超大孔聚合物親和色譜層析介質(zhì)的制備及評價(jià)
本文關(guān)鍵詞:超大孔聚合物親和色譜層析介質(zhì)的制備及評價(jià) 出處:《分析測試學(xué)報(bào)》2016年12期 論文類型:期刊論文
更多相關(guān)文章: 親和層析 偶聯(lián)方法 Protein A配基 超大孔層析介質(zhì) 抗體純化
【摘要】:探索了用席夫堿法在超大孔聚合物微球表面偶聯(lián)Protein A配基制備親和層析介質(zhì)的方法,以親水化后的聚丙烯酸酯類超大孔微球?yàn)榛|(zhì),考察了氧化劑濃度(H5IO6)對配基偶聯(lián)量的影響,以掃描電子顯微鏡表征微球表面形貌,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其偶聯(lián)Protein A后微球仍能夠保持其大孔結(jié)構(gòu)?疾炝嗽擃愑H和介質(zhì)在不同操作流速(361~3 600 cm/h)下的動態(tài)載量,在3 600 cm/h操作流速下,人抗體載量與361 cm/h相比僅下降10%左右,表明該類介質(zhì)適合抗體大分子的快速傳質(zhì),能夠滿足快速、高效、高通量分離純化的需求。
[Abstract]:An affinity chromatography medium was prepared by coupling Protein A ligand on the surface of macroporous polymer microspheres by Schiff base method. The hydrophilic macroporous polyacrylate microspheres were used as the matrix. The effect of oxidant concentration (H 5IO 6) on ligand coupling amount was investigated. The surface morphology of microspheres was characterized by scanning electron microscope (SEM). The results showed that the microspheres could maintain their macroporous structure after coupling with Protein A. the dynamic loading capacity of this kind of affinity medium was investigated at different operating velocities of 361n 3600 cm / h. At the operating flow rate of 3 600 cm/h, the human antibody load decreased by only about 10% compared with 361 cm/h, which indicated that the medium was suitable for rapid mass transfer of antibody macromolecules and could satisfy the requirement of rapid mass transfer. High efficiency, high throughput separation and purification requirements.
【作者單位】: 北京石油化工學(xué)院化學(xué)工程學(xué)院;中國科學(xué)院過程工程研究所生化工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:北京市自然科學(xué)基金(2162013) 國家自然科學(xué)基金(51103158) 北京石油化工學(xué)院優(yōu)秀人才培育計(jì)劃項(xiàng)目(080318620081/037) 北京高等學(xué)校高水平人才交叉培養(yǎng)“實(shí)培計(jì)劃”項(xiàng)目(201507,201506) 2016大學(xué)生URT項(xiàng)目(16032082001/009)
【分類號】:O658.1
【正文快照】: 生化工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京100190)親和層析是利用生物活性物質(zhì)之間的特異親和力,使目標(biāo)產(chǎn)物得以分離純化的液相層析方法,可應(yīng)用于任何兩種有特異性相互作用的生物大分子[1]。由于抗體與抗原作用具有高度的專一性,且該親和力極強(qiáng),親和層析技術(shù)兼具高收率、高純度、能保持生
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,本文編號:1416483
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