【摘要】：由短肽自組裝成的納米結(jié)構(gòu)對(duì)生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)都有極大的應(yīng)用,因?yàn)檫@種具有自組裝結(jié)構(gòu)的模型肽的設(shè)計(jì)被證明是一個(gè)模擬蛋白質(zhì)生物活性的理想靶點(diǎn)。理想的短肽組裝結(jié)構(gòu)的設(shè)計(jì)不僅僅是由氨基酸的序列決定的,短肽二級(jí)結(jié)構(gòu)也是其中非常重要的一環(huán)。這樣的短肽組裝結(jié)構(gòu)包括由環(huán)肽組成的管狀結(jié)構(gòu)、控制序列的短肽自組裝成的納米纖維結(jié)構(gòu)、線(xiàn)性嵌段共肽自組裝成的囊泡結(jié)構(gòu)、循環(huán)分塊的短肽自組裝成的納米環(huán)狀結(jié)構(gòu)和模擬膠原的短肽自組裝成的納米膜狀結(jié)構(gòu)。然而由短肽自組裝成的納米結(jié)構(gòu)大多是以β-折疊為短肽的基本構(gòu)象,因?yàn)橄啾容^而β-折疊言,當(dāng)把無(wú)規(guī)的短肽折疊成α-螺旋構(gòu)象時(shí),使短肽能過(guò)穩(wěn)定折疊的相互作用和相鄰螺旋圈之間的酰胺形成的氫鍵所產(chǎn)生的焓不能彌補(bǔ)短肽鏈的折疊時(shí)所損失的大量的熵。而α肽鏈自組裝成所需的納米結(jié)構(gòu)的前提條件是短肽能過(guò)折疊形成穩(wěn)定的α-螺旋構(gòu)象�，F(xiàn)在我們可知的在水中實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定的a-螺旋構(gòu)象的方法有通過(guò)形成共價(jià)鍵的形式鏈接氨基酸側(cè)鏈和金屬螯合物等一些方法,除此之外環(huán)形短肽也被證明是一個(gè)形成穩(wěn)定a-螺旋構(gòu)象的有效方法。我們已經(jīng)證明,使一個(gè)線(xiàn)性短肽頭尾鏈接形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)可以強(qiáng)制改變其二級(jí)結(jié)構(gòu)從無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)轉(zhuǎn)變?yōu)閍-螺旋。這種a-螺旋肽通過(guò)一維的小膠束的堆積而自組裝成波狀的納米纖維。我們也在以前的文章中證明通過(guò)對(duì)β-折疊的短肽聚集體成環(huán)也可以形成α-螺旋構(gòu)象。然而,大部分α肽都很難實(shí)現(xiàn)在無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)和α-螺旋之間的動(dòng)態(tài)構(gòu)象轉(zhuǎn)換,因?yàn)榉�(wěn)定的α-螺旋構(gòu)象通常是通過(guò)共價(jià)鍵或者與動(dòng)態(tài)運(yùn)動(dòng)不相容的非共價(jià)鍵“縫合”實(shí)現(xiàn)的。而這種無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)和α-螺旋之間的動(dòng)態(tài)構(gòu)象轉(zhuǎn)換對(duì)實(shí)現(xiàn)“可切換的肽納米結(jié)構(gòu)”是必不可少的。因此,如何實(shí)現(xiàn)α-螺旋結(jié)構(gòu)和無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)結(jié)構(gòu)之間的動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)換成為了“可切換肽的納米結(jié)構(gòu)”的一個(gè)挑戰(zhàn)�？紤]到蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變來(lái)源于肽鏈的構(gòu)象變化,α-螺旋短肽的設(shè)計(jì)將預(yù)計(jì)將成為動(dòng)態(tài)納米結(jié)構(gòu)構(gòu)件的理想目標(biāo)。