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薰衣草精油SPME提取及抑制大腸桿菌組效關(guān)系研究

發(fā)布時(shí)間:2018-10-04 19:28
【摘要】:本論文以新疆伊犁薰衣草為研究對象,建立了頂空固相微萃取(SPME)和磁性粒子結(jié)合微波輔助頂空固相微萃取(MD-SPME)快速提取薰衣草花中揮發(fā)性成分的提取方法,采用氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用(GC/MS)對其化學(xué)成分進(jìn)行分析。采用多元統(tǒng)計(jì)分析方法對不同品種薰衣草的差異標(biāo)志物進(jìn)行識別,以辨別薰衣草的品種;谵挂虏菥偷臍庀嗌V/質(zhì)譜聯(lián)用分析及抑制大腸桿菌的半數(shù)抑菌濃度的測定,建立了薰衣草精油化學(xué)成分與其抑制大腸桿菌的組效關(guān)系模型,并尋找與藥效顯著相關(guān)的成分。1)采用頂空固相微萃取-氣相色譜/質(zhì)譜(SPME-GC/MS)聯(lián)用技術(shù)建立新疆不同品種薰衣草化學(xué)成分的快速識別模式,并結(jié)合多元統(tǒng)計(jì)分析方法對不同品種薰衣草的特征差異性標(biāo)志物進(jìn)行識別。選取薰衣草揮發(fā)性化合物中順-β-羅勒烯、芳樟醇、乙酸芳樟酯、萜品烯-4-醇、石竹烯和石竹烯氧化物等6個(gè)代表性成分為指標(biāo)進(jìn)行方法考察,首先優(yōu)化HS-SPME萃取條件,其最佳萃取條件為:萃取溫度為55?C,萃取時(shí)間為30 min和解析時(shí)間為30 s。然后運(yùn)用GC/MS法分析3個(gè)品種26批薰衣草花中揮發(fā)性成分,最后采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘-判別分析(PLS-DA)對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。結(jié)果顯示:3個(gè)不同品種的薰衣草樣品間的化學(xué)成分得到有效區(qū)分;篩選識別出9個(gè)不同品種薰衣草間差異顯著的化學(xué)成分標(biāo)志物,薰衣草特征變量組分與差異標(biāo)志物分析結(jié)果一致。這表明,SPME-GC/MS結(jié)合多元統(tǒng)計(jì)技術(shù)可以對薰衣草復(fù)雜體系的快速鑒定、差異標(biāo)志物識別提供一個(gè)可行的參考方法。2)磁性粒子微波輔助結(jié)合SPME-GC/MS快速分析新疆薰衣草干花中的揮發(fā)性成分。采用Fe3O4作為微波吸收介質(zhì),提取薰衣草干花中的揮發(fā)性成分。使用該方法萃取薰衣草中的精油成分,分離、萃取及富集只需一步即可完成。首先對萃取條件進(jìn)行優(yōu)化,最佳萃取條件為:30μm DVB/CAR/PDMS萃取纖維涂層,微波功率為600 W,輻射時(shí)間為15 min,Fe3O4的加入量為5 mg。然后使用GC/MS共鑒定出39個(gè)薰衣草精油的化學(xué)成分。相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)值均小于9%,證明該方法具有較好的精密度。最后采用主成分分析(PCA)對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,識別出薰衣草的品種和品種的特征變量組分。磁性粒子微波輔助結(jié)合SPME-GC/MS法具有簡單、快速、穩(wěn)定和無溶劑等優(yōu)點(diǎn),可用于干的植物材料的分析與鑒定。3)基于氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用(GC/MS)分析,建立薰衣草精油的化學(xué)成分與其抑制大腸桿菌的組效關(guān)系模型。采用GC/MS分析了新疆3個(gè)不同品種的13批薰衣草精油樣品,以GC/MS結(jié)合保留指數(shù)對復(fù)雜未知物進(jìn)行定性,確定了42個(gè)化合物。采用主成分分析(PCA)對薰衣草精油樣品的GC/MS數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,13批薰衣草精油樣品根據(jù)品種不同被明顯的分為3個(gè)品種。采用平板菌落計(jì)數(shù)法測定了薰衣草精油對大腸桿菌的半數(shù)抑菌濃度IC50值,其值在1.36~3.05%之間。采用偏最小二乘法(Partial least squares,PLS)分析薰衣草精油的化學(xué)成分與其抑制大腸桿菌的抑菌活性之間的內(nèi)在聯(lián)系,結(jié)果表明,抑制大腸桿菌有較大貢獻(xiàn)的活性物質(zhì)為芳樟醇、萜品烯-4-醇、乙酸芳樟酯、α-萜品醇和乙酸薰衣草酯,其中芳樟醇是抑制大腸桿菌貢獻(xiàn)最大的生物活性成分。此方法為薰衣草精油抑菌活性成分的辨識提供一定的方法參考。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:新疆大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:TQ654.2;O657.63

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本文編號:2251590

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