【摘要】：小一點(diǎn)紅為菊科(Asteraceae)一點(diǎn)紅屬(Emilia)植物小一點(diǎn)紅(Emilia prenanthoides DC.)的干燥全草,在貴州黔南、黔東南地區(qū)具有悠久的藥用歷史。具有清熱解毒,活血化瘀之功效,主治跌打損傷,紅白痢,瘡瘍腫毒�！吨腥A本草》、《中國(guó)植物志》、《貴州植物志》、《廣州植物志》、《福建植物志》等本草書(shū)籍中均有記載,并擬收載于2013年版《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》。第一部分小一點(diǎn)紅藥材的化學(xué)成分辨識(shí)與多指標(biāo)性成分含量測(cè)定基于同屬植物一點(diǎn)紅的化學(xué)成分研究,查閱相關(guān)文獻(xiàn)并結(jié)合課題組前期對(duì)于一點(diǎn)紅化學(xué)成分研究成果。本課題采用HPLC,比對(duì)化合物對(duì)照品與樣品的保留時(shí)間與紫外吸收光譜鑒定小一點(diǎn)紅藥材中的化學(xué)成分,結(jié)合UPLC-ESI-MS/MS得出的總離子流圖,比對(duì)化合物對(duì)照品與樣品的相對(duì)分子質(zhì)量和離子碎片進(jìn)行佐證。從小一點(diǎn)紅藥材中首次指認(rèn)出綠原酸、新西蘭牡荊苷、金絲桃苷、槲皮苷、異槲皮苷和原兒茶酸7個(gè)化合物。針對(duì)以上7個(gè)化合物,建立了HPLC-DAD同時(shí)測(cè)定小一點(diǎn)紅中7種化合物的分析方法,并對(duì)黔產(chǎn)12批藥材中7種化合物進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明:該方法準(zhǔn)確、可靠、簡(jiǎn)便易行可用于貴州省不同產(chǎn)地小一點(diǎn)紅藥材中7種化學(xué)成分的測(cè)定。第二部分小一點(diǎn)紅藥材指紋圖譜研究初步建立了黔產(chǎn)小一點(diǎn)紅藥材指紋圖譜測(cè)定條件,結(jié)果分析以槲皮苷為參考峰,篩選出14個(gè)共有特征峰,并對(duì)其中6個(gè)色譜峰進(jìn)行了指認(rèn),分別為綠原酸、新西蘭牡荊苷、蘆丁、金絲桃苷、異槲皮苷和槲皮苷。相似度結(jié)果表明12批不同產(chǎn)地小一點(diǎn)紅藥材的相似度有8批大于0.9。并利用SPSS軟件進(jìn)行聚類(lèi)分析,分析結(jié)果表明產(chǎn)地相近的藥材基本劃歸為一類(lèi),且小一點(diǎn)紅的質(zhì)量與其生長(zhǎng)環(huán)境、采收季節(jié)和貯藏條件可能有較大關(guān)聯(lián)性;進(jìn)行了主成分分析,分析結(jié)果表明,14個(gè)共有峰中取3個(gè)主成分時(shí)其方差總貢獻(xiàn)率為91.30%,且A2、A3(綠原酸)、A4、A9(蘆丁)、A13、A14(槲皮苷)是影響各批次小一點(diǎn)紅質(zhì)量的主要成分。第三部分小一點(diǎn)紅藥材抗炎譜效關(guān)系研究采用二甲苯致小鼠耳腫脹法和角叉菜膠致大鼠足腫脹法,通過(guò)設(shè)高、中、低三個(gè)劑量組比較腫脹度與抑制率進(jìn)行抗炎活性研究,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,小一點(diǎn)紅藥材具有明顯的抗炎作用;并針對(duì)8批差異性較大的藥材,采用角叉菜膠致小鼠足腫脹法,以足腫脹度、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、抗腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)濃度為藥效評(píng)價(jià)指標(biāo),比較不同產(chǎn)地小一點(diǎn)紅藥材的抗炎活性,結(jié)果表明:模型組與空白組比較所監(jiān)測(cè)的各藥效指標(biāo)之間均有顯著性差異(P0.05),表示建模成功;各給藥組與模型組比較所監(jiān)測(cè)的藥效指標(biāo)之間有顯著性差異(P0.05),表明不同產(chǎn)地的小一點(diǎn)紅樣品均具有抗炎作用;且不同產(chǎn)地的各藥效指標(biāo)也存在差異,表明不同產(chǎn)地的小一點(diǎn)紅藥材抗炎效果存在差異。依據(jù)小一點(diǎn)紅藥材的抗炎活性研究結(jié)果并結(jié)合指紋圖譜數(shù)據(jù),采用灰關(guān)聯(lián)度分析法、偏最小二乘回歸分析法和人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)算法,進(jìn)行譜效關(guān)系初探�；谊P(guān)聯(lián)度分析結(jié)果顯示:小一點(diǎn)紅指紋圖譜14個(gè)共有峰與小一點(diǎn)紅抗炎活性關(guān)聯(lián)度大小順序?yàn)?A3A1A14A4A13A11A9A10A6A8A12A2A5A7;偏最小二乘法結(jié)果顯示:一點(diǎn)紅指紋圖譜14個(gè)共有峰中與小一點(diǎn)紅抗炎活性5個(gè)藥效指標(biāo)關(guān)聯(lián)度較大的色譜峰為A3(綠原酸)、A14(槲皮苷)、A4、A9(蘆丁)和A13;人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)算法也顯示出相似的結(jié)果。綜合分析3中數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果,得出小一點(diǎn)紅藥材指紋圖譜中14個(gè)共有峰中與其發(fā)揮抗炎活性關(guān)聯(lián)度較大的色譜峰有A3(綠原酸)、A14(槲皮苷)、A4、A9(蘆丁)和A13。證明小一點(diǎn)紅藥材發(fā)揮抗炎作用的藥效物質(zhì)可能是以上幾個(gè)化合物,為制定科學(xué)、規(guī)范、合理的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了科學(xué)支撐。第四部分小一點(diǎn)紅藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究按2015年版《中國(guó)藥典》通則項(xiàng)下規(guī)定方法對(duì)小一點(diǎn)紅藥材進(jìn)行性狀水分、浸出物、灰分、農(nóng)藥殘留和重金屬等限量研究;以槲皮苷和綠原酸為對(duì)照品制定了小一點(diǎn)紅藥材的薄層色譜鑒別方法,斑點(diǎn)清晰,分離度好;并以槲皮苷為指標(biāo)性成分,建立了簡(jiǎn)便快捷,專(zhuān)屬性強(qiáng),線性、重復(fù)性、精密度和回收率良好,可應(yīng)用于小一點(diǎn)紅的質(zhì)量控制的量測(cè)定方法;初步擬定了小一點(diǎn)紅藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案。另外建立了以蘆丁為對(duì)照品,用于測(cè)定小一點(diǎn)紅藥材中總黃酮含量的紫外分光光度法,各批次藥材中總黃酮含量在23.16~56.52 mg·g~(-1)之間,且利用響應(yīng)面法優(yōu)化了小一點(diǎn)紅總黃酮的超聲提取工藝,得到的提取工藝對(duì)小一點(diǎn)紅中總黃酮的提取率為77.96%。
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【學(xué)位授予單位】：貴州師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R284.1;O657

【參考文獻(xiàn)】

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9 寧娛;祝晨，

本文編號(hào)：2310208