本文包括三章,前兩章的內(nèi)容是已發(fā)表工作,發(fā)表在j.am.chem.soc.2016上,第三章的工作是目前正在研究中的工作,其特點(diǎn)是對(duì)“對(duì)映體選擇性”的研究,分別討論了無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)和α-螺旋之間的可逆轉(zhuǎn)變和在水中基于α-螺旋短肽的自組裝所進(jìn)行的對(duì)映體選擇性分離。首先,在本文的第一章中,著重描述了如何實(shí)現(xiàn)短肽在水中的無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)和α螺旋之間的可逆轉(zhuǎn)換。我們認(rèn)為,如果在短肽鏈上橫向修飾聚醚樹(shù)枝狀小分子,通過(guò)聚醚鏈的熱脫水現(xiàn)象可以實(shí)現(xiàn)無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)結(jié)和α-螺旋之間的可逆轉(zhuǎn)換,然后由折疊成α-螺旋的短肽自組裝成肽納米結(jié)構(gòu)。其原理是由聚醚側(cè)鏈的熱脫水現(xiàn)象,可以增加聚醚側(cè)鏈和肽鏈骨架之間疏水作用以期盡量減少水對(duì)α-螺旋短肽鏈內(nèi)氫鍵的影響從而強(qiáng)制誘導(dǎo)無(wú)規(guī)的肽鏈“接受”α-螺旋構(gòu)象。這里我們對(duì)三個(gè)短肽(1,2,3)進(jìn)行了研究,其中短肽1由具有較高螺旋傾向的氨基酸序列kkk(faka)3fkkk組成,短肽2和短肽3則在短肽1的氨基酸序列的基礎(chǔ)上通過(guò)點(diǎn)擊化學(xué)在賴(lài)氨酸的邊基上修飾具有熱響應(yīng)特征的聚醚樹(shù)枝狀分子。短肽1的cd(圓二色譜)顯示,未經(jīng)任何修飾的短肽1在不同的溫度下都展現(xiàn)為無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)的二級(jí)結(jié)構(gòu),只有當(dāng)我們加入α-螺旋穩(wěn)定劑(三氟乙醇)時(shí),短肽1才能在水中折疊成穩(wěn)定的α-螺旋構(gòu)象。然而有趣的是,當(dāng)我們把溫度提升到一個(gè)確定的值時(shí),修飾在短肽2和短肽3側(cè)鏈上的具有熱響應(yīng)特征的聚醚樹(shù)枝狀分子可以誘導(dǎo)肽鏈從無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)轉(zhuǎn)變?yōu)棣?螺旋。在室溫條件下,短肽2(側(cè)鏈上修飾了兩個(gè)聚醚樹(shù)枝狀分子)的cd顯示大約在196nm處有一個(gè)很強(qiáng)的負(fù)峰,表明短肽2主要的二級(jí)結(jié)構(gòu)為無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)結(jié)構(gòu)。然而當(dāng)加熱溫度到50度時(shí),196nm處的負(fù)峰會(huì)紅移到大約208nm處,同時(shí)在222nm處出現(xiàn)一個(gè)新的負(fù)峰,這表示短肽2已經(jīng)從無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)轉(zhuǎn)變?yōu)棣?螺旋。相似的情況同樣發(fā)生在短肽3(側(cè)鏈上修飾了三個(gè)聚醚樹(shù)枝狀分子)上。室溫下,短肽3的cd在196nm處有一個(gè)強(qiáng)的負(fù)峰,表明此時(shí)短肽3的二級(jí)結(jié)構(gòu)主要是無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)。然而當(dāng)我們升高溫度時(shí),短肽3的cd分別在206nm和222nm處有負(fù)峰,這表明此時(shí)短肽3已經(jīng)折疊成α-螺旋構(gòu)象。值得注意的是短肽3在222nm處產(chǎn)生的負(fù)峰強(qiáng)度要強(qiáng)于短肽2,這表明當(dāng)升高溫度時(shí),短肽3比短肽2擁有更高的α-螺旋構(gòu)象比。