酶促螺旋體糊精的形成及其應(yīng)用研究
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【摘要】:淀粉經(jīng)精加工處理后可為工業(yè)提供不同的淀粉衍生物,進(jìn)而提高其附加值。本文以原淀粉為原料,采用酶解脫支技術(shù),制備出具有包結(jié)絡(luò)合能力的酶促螺旋體糊精,四種淀粉經(jīng)徹底脫支后,其包結(jié)絡(luò)合能力從高到低依次是:木薯淀粉、馬鈴薯淀粉、玉米淀粉、蠟質(zhì)玉米淀粉。并利用醇沉法對(duì)螺旋體糊精進(jìn)行粗提純處理,得到一系列分子量分布的螺旋體糊精,其DP值隨醇濃度升高而降低,且DP值較小的螺旋體糊精樣品包結(jié)絡(luò)合能力較強(qiáng)。而后本文進(jìn)一步對(duì)酶促螺旋體糊精在槲皮素的包結(jié)絡(luò)合應(yīng)用進(jìn)行研究。以包合物中槲皮素含量和包合率作為評(píng)價(jià)指標(biāo),通過單因素實(shí)驗(yàn)對(duì)影響螺旋體糊精/槲皮素包合反應(yīng)條件進(jìn)行研究,最佳反應(yīng)條件為:反應(yīng)時(shí)間4 h,反應(yīng)溫度60℃,反應(yīng)pH為6.0,槲皮素溶液添加量5%(w/w),在此最佳條件下制得的螺旋體糊精/槲皮素包合物中,槲皮素含量為38.43 mg/g,槲皮素的包合率達(dá)82.80%。并利用響應(yīng)面旋轉(zhuǎn)設(shè)計(jì)法對(duì)此工藝條件進(jìn)行優(yōu)化,響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果為:螺旋體糊精包合槲皮素的最佳工藝為反應(yīng)時(shí)間4.5 h、反應(yīng)溫度64℃、槲皮素添加量5%、pH 6.5,在此條件下制得的螺旋體糊精/槲皮素包合物中,槲皮素實(shí)際含量及包合率分別為41.57 mg/g和87.32%。利用FT-IR、XRD、~(13)C CP/MAS NMR、DSC、DTG、SEM和CLSM等檢測(cè)技術(shù),對(duì)螺旋體糊精/槲皮素包合物的結(jié)構(gòu)、熱力學(xué)性質(zhì)及表觀形貌進(jìn)行分析。包合物紅外光譜在1264cm-1處出現(xiàn)C-O-的吸收峰,顯示出包結(jié)絡(luò)合反應(yīng)的發(fā)生;XRD表明包合物晶型整體尺寸變小,呈現(xiàn)出螺旋體糊精包結(jié)絡(luò)合物的V型結(jié)晶結(jié)構(gòu);~(13)C CP/MAS NMR表明包合物中C-4吸收峰有所弱化,表明螺旋體糊精與槲皮素之間有化學(xué)鍵的絡(luò)合反應(yīng);包合物DSC曲線在314.8℃出現(xiàn)一個(gè)新熔融峰,同時(shí)包合物中槲皮素熔點(diǎn)峰及螺旋體糊精分解峰均消失;DTG曲線表明包合物降解過程中重量損失比混合物多18.07%;SEM顯示包合物表面變得光滑整潔棱角分明、球狀顆粒明顯,槲皮素纖維條狀弱化消失、酶解淀粉的粗糙表面得到改善;包合物的CLSM圖片中可觀察到紅綠熒光色相間的物質(zhì),且紅色熒光部分處于綠色中間;上述結(jié)論均可表明槲皮素與螺旋體糊精發(fā)生了包結(jié)絡(luò)合反應(yīng),且反應(yīng)中槲皮素進(jìn)入了螺旋體糊精空腔中。對(duì)包合物產(chǎn)品溶解性、吸濕性、體外消化性、降解性、穩(wěn)定性、抗氧化性以及釋放特性的研究表明,包合物的溶解度隨著槲皮素添加量的增加而增大;螺旋體糊精包合槲皮素后呈現(xiàn)出較強(qiáng)的抗酶解特性;同時(shí)包合物中槲皮素的熱穩(wěn)定性、酸堿穩(wěn)定性、光照穩(wěn)定性及其抗氧化穩(wěn)定性均有所提高;包合物主要在小腸中發(fā)生降解釋放出槲皮素。
【關(guān)鍵詞】:酶解脫支 螺旋體糊精 包結(jié)絡(luò)合 槲皮素 結(jié)構(gòu)性質(zhì)
【學(xué)位授予單位】:華南理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:O636.12
【目錄】:
- 摘要5-6
- ABSTRACT6-12
- 主要符號(hào)表12-13
- 第一章 緒論13-21
- 1.1 淀粉及其衍生物簡(jiǎn)述13-15
- 1.1.1 淀粉概述13-14
- 1.1.2 糊精概述14
- 1.1.3 螺旋體糊精的概述14-15
- 1.1.4 螺旋體糊精的應(yīng)用15
- 1.2 梯度醇沉概述15-18
- 1.2.1 梯度醇沉法的原理及應(yīng)用15-16
- 1.2.2 梯度醇沉的影響因素16-18
- 1.3 槲皮素的研究進(jìn)展18-19
- 1.3.1 槲皮素的概述18
- 1.3.2 槲皮素的功能特性18-19
- 1.3.3 槲皮素的研究進(jìn)展19
- 1.4 研究意義、目的及主要研究?jī)?nèi)容19-21
- 1.4.1 研究意義、目的19
- 1.4.2 論文理論依據(jù)19-20
- 1.4.3 主要研究?jī)?nèi)容20-21
- 第二章 酶法脫支淀粉制備螺旋體糊精21-35
- 2.1 引言21-22
- 2.2 材料與設(shè)備22-23
- 2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料22
- 2.2.2 主要儀器與設(shè)備22-23
- 2.3 實(shí)驗(yàn)方法23-26
- 2.3.1 螺旋體糊精的制備23
- 2.3.2 酶解率的測(cè)定23-25
- 2.3.3 藍(lán)值的測(cè)定25
- 2.3.4 螺旋體糊精-碘復(fù)合物紫外可見吸收光譜25-26
