【摘要】：本論文應(yīng)用一種具有聚集誘導發(fā)光(AIE)特性的新型熒光染料探針m-TPE-RNS監(jiān)測了裸藻(Euglena gracilis)對Hg~(2+)的吸收與釋放過程,建立了穩(wěn)定、可靠的檢測方法,為研究汞在水生食物鏈中的生物富集效應(yīng)提供了參考。結(jié)果表明:m-TPE-RNS在水和乙腈(ACN)比例為3:2的反應(yīng)體系中,用350 nm紫外線(UV)激發(fā)于480 nm處有最大峰值;與Hg~(2+)反應(yīng)后,其在590 nm處有最大峰值;m-TPE-RNS與Hg~(2+)反應(yīng)的熒光強度(PL)與二者濃度比例相關(guān),呈三維關(guān)系;而當Hg~(2+)與m-TPE-RNS的比率小于1時,反應(yīng)體系中Hg~(2+)濃度和PL強度之間呈線性關(guān)系。選擇淡水培養(yǎng)的裸藻為試驗對象,確定了Hg~(2+)對藻細胞的作用濃度。當Hg~(2+)濃度從0增加到30μM時,裸藻細胞收縮成包囊狀的比例逐漸增加。當Hg~(2+)濃度為30μM時,藻細胞的伸縮泡消失,中心部分變得凝聚并起皺。用10μM、20μM和30μM濃度的Hg~(2+)處理裸藻細胞1 h后,將其轉(zhuǎn)移至清水中,24 h后以藻細胞形態(tài)和游動能力為指標計算其恢復(fù)率,各處理組分別為93%、67%、10%。用濃度為10μM和20μM的HgCl_2處理裸藻細胞,經(jīng)過m-TPE-RNS反應(yīng)后溶液中PL強度較對照組有顯著下降,表明藻細胞吸收Hg~(2+)顯著,之后PL強度變化趨勢漸緩,1 h后基本穩(wěn)定。根據(jù)Hg~(2+)濃度與PL強度的關(guān)系,30 min時,10μM和20μM的HgCl_2處理組中裸藻細胞的生物富集量分別為0.64μg/mg和1.13μg/mg。30 min到60 min,裸藻細胞中Hg~(2+)的富集量增長不顯著。濃度為10μM和20μM時,相對溶液中,裸藻細胞中Hg~(2+)的生物富集效率(Et)在1 h內(nèi)分別增加至4和5倍。裸藻細胞在20μM HgCl_2中處理45 min,然后轉(zhuǎn)移至純水中,在3 h和24 h分別檢測其中Hg~(2+)含量,為0.02μg/mg和0.013μg/mg。Hg~(2+)在裸藻細胞內(nèi)和細胞外環(huán)境之間存在動態(tài)平衡關(guān)系,細胞內(nèi)、外的Hg~(2+)濃度梯度決定釋放的效率。
[Abstract]:In this paper, a new fluorescent dye probe m-TPE-RNS with aggregation induced luminescence (AIE) was used to monitor the absorption and release of Hg~ (2) by (Euglena gracilis), and a stable and reliable method was established. It provides a reference for studying the bioaccumulation effect of mercury in aquatic food chain. The results show that m-TPE-RNS has the maximum peak value at 480 nm when the ratio of water to acetonitrile (ACN) is 3:2, and the maximum value at 590 nm after the reaction with Hg~ (2). The fluorescence intensity (PL) of the reaction of m-TPE-RNS and Hg~ (2) was correlated with the concentration ratio of the two, showing a three-dimensional relationship. However, when the ratio of Hg~ (2) to m-TPE-RNS is less than 1, there is a linear relationship between the concentration of Hg~ (2) and the strength of PL in the reaction system. The concentration of Hg~ (2) on algal cells was determined. When the concentration of Hg~ (2) increased from 0 to 30 渭 M, the proportion of the cells contracted into cysts increased gradually. When the concentration of Hg~ (2) was 30 渭 M, the expansion vesicles disappeared and the central part became condensed and wrinkled. The cells were treated with 10 渭 M Hg~ (20 渭 M) and 30 渭 M Hg~ (2) for 1 h, then transferred to water. After 24 hours, the recovery rate of the cells was calculated according to the morphology and swimming ability of the algal cells. The PL intensity in the solution treated with 10 渭 M and 20 渭 M HgCl_2 was significantly lower than that in the control group after m-TPE-RNS reaction, indicating that the absorption of Hg~ (2) by algal cells was significant, and the change trend of PL intensity gradually slowed down. After 1 h, the stability was basically stable. According to the relationship between the concentration of Hg~ (2) and the intensity of PL, the bioconcentration of 10 渭 M and 20 渭 M HgCl_2 treated groups was 0.64 渭 g/mg and 1.13 渭 g/mg.30 min to 60 min, at 30 min, respectively. The accumulation of Hg~ (2) in the cells was not significantly increased. When the concentration was 10 渭 M and 20 渭 M, the bioconcentration efficiency (Et) of Hg~ _ (2) was increased to 4 and 5 times in relative solution within 1 h, respectively. The cells were treated with 20 渭 M HgCl_2 for 45 min, and then transferred to pure water. The content of Hg~ (2) was detected at 3 h and 24 h, respectively. There was a dynamic equilibrium relationship between the intracellular and extracellular environments for 0.02 渭 g/mg and 0.013 渭 g / mg 路Hg2, and the intracellular and extracellular Hg~ (2) concentration gradient determined the release efficiency.
【學位授予單位】：大連海洋大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：X835;O657.3

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本文編號：2336640