這個(gè)結(jié)果表明短肽2和短肽3都可以在升高溫度時(shí)形成從無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)到α-螺旋的轉(zhuǎn)變。我們認(rèn)為這種現(xiàn)象的產(chǎn)生正是由于修飾在肽鏈側(cè)鏈上的聚醚樹(shù)枝狀分子的熱脫水現(xiàn)象造成的。因?yàn)槲覀儼l(fā)現(xiàn)短肽2和短肽3都是在升高溫度到45攝氏度時(shí)發(fā)生從無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)到α-螺旋的劇烈轉(zhuǎn)變,而聚醚鏈的最低臨界溫度正是45攝氏度,當(dāng)高于這個(gè)溫度時(shí)聚醚鏈的松散構(gòu)象會(huì)因?yàn)槊撍氨罎ⅰ睆亩T導(dǎo)短肽折疊成α-螺旋構(gòu)象。我們可以通過(guò)“短肽-水”之間的相互作用來(lái)理解為什么升高溫度可以得到穩(wěn)定的α-螺旋構(gòu)象。升高溫度后聚醚鏈的松散構(gòu)型會(huì)因?yàn)槊撍氨罎ⅰ?此時(shí)的聚醚側(cè)鏈會(huì)從一個(gè)兩親性的基團(tuán)轉(zhuǎn)變成一個(gè)完全疏水的基團(tuán)。這個(gè)疏水的基團(tuán)會(huì)和肽鏈上的疏水的側(cè)鏈(如丙氨酸和苯丙氨酸)產(chǎn)生強(qiáng)烈的相互作用從而減少肽鏈上可親水的表面面積。與此同時(shí)聚醚鏈上的氧原子也會(huì)和帶電荷的賴(lài)氨酸產(chǎn)生強(qiáng)烈的相互作用。這些來(lái)自聚醚樹(shù)枝狀分子的相互作用可以在“短肽-水”之間的相互作用時(shí)提供屏蔽效應(yīng),減少水對(duì)短肽鏈內(nèi)氫鍵的影響,從而可以在升溫后構(gòu)建穩(wěn)定的α-螺旋構(gòu)象。在擁有高體積分?jǐn)?shù)的聚醚鏈的短肽3的cd信號(hào)中222nm位置的負(fù)峰的強(qiáng)度要大于短肽2,這進(jìn)一步證明了聚醚樹(shù)枝狀分子越多則構(gòu)建穩(wěn)定的α-螺旋構(gòu)象就越有效。這和聚醚鏈在“短肽-水”之間的屏蔽效應(yīng)是一致的。至此,我們成功的通過(guò)對(duì)溫度的調(diào)節(jié)實(shí)現(xiàn)了短肽在水中的二級(jí)結(jié)構(gòu)的可逆轉(zhuǎn)變。這個(gè)可逆轉(zhuǎn)變將會(huì)成為α-短肽自組裝成“可切換的肽納米結(jié)構(gòu)”的關(guān)鍵。在本文第二章中,我們著重對(duì)α-短肽的形貌和應(yīng)用進(jìn)行了研究。首先經(jīng)過(guò)對(duì)α-短肽形貌的研究我們發(fā)現(xiàn),雖然短肽2和短肽3的氨基酸序列是相同的,但當(dāng)我們調(diào)節(jié)溫度到45攝氏度時(shí),短肽2和短肽3會(huì)自組裝成不同的兩種納米結(jié)構(gòu)。其中短肽2自組裝成圓盤(pán)狀結(jié)構(gòu),而短肽3則自組裝成囊泡結(jié)構(gòu)。對(duì)于短肽2,我們的設(shè)想是橫向修飾聚醚樹(shù)枝狀分子的棒狀α-螺旋短肽會(huì)彼此平行排列從而自組裝成二維的圓盤(pán)狀的平面納米結(jié)構(gòu)。為了進(jìn)一步觀(guān)察短肽2的自組裝納米結(jié)構(gòu),我們采用透射電子顯微鏡(tem)對(duì)短肽2進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。在室溫條件下,在透射電子顯微鏡中我們沒(méi)有觀(guān)察到任何明顯的聚集,同時(shí)動(dòng)態(tài)光散射(dls)實(shí)驗(yàn)也證明了這一點(diǎn),這說(shuō)明在室溫條件下,短肽2在水中以分子溶解的狀態(tài)存在。然而,當(dāng)我們升高溫度時(shí),短肽2的透射電子顯微鏡圖像顯示為平均粒徑為80nm的圓盤(pán)狀納米結(jié)構(gòu)。值得注意的是,圓盤(pán)的邊緣處有定向的折疊現(xiàn)象,這意味著由熱誘導(dǎo)形成的螺旋短肽在圓盤(pán)結(jié)構(gòu)中是平行排列的。同時(shí)這種圓盤(pán)狀的納米結(jié)構(gòu)也在冷凍透射電鏡(cryo-tem)圖像中出現(xiàn),這進(jìn)一步證明了這種圓盤(pán)狀納米結(jié)構(gòu)在水中的存在。