【摘要】：本文以生物相容性較好的殼聚糖(CS)為原料,通過馬來酸酐和半胱氨酸的化學(xué)改性在CS側(cè)鏈上接上了雙鍵和巰基的反應(yīng)性官能團(tuán),然后利用這些官能團(tuán)進(jìn)一步反應(yīng)形成凝膠。以磷脂酰膽堿和膽固醇為原料通過薄膜水化超聲法制備了脂質(zhì)體,以改性的CS去包覆脂質(zhì)體,從而改善其穩(wěn)定性,然后利用包覆后的穩(wěn)定化脂質(zhì)體和CS的反應(yīng)性官能團(tuán)形成凝膠制備了脂質(zhì)體凝膠,凝膠作為組織工程支架有望用于載藥和組織修復(fù)。用馬來酸酐改性CS,制備馬來�；瘹ぞ厶�(CSMA),對其進(jìn)行了紅外光譜和核磁譜圖分析,結(jié)果表明了馬來酸酐成功地改性了CS,在CS的側(cè)鏈上接上了雙鍵。探討了不同條件下,CSMA的雙鍵取代度和雙鍵的含量,最終選擇了CS的濃度為1 wt%,反應(yīng)時間為24小時,CS重復(fù)單元與馬來酸酐摩爾投料比為1:1為接下來的實驗條件。產(chǎn)物雙鍵取代度為72.5%,雙鍵含量為1780.46±32.65μmol/g。用半胱氨酸改性CS,在催化劑乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(EDAC)/N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)的作用下,通過CS的氨基和半胱氨酸的羧基之間的縮合反應(yīng)形成酰胺鍵得到巰基化殼聚糖(CSSH)。對CSSH進(jìn)行了紅外光譜和核磁譜圖分析,結(jié)果表明了半胱氨酸成功改性了CS。探討了不同條件下,CSSH的巰基化取代度、總巰基含量、游離巰基的含量和二硫鍵的含量。最后選擇CS的濃度為1 wt%,CS重復(fù)單元與半胱氨酸摩爾投料比為1:1作為接下來的實驗條件。產(chǎn)物總巰基含量為420.36±0.14μmol/g,游離巰基含量為200.84±16.16μmol/g,核磁方法測得的巰基取代度為6.0%,Ellman’s方法測得的巰基取代度為5.4%。用磷脂酰膽堿和膽固醇制備了空白脂質(zhì)體(Lip),為了改善空白脂質(zhì)體的穩(wěn)定性,在脂質(zhì)體上包覆了CSSH和CSMA,得到Lip-CSSH和Lip-CSMA,脂質(zhì)體可以包載姜黃素。利用透射電鏡、納米激光粒度儀、差示掃描量熱分析儀、流變和穩(wěn)定性對空白脂質(zhì)體、包覆后的脂質(zhì)體和載藥脂質(zhì)體進(jìn)行分析研究。透射電鏡觀察可知脂質(zhì)體形貌為球狀,納米激光粒度儀測得空白脂質(zhì)體的粒徑為115.1±9.6 nm,帶負(fù)電,電位為-56.8±1.47 mV,由于改性的CS和Lip相互作用,包覆后的脂質(zhì)體粒徑增加,電位由負(fù)變?yōu)檎?穩(wěn)定性也有提高。通過脂質(zhì)體包載姜黃素,由測定的包封率和載藥量可知,包覆CSSH和CSMA后其包封率和載藥量都有所提高。Lip-CSSH可以顯著提高脂質(zhì)體的物理穩(wěn)定性和儲存穩(wěn)定性,體外釋放實驗表明CSSH包覆脂質(zhì)體后,可以延緩姜黃素的釋放,具有緩釋效果。細(xì)胞實驗表明,游離的姜黃素在100μM時對MCF-7具有明顯的抑制作用,而Lip-CSSH包載姜黃素在濃度100μM時,其抑制作用不明顯,當(dāng)其濃度和時間進(jìn)一步增加時,為200μM、處理72 h后,明顯地對MCF-7的生長有抑制作用。結(jié)果表明了姜黃素在Lip-CSSH中隨著時間的推移而釋放,這有利于姜黃素的長循環(huán)治療的遞送和釋放。制備了CSSH/CSMA凝膠和CSSH/CSMA/Lip脂質(zhì)體凝膠,分析了凝膠的形成機(jī)理,通過流變學(xué)分析可知隨著CSMA的量增加,凝膠時間減少,其力學(xué)性能也提高。掃描電鏡觀察可知凝膠具有多孔結(jié)構(gòu),利于細(xì)胞的生長的營養(yǎng)物質(zhì)和廢物的運(yùn)輸。拉伸實驗表明,在加入脂質(zhì)體后,冷凍干燥后的干態(tài)和濕態(tài)凝膠膜的拉伸強(qiáng)度有所提高。偏光顯微鏡觀察可知,干燥后的凝膠膜具有結(jié)晶的性能,在偏光顯微鏡下具有晶體結(jié)構(gòu)。細(xì)胞實驗表明凝膠具有良好的生物相容性,有望用于組織修復(fù)。
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【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：O648.17

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 孫新枝,楊聲,張凱峰,蘇中興;馬來酸酐酰化殼聚糖的合成[J];化學(xué)研究與應(yīng)用;2005年02期

2 穆筱梅,鐘振聲,陳煥欽;聚乙烯醇脂質(zhì)體的制備及性能研究[J];精細(xì)化工;2003年06期

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本文編號：2433865