- 2.3.5 梯度醇沉法純化螺旋體糊精26
- 2.3.6 凝膠滲透色譜法(GPC)測(cè)定螺旋體糊精分子量及分子量分布26
- 2.4 結(jié)果與分析26-34
- 2.4.1 酶解時(shí)間對(duì)淀粉酶解率和藍(lán)值的影響26-28
- 2.4.2 螺旋體糊精-碘復(fù)合物紫外可見吸收光譜分析28-29
- 2.4.3 螺旋體糊精的分子量分布29-34
- 2.5 本章小結(jié)34-35
- 第三章 酶促螺旋體糊精/槲皮素包合物的制備35-48
- 3.1 引言35
- 3.2 材料與設(shè)備35-36
- 3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑35
- 3.2.2 主要儀器與設(shè)備35-36
- 3.3 實(shí)驗(yàn)方法36-38
- 3.3.1 酶促螺旋體糊精/槲皮素包合物制備工藝的優(yōu)化36
- 3.3.2 包合物中槲皮素含量的測(cè)定36-38
- 3.4 結(jié)果與討論38-47
- 3.4.1 單因素試驗(yàn)分析38-41
- 3.4.2 響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化分析41-47
- 3.5 本章小結(jié)47-48
- 第四章 酶促螺旋體糊精/槲皮素包合物的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)測(cè)定48-59
- 4.1 引言48
- 4.2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器設(shè)備48-49
- 4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑48
- 4.2.2 儀器設(shè)備48-49
- 4.3 實(shí)驗(yàn)方法49-50
- 4.3.1 傅立葉變換紅外光譜(FT-IR)分析測(cè)試方法及條件49
- 4.3.2 X-射線衍射(XRD)分析測(cè)試方法及條件49
- 4.3.3 ~(13)C固體核磁共振(~(13)C CP/MAS NMR)分析測(cè)試方法及條件49
- 4.3.4 差示掃描量熱(DSC)分析測(cè)試方法與條件49
- 4.3.5 熱失重(DTG)分析測(cè)試方法及條件49-50
- 4.3.6 場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡(SEM)分析測(cè)試方法及條件50
- 4.3.7 激光共聚焦顯微鏡(CLSM)分析測(cè)試方法及條件50
- 4.4 結(jié)果與分析50-58
- 4.4.1 紅外光譜分析50-51
- 4.4.2 X-射線衍射光譜分析51-52
- 4.4.3 ~(13)C固體核磁共振圖譜分析52-53
- 4.4.4 差示掃描量熱分析53-54
- 4.4.5 熱失重(DTG)分析54-55
- 4.4.6 掃描電鏡表觀形貌分析55-56
- 4.4.7 激光共聚焦(CLSM)圖譜分析56-57
- 4.4.8 螺旋體糊精與槲皮素包結(jié)絡(luò)合反應(yīng)模型預(yù)測(cè)57-58
- 4.5 本章小結(jié)58-59
- 第五章 酶促螺旋體糊精/槲皮素包合物的物性研究59-72
- 5.1 引言59
- 5.2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器設(shè)備59-60
- 5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑59-60
- 5.2.2 儀器設(shè)備60
- 5.3 實(shí)驗(yàn)方法60-63
- 5.3.1 螺旋體糊精/槲皮素包合物的溶解度測(cè)定60
- 5.3.2 螺旋體糊精/槲皮素包合物的吸濕性測(cè)定60-61
- 5.3.3 螺旋體糊精/槲皮素包合物的酶解率測(cè)定61
- 5.3.4 酶促螺旋體糊精/槲皮素包合物的穩(wěn)定性測(cè)定61-62
- 5.3.5 酶促螺旋體糊精/槲皮素包合物的抗氧化性測(cè)定62
- 5.3.6 螺旋體糊精/槲皮素包合物在人工模擬胃腸液中的釋放性研究62-63
- 5.3.7 螺旋體糊精/槲皮素包合物在不同極性溶劑中的釋放性研究63
- 5.4 結(jié)果與分析63-71
- 5.4.1 酶促螺旋體糊精/槲皮素包合物的溶解度分析63-64
- 5.4.2 酶促螺旋體糊精/槲皮素包合物的吸濕性分析64-65
- 5.4.3 酶促螺旋體糊精/槲皮素包合物的體外消化性分析65
- 5.4.4 酶促螺旋體糊精/槲皮素包合物的穩(wěn)定性分析65-68
- 5.4.5 螺旋體糊精/槲皮素包合物的抗氧化性分析68-69
- 5.4.6 螺旋體糊精/槲皮素包合物在人工模擬胃腸液中的釋放特性69-70
- 5.4.7 螺旋體糊精槲皮素包合物在不同極性溶劑中的釋放性70-71
- 5.5 本章小結(jié)71-72
- 結(jié)論與展望72-75
- 一 結(jié)論72-74
- 二 論文創(chuàng)新之處74
- 三 展望74-75
- 參考文獻(xiàn)75-83
- 攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果83-84
- 致謝84-85
- 答辯委員會(huì)對(duì)論文的評(píng)定意見85
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,本文編號(hào):1096075
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