關(guān)于短肽2的圓盤(pán)狀結(jié)構(gòu)原子力顯微鏡(afm)提供了更多的結(jié)構(gòu)信息,原子力顯微鏡圖像顯示,由短肽2組裝成的圓盤(pán)狀納米結(jié)構(gòu)的厚度為3.2nm,這個(gè)厚度和我們的設(shè)想的單層膜結(jié)構(gòu)的尺寸是相吻合的。這說(shuō)明這種圓盤(pán)狀結(jié)構(gòu)是由螺旋的短肽2平行排列成的單層膜結(jié)構(gòu)。不同于短肽2形成的圓盤(pán)狀納米結(jié)構(gòu),側(cè)鏈上修飾了三個(gè)聚醚樹(shù)枝狀分子的短肽3會(huì)自組裝成彎曲的囊泡狀結(jié)構(gòu)。透射電子顯微鏡(tem),掃描電子顯微鏡(sem)和動(dòng)態(tài)光散射(dls)實(shí)驗(yàn)都證明了囊泡狀結(jié)構(gòu)的存在。當(dāng)升高溫度至50攝氏度,短肽3形成α-螺旋結(jié)構(gòu)后,透射電子顯微鏡(tem)圖像顯示短肽3自組裝成了一個(gè)直徑約60nm至120nm大小的球狀物體。經(jīng)冷凍透射電子顯微鏡(cryo-tem)圖像確認(rèn),這個(gè)具有外圓的球狀聚集體是一個(gè)空心的囊泡,囊泡壁的厚度為3.2nm。動(dòng)態(tài)光散射(dls)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,這種聚集體的直徑大概是90nm,這和透射電子顯微鏡的觀(guān)察是吻合的。這種在高溫下形成的囊泡納米結(jié)構(gòu)被進(jìn)一步的用掃面電子顯微鏡(sem)證實(shí),在掃描電子顯微鏡中我們也觀(guān)察到球狀的聚集體,聚集體尺寸和透射電子顯微鏡中觀(guān)察到的囊泡狀結(jié)構(gòu)的尺寸相似,這作為額外的證據(jù)表明囊泡狀結(jié)構(gòu)在水中的存在。為了理解這種空心球狀結(jié)構(gòu)的形成方式,我們對(duì)高度稀釋的短肽3水溶液進(jìn)行了研究。短肽3的稀釋液的透射電子顯微鏡(tem)圖像顯示短肽3自組裝成了寬度為3.8nm的短鏈納米纖維結(jié)構(gòu),這表明囊泡壁是由這些短鏈纖維組成的。考慮到短肽螺旋的計(jì)算長(zhǎng)度為3.5nm,那么這些短鏈纖維是由短肽橫向排列組成的。當(dāng)我們升高濃度時(shí),這種基本的納米纖維體通過(guò)并排的相互作用產(chǎn)生平坦的膜結(jié)構(gòu)。這個(gè)結(jié)果說(shuō)明短肽3自組裝成的囊泡壁是由平面膜各自沿著纖維軸和螺旋軸兩個(gè)垂直方向折疊形成的。考慮到α-螺旋含量較少的短肽2自組裝成了圓盤(pán)狀納米結(jié)構(gòu),而α-螺旋含量較高的短肽3自組裝成了囊泡狀結(jié)構(gòu),這說(shuō)明α-螺旋結(jié)構(gòu)在短肽中的含量是在形成彎曲的囊泡狀結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵。當(dāng)我們得到這種由α-短肽自組裝成的可切換的膜狀結(jié)構(gòu)后,關(guān)于這種膜結(jié)構(gòu)的應(yīng)用成為了我們下一步的研究方向�？紤]到這種膜狀結(jié)構(gòu)是由棒狀的α-螺旋短肽平行排列組成的,那么α-螺旋短肽之間因排列而留下的空隙將會(huì)是有手性的。由此我們?cè)O(shè)想,由α-短肽3組裝成的囊泡可以作為一個(gè)對(duì)映體選擇性的膜,通過(guò)使一種對(duì)映體比另一種對(duì)映體更快的穿過(guò)這種膜狀結(jié)構(gòu)的方式實(shí)現(xiàn)手性分離的目的。為了證明這種囊泡壁具有對(duì)映體選擇性滲透的性質(zhì),我們?cè)谑覝貤l件下在短肽3水溶液中加入了外消旋體1-(4-溴苯基)乙醇,然后升高溫度到55攝氏度。由前文可知,當(dāng)升高溫度時(shí),短肽3自組裝成囊泡狀結(jié)構(gòu),此時(shí)當(dāng)囊泡狀結(jié)構(gòu)形成時(shí)會(huì)包裹一些外消旋體1-(4-溴苯基)乙醇在囊泡空心的內(nèi)部。