUITYUPLCH-Class超高效液相色譜儀(WatersEmpowerTM3數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，美國Waters公司);ACQUITY光電二極管陣列檢測器(PDA，可操作波長190～500nm，光學分辨率1．2nm)和ACQUITYQDaTM質譜檢測器(美國Waters公司);超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);臺式高速冷凍離心機(德國Sigma公司);MettlerToledo-XS105電子天平(瑞士Mettler公司);高速萬能粉碎機(天津市泰斯特儀器有限公司);0．22μmMCE針頭式過濾器(上海島津技邇商貿(mào)有限公司)。甲醇(美國FisherScientific公司)、甲酸(美國Sigma公司)為色譜純;實驗用水均為超純水(美國Millipore公司超純水裝置制備);Δ9-THC、CBD和CBN標準品(均為1．0mg/mL甲醇溶液，美國Ceril-liant公司)，!20℃避光保存。混合標準溶液的配制:分別準確移取Δ9-THC、CBD和CBN標準儲備液置于2mL容量瓶中，以甲醇稀釋并定容，配制成0．5、1、2、5、10和20μg/mL的系列混合標準溶液。2．2樣品前處理選取不同產(chǎn)地的30個大麻樣本，經(jīng)登記備案獲批后，研磨成均勻細粉待用。準確稱取10mg大麻植物粉末，置于15mL塑料離心管中，加入甲醇5mL，經(jīng)水浴超聲萃取30min后，以6000r/min離心5min，取上清液過0．22μm針孔濾膜，供UPLC/PDA-QDa分析。2．3分析條件和數(shù)據(jù)分析色譜條件:色譜柱為WatersACQUITYTMUPLCBEHC18柱(50mm×2．1mm，1?

不僅能達到較好的分離效果，且分離時間較短，目標分析物可在4min內流出色譜柱。為避免天然產(chǎn)物中組分眾多可能存在的樣品間干擾，將分離檢測時間延長至7min。采用優(yōu)化后的實驗條件，對大麻混合標準溶液及大麻植物樣品溶液檢測，3種目標大麻酚類化合物的色譜圖見圖2。2t（min）046A1232t（min）046B123圖2大麻混合標準溶液(A)和大麻植物樣品溶液(B)的超高效液相色譜圖Fig．2UPLCchromatogramsofcananbismixturereference(A)andcannabisplant(B)1．CBD，2．CBN，3．Δ9-THC．3．3UPLC方法學驗證3．3．1方法的專屬性在方法建立期間，通過優(yōu)化峰間距并增大分離度，保證峰的專屬性。CBD、CBN和Δ9-THC的保留時間分別為1．1、1．6和1．9min，各成分與其相鄰色譜峰的分離度均大于1．6，拖尾因子在1．16～1．23之間。同時，，QDa檢測器作為光學數(shù)據(jù)的補充，具有更高質量的定性質譜數(shù)據(jù)，可對組分進行進一步確證。在正離子模式下掃描，根據(jù)對混合標準溶液的碎片離子質譜圖分析，Δ9-THC、CBN和CBD的m/z分別為315、311和315。分別在m/z315和311下提取離子流質譜圖，對大麻樣本的洗脫峰進行比對分析。圖3和圖4是利用質譜檢測器QDa對Δ9-THC、CBN和CBD各峰的追蹤確證結果，與PDA檢測分析一致，且無基質干擾。在選定實驗條件下，所測的3個大麻酚類組分與其它組分完全分離，滿足含量測定要求。2t（min）Intensity(×104)046A2.04.06.08.010.0121002003004005001.StdCBDm/z130.35315.321002003004005002.StdTHCm/z315.302t（min）Intensity(×104)046B2.03.04.05.0120.01.00.0135135圖3大麻混合標準溶液(A)和?
【作者單位】： 中國人民公安大學;公安部物證鑒定中心;
【基金】：國家重大儀器研發(fā)專項毒品現(xiàn)場定性定量分析儀項目(No.2012YQ12004910)資助~~
【分類號】：O657.63;Q946


本文編號：2530908