本文關鍵詞：基于生物功能色素衍生熒光探針及活細胞成像研究

  更多相關文章： 高碘酸根 熒光探針 比值型檢測 熒光偏振探針 活細胞成像 血清白蛋白

【摘要】：基于苯并噻唑、萘酰亞胺、七甲川菁染料生物功能熒光色素,設計、合成了三種高靈敏熒光探針,分別利用了激發(fā)態(tài)分子內質子轉移(ESIPT)、熒光偏振技術(FP)、雙激發(fā)雙發(fā)射近紅外熒光響應機制。進行了基于熒光探針的活細胞成像研究。(1)首次設計、合成了一種比值型熒光探針PDS-2,基于ESIPT原理,實現(xiàn)對高碘酸根的比值型定量檢測�；跓晒饧夹g的PDS-2能夠幫助我們更好地理解高碘酸根參與生物、化學反應的作用機理。該探針可以被當作一種有用的工具,應用于公共衛(wèi)生、食品安全以及環(huán)境保護等領域。(2)首次設計、合成一種基于萘酰亞胺的熒光偏振探針BIO,用于腫瘤細胞的定量檢測。熒光偏振技術具有自校準功能,精確度高。檢測過程可以在均相溶液中進行,無需細胞裂解和進一步的分離操作。實驗表明,BIO對Hela細胞的最低檢測限約為85 cells m L-1,線性范圍是2.5×102-1×106 cells m L-1。萘酰亞胺熒光團具有較長的激發(fā)態(tài)熒光壽命和較好的光學穩(wěn)定性,BIO適合于持續(xù)激發(fā)條件下的活細胞成像,通過細胞成像,可觀察到其與CD44蛋白過量表達細胞的特異性識別過程。(3)基于七甲川花菁染料具有波長較長的近紅外熒光的特點,且菁染料具有剛性平面結構和多個探針結合位點,同時結合血清白蛋白(以人血清白蛋白(HSA)作為代表)大分子在水溶液介質中存在結構選擇性的疏水空腔,空腔內微環(huán)境極性較小可使染料的熒光強度增加的特點,設計、合成一種花菁染料熒光探針C7H,利用其與HSA結合的雙波長熒光信號增強作用,實驗結果顯示合成的目標探針與血清蛋白質具有較強的位點特異性結合作用力,可以實現(xiàn)對于HSA的定量檢測,并應用于人體尿液和血清的實際樣品定量分析。(4)利用前期設計合成的基于FRET原理的比值型探針VTAF開展了活細胞內蛋白質相鄰巰基的可視化動態(tài)跟蹤研究。實驗結果表明,有豐富的相鄰巰基蛋白質位于線粒體。此外,一些氧化還原敏感的相鄰巰基蛋白位于細胞表面�；谠摫戎敌蜔晒鈧鞲屑夹g,可以較好的實現(xiàn)活細胞內相鄰巰基蛋白質的可視化、動態(tài)和定量檢測跟蹤。
【關鍵詞】：高碘酸根 熒光探針 比值型檢測 熒光偏振探針 活細胞成像 血清白蛋白
【學位授予單位】：上海師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：O657.3
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-10
• 第1章 緒論10-22
• 1.1 研究背景及意義10-11
• 1.2 小分子熒光探針的識別機理11-16
• 1.2.1 分子識別與小分子熒光探針的結構11-13
• 1.2.2 光誘導電子轉移（PET）13-14
• 1.2.3 分子內電荷轉移（ICT）14
• 1.2.4 熒光共振能量轉移（FRET）14-15
• 1.2.5 激發(fā)態(tài)分子內質子轉移（ESIPT）15-16
• 1.2.6 熒光偏振檢測技術16
• 1.3 小分子熒光探針的應用研究進展16-20
• 1.3.1 比值型熒光探針的介紹16-18
• 1.3.2 腫瘤常用檢測方法與熒光手術介紹18-20
• 1.4 論文選題依據(jù)和研究思路20-22
• 第2章 一種基于ESIPT的高選擇性、比值型高碘酸根熒光探針22-44
• 2.1 引言22-24
• 2.2 探針分子PDS-2 的設計24-28
• 2.3 實驗部分28-43
• 2.3.1 儀器和試劑28-29
• 2.3.2 目標產物的合成29-33
• 2.3.3 探針PDS-2 對于高碘酸根的熒光響應行為33-36
• 2.3.4 探針PDS-2 對于高碘酸根的定量檢測36-39
• 2.3.5 探針PDS-2 對于高碘酸根的選擇性實驗39-40
• 2.3.6 活細胞實驗和熒光試紙條應用40-43
• 2.4 本章小結43-44
• 第3章 基于萘酰亞胺的高靈敏癌細胞熒光偏振探針44-65
• 3.1 引言44-45
• 3.2 熒光偏振探針BIO的設計45-47
• 3.3 實驗部分47-64
• 3.3.1 儀器和試劑47-48
• 3.3.2 目標產物的合成48-52
• 3.3.3 BIO的結構表征52-54
• 3.3.4 BIO的熒光壽命和生物相容性54-55
• 3.3.5 BIO對HeLa細胞的熒光偏振響應55-58
• 3.3.6 BIO對HeLa細胞的定量檢測58-60
• 3.3.7 BIO的活細胞成像實驗60-61
• 3.3.8 He La細胞內BIO的亞細胞分布研究61-64
• 3.4 本章小結64-65
• 第4章 一種位點特異性雙重“Turn-on”型熒光探針及尿液和血清中血清白蛋白檢測65-79
• 4.1 引言65-66
• 4.2 探針C7H的設計66-67
• 4.3 實驗部分67-78
• 4.3.1 儀器和試劑67-68
• 4.3.2 目標產物的合成68-72
• 4.3.3 探針C7H對HSA的熒光響應行為和選擇性實驗72-73
• 4.3.4 探針C7H對HSA的定量檢測73-75
• 4.3.5 探針C7H對尿液和血清中HSA的定量檢測75-78
• 4.4 本章小結78-79
• 第5章 選擇性、比值型熒光探針對于活細胞內蛋白質相鄰巰基的可視化跟蹤研究79-93
• 5.1 引言79-81
• 5.2 探針VTAF的作用原理81-82
• 5.3 實驗部分82-92
• 5.3.1 儀器和試劑82
• 5.3.2 VTAF對活細胞內源性相鄰巰基蛋白的原位成像82-84
• 5.3.3 VTAF對活細胞內源性VDPs的動態(tài)跟蹤84-87
• 5.3.4 基于VTAF的VDPs亞細胞分布研究和比值成像87-92
• 5.4 本章小結92-93
• 參考文獻93-107
• 附錄（部分典型波普）107-121
• 攻讀學位期間取得的研究成果121-122
• 致謝122

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王姍姍;;小分子熒光探針在硫醇檢測中的最新研究進展[J];科技信息;2010年23期

2 向雨秘;龍少波;朱R，

本文編號：1065821