經(jīng)葡聚糖凝膠柱(sephadexcolumn)過(guò)濾后,使被包裹的外消旋體和未被包裹的外消旋體分離,被包裹在囊泡內(nèi)的外消旋體可以用高效液相色譜法(hplc)進(jìn)行檢測(cè)。囊泡內(nèi)外消旋體的優(yōu)先選擇性釋放的效果可以用高效液相色譜法進(jìn)行跟蹤檢測(cè)。每隔一段時(shí)間,我們對(duì)經(jīng)葡聚糖凝膠柱(sephadexcolumn)過(guò)濾后得到的溶液進(jìn)行二次葡聚糖凝膠柱(sephadexcolumn)過(guò)濾,過(guò)濾得到的囊泡內(nèi)的外消旋體的含量由高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè),由此我們可以得到囊泡內(nèi)外消旋體的濃度變化趨勢(shì),根據(jù)此趨勢(shì)我們可以做出囊泡內(nèi)外消旋體濃度隨時(shí)間變化的趨勢(shì)圖。此趨勢(shì)圖顯示,隨著時(shí)間的變化,囊泡內(nèi)兩種對(duì)映體的濃度都呈下降的趨勢(shì),這說(shuō)明隨時(shí)間的延長(zhǎng),兩種對(duì)映體都會(huì)逐漸的通過(guò)囊壁滲透出去。值得注意的是,(r)構(gòu)型的對(duì)映體的滲透速度要快于(s)構(gòu)型的對(duì)映體。經(jīng)過(guò)三個(gè)小時(shí)的分離之后,囊壁對(duì)對(duì)應(yīng)體的選擇性分離達(dá)到最大效果,對(duì)應(yīng)體過(guò)量(ee%)達(dá)到12%。這一結(jié)構(gòu)表明,外消旋體可以在囊泡形成過(guò)程中被包裹在囊泡的空腔內(nèi),然后選擇性的釋放出來(lái)。從第一章和第二章的結(jié)果來(lái)看,這種橫向?qū)⒕勖褌?cè)鏈修飾到肽骨架上的方法可以成功的使短肽在無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)和α-螺旋兩個(gè)二級(jí)結(jié)構(gòu)中自由轉(zhuǎn)變。短肽二級(jí)結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)換功能是由于聚醚側(cè)鏈可逆的屏蔽了肽鏈和水相環(huán)境之間的作用。此外,可逆的α-螺旋短肽自組裝成可切換的膜結(jié)構(gòu),這種膜結(jié)構(gòu)是由α-螺旋短肽相互平行排列的�；趦蓚�(gè)聚醚側(cè)鏈的短肽2自組裝成圓盤(pán)狀納米結(jié)構(gòu),而修飾了三個(gè)聚醚側(cè)鏈的短肽3自組裝成囊泡狀納米結(jié)構(gòu)。這里短肽自組裝的主要驅(qū)動(dòng)力是形成可逆的穩(wěn)定α-螺旋結(jié)構(gòu)。此外更主要的是,升高溫度后由短肽3自組裝成的空心囊泡可以在自組裝的過(guò)程中自發(fā)的捕獲外消旋體,然后選擇性的優(yōu)先釋放一種對(duì)映體,達(dá)到手性分離的效果�？紤]到大部分膜結(jié)構(gòu)都很難做到和囊泡結(jié)構(gòu)的動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)換,這種由短肽形成的膜有兩個(gè)顯著的特點(diǎn),一是他們通過(guò)自組裝捕獲外消旋體的能力;二是這種膜可以選擇性的釋放對(duì)映體客體分子。我們相信這種獨(dú)特的肽組裝會(huì)給蛋白質(zhì)、基因和藥物的受控捕獲和釋放等生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用提供一個(gè)新的領(lǐng)域。最后在第三章中介紹了一些我們目前的工作,目前我們的工作重心是這種由α-螺旋短肽自組裝的膜狀結(jié)構(gòu)如何實(shí)現(xiàn)對(duì)對(duì)映體的高度選擇性從而達(dá)到對(duì)對(duì)映體的百分之百的分離效果和如何應(yīng)用這種高度選擇性。從前兩章的內(nèi)容可知,α-螺旋短肽自組裝的膜狀結(jié)構(gòu)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)對(duì)映體的選擇性分離,但是這種可逆轉(zhuǎn)變的膜結(jié)構(gòu)需要在高溫的條件下才能實(shí)現(xiàn)手性分離效果,其次這種膜的分離效果不高。為了改進(jìn)這種膜結(jié)構(gòu)的選擇功能性,我們?cè)诙屉?、2和3的基礎(chǔ)上合成了短肽4。短肽4和短肽2、3的相似之處是兩種短肽的氨基酸個(gè)數(shù)是一樣的,而區(qū)別是短肽4的側(cè)鏈上修飾的是兩個(gè)芘化合物,我們期望在水中由于芘和芘之間強(qiáng)大的π-π共軛作用誘導(dǎo)短肽4在室溫下形成穩(wěn)定的α-螺旋構(gòu)象,進(jìn)而像短肽3一樣組裝成囊泡結(jié)構(gòu)。短肽4在水中的cd顯示在208nm和222nm處各有一個(gè)負(fù)峰,這表明在室溫下短肽4在水中已經(jīng)折疊成α-螺旋。而通過(guò)投射電子顯微鏡的觀(guān)察我們同樣發(fā)現(xiàn)了類(lèi)似囊泡狀的結(jié)構(gòu),同時(shí)冷凍投射電鏡也表明這種類(lèi)囊泡狀結(jié)構(gòu)同樣是中空的。所以在由短肽4組裝成的囊泡的基礎(chǔ)上我們進(jìn)行了對(duì)映體的選擇性分離實(shí)驗(yàn)。我們選擇了體積更大的二肽作為客體分子,通過(guò)相似的對(duì)映體選擇性分離方法,我們進(jìn)行了對(duì)映體選擇性釋放和對(duì)映體選擇性捕捉(先組裝成囊泡結(jié)構(gòu),然后加入對(duì)映體客體分子,隨時(shí)間的變化其中一種對(duì)映體會(huì)比另一個(gè)對(duì)映體更先進(jìn)入囊泡空腔中,從而達(dá)到手性分離的效果)。兩個(gè)實(shí)驗(yàn)顯示,對(duì)于對(duì)映體選擇性釋放實(shí)驗(yàn),在大約三小時(shí)后會(huì)達(dá)到最大效果,對(duì)映體過(guò)量達(dá)到100%,我們會(huì)得到(l)構(gòu)型的對(duì)映體。對(duì)于對(duì)映體選擇性捕捉,大約在2小時(shí)至4小時(shí)間達(dá)到最大效果,對(duì)映體過(guò)量達(dá)到100%,我們會(huì)得到(d)構(gòu)型的對(duì)映體。這說(shuō)明通過(guò)對(duì)囊泡狀結(jié)構(gòu)的不同方法的應(yīng)用我們可以使囊泡在對(duì)映體混合物中選擇性的包裹單一手性分子。通過(guò)這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果我們相信囊泡的選擇性包裹這一特點(diǎn)可以在手性反應(yīng)中得到很好的應(yīng)用。為了驗(yàn)證在囊泡中做手性反應(yīng)的可行性,我們進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。首先我們包裹一些帶有三鍵官能團(tuán)的沒(méi)有手性的客體分子在囊泡中,然后在反應(yīng)體系中加入帶有疊氮官能團(tuán)的對(duì)映體混合物和催化劑。每隔一段時(shí)間,我們反應(yīng)溶液進(jìn)行葡聚糖凝膠柱(sephadexcolumn)過(guò)濾,過(guò)濾得到的囊泡內(nèi)的產(chǎn)物由高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)。我們發(fā)現(xiàn)在三小時(shí)內(nèi),我們可以得到d-構(gòu)型的產(chǎn)物,這說(shuō)明在三小時(shí)內(nèi)只有d-構(gòu)型的帶有疊氮官能團(tuán)的小分子被選擇性的進(jìn)入囊泡內(nèi)和無(wú)手性客體分子進(jìn)行反應(yīng),從而得到d-構(gòu)型的產(chǎn)物。從以上實(shí)驗(yàn)中我們證明了這種由α-短肽自組裝成的囊泡狀結(jié)構(gòu)對(duì)對(duì)映體有高度選擇性,我們可以通過(guò)不同的分離方法在囊泡內(nèi)得到d或l構(gòu)型的對(duì)映體,而且我們利用囊泡的選擇性包裹這一特點(diǎn),我們成功在囊泡中實(shí)現(xiàn)了手性反應(yīng),我們相信這種在肽組裝內(nèi)的反應(yīng)會(huì)給手性應(yīng)用提供一個(gè)新的領(lǐng)域。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：O629.72

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陶玉貴,黃金鈴;利用淡水雜魚(yú)生產(chǎn)活性短肽[J];中國(guó)水產(chǎn);2004年01期

2 周楨;李海軍;胡梅;周小華;;短肽衍生物的制備及其在日化領(lǐng)域的應(yīng)用[J];日用化學(xué)品科學(xué);2011年01期

3 ;杏仁功能性短肽制備關(guān)鍵技術(shù)[J];農(nóng)產(chǎn)品加工;2012年07期

4 劉榮;孫建寧;郭亞健;齊寧寧;;具有透皮美白功效的短肽篩選和評(píng)價(jià)研究[J];中國(guó)美容醫(yī)學(xué);2011年09期

5 張宇昊;王強(qiáng);;功能性短肽的研究進(jìn)展[J];中國(guó)油脂;2007年02期

6 ;特殊短肽為癌癥診療提供新思路[J];技術(shù)與市場(chǎng);2013年07期

7 于婭,楊瑞金,王璋;牡蠣功能短肽的制備及ACE抑制活性[J];無(wú)錫輕工大學(xué)學(xué)報(bào)(食品與生物技術(shù));2004年02期

8 龔家瑋;合成抗菌肽P18及其截短肽的結(jié)構(gòu)和殺真菌活性[J];中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志;2004年07期

9 陳升軍;熊華;周侃;黃軍;齊金峰;李薇;;米蛋白短肽抗氧化活性研究[J];食品科技;2008年12期

10 魏振承;徐志宏;池建偉;張名位;張雁;李健雄;唐小俊;張瑞芬;;短肽免疫增強(qiáng)型臨床營(yíng)養(yǎng)乳劑的配方和制備工藝研究[J];中國(guó)糧油學(xué)報(bào);2009年07期

相關(guān)會(huì)議論文 前6條

1 潘興昌;;食源性短肽的臨床優(yōu)勢(shì)[A];中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)第12屆全國(guó)臨床營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2009年

2 張賓;魏海明;龔玫;鄭曉東;田志剛;;利用功能性短肽調(diào)節(jié)NK細(xì)胞受體NKG2D的作用[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

3 孟德穎;萬(wàn)昌秀;姚紅衛(wèi);趙強(qiáng);吳剛;;PET膜表面接枝生物活性短肽方法的研究[A];第九屆全國(guó)生物材料學(xué)術(shù)會(huì)議（CBMS-9）論文集[C];2002年

4 余喜訊;許映霞;孫璐;段軍鴻;蔣根杰;樂(lè)以倫;;一種帶SDE短肽的新型吸附劑及其在吸附血漿中LDL的性能——Ⅳ帶SDE短肽聚丙烯酰胺微球吸附血漿中LDL的初步研究[A];第九屆全國(guó)生物材料學(xué)術(shù)會(huì)議（CBMS-9）論文集[C];2002年

5 王生杰;薛均譯;韓淑儀;徐海;;基于超短肽調(diào)控的納米二氧化硅仿生構(gòu)筑[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第28屆學(xué)術(shù)年會(huì)第12分會(huì)場(chǎng)摘要集[C];2012年

6 陶凱;趙芳;王繼乾;夏道宏;徐海;;一維鉑納米結(jié)構(gòu)的短肽調(diào)控組裝及電催化性能[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第十四屆膠體與界面化學(xué)會(huì)議論文摘要集-第2分會(huì)：溶液中的聚集與分子組裝[C];2013年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前7條

1 記者王薇;杏仁功能短肽制備實(shí)現(xiàn)創(chuàng)新[N];中國(guó)食品報(bào);2011年

2 楊保國(guó);特殊短肽為癌癥診療提供新思路[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2012年

3 記者 桂運(yùn)安 通訊員 楊保國(guó);科大科研人員發(fā)現(xiàn)特殊短肽[N];安徽日?qǐng)?bào);2012年

4 楊保國(guó) 記者 吳長(zhǎng)鋒;中國(guó)科大發(fā)現(xiàn)一種特殊短肽[N];科技日?qǐng)?bào);2012年

5 記者　 陳敬農(nóng) 通訊員　 胡勝友;我科學(xué)家發(fā)現(xiàn)輸運(yùn)大分子藥物的透皮短肽[N];科技日?qǐng)?bào);2006年

6 吳然;胃癌耐藥細(xì)胞特異性結(jié)合短肽篩選成功[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2006年

7 張中橋;胃癌耐藥細(xì)胞特異性結(jié)合短肽篩選成功[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 張磊;復(fù)合BMP-2來(lái)源新型短肽納米骨材料在骨修復(fù)中的應(yīng)用研究[D];山東大學(xué);2017年

2 王春艷;杏仁短肽制備及其降血壓活性研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

3 金洪娟;MAGE-1短肽體外免疫效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 岳媛媛;設(shè)計(jì)新型自組裝短肽用于細(xì)胞三維培養(yǎng)和修復(fù)損傷心肌組織[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

2 李改云;短肽B04對(duì)前列腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白ATP5B特異性抑制作用的研究[D];吉林大學(xué);2016年

3 徐曉帆;新型自組裝短肽用于細(xì)胞三維實(shí)時(shí)監(jiān)控和抗衰老研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

4 李萌萌;新型自組裝短肽對(duì)皮膚創(chuàng)傷快速修復(fù)過(guò)程研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

5 呂昱琦;雙親短肽自組裝/共組裝構(gòu)筑超分子納米纖維人工水解酶[D];天津大學(xué);2015年

6 徐晶;生物小分子非共價(jià)交聯(lián)：仿生膠黏劑的構(gòu)筑[D];吉林大學(xué);2017年

7 陳曦;對(duì)具有對(duì)映體選擇性捕獲能力的α-螺旋短肽自組裝的研究[D];吉林大學(xué);2017年

8 薛琳;GEBP11短肽對(duì)胃癌轉(zhuǎn)移的抑制作用及其結(jié)合受體的篩選鑒定[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

9 范文靜;大豆ASR蛋白及其保守結(jié)構(gòu)域短肽A1~A5對(duì)生物大分子保護(hù)作用研究[D];深圳大學(xué);2015年

10 程玉潔;棕點(diǎn)湍蛙抗微生物短肽的合成及其抗菌作用研究[D];河北師范大學(xué);2011年

，

本文編號(hào)：2515284