本文關(guān)鍵詞：基于信號(hào)放大的生物傳感器在生化分析中的應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 表面等離子共振成像 表面增強(qiáng)拉曼 金膠納米粒子 適體

【摘要】：表面增強(qiáng)拉曼(SERS)和表面等離子體共振技術(shù)(SPRi)是最近幾年剛興起的兩種檢測方法,干擾性小、檢測速度快、靈敏性好等優(yōu)點(diǎn)使得它們快速發(fā)展。本研究論文利用這兩種新穎的檢測方法結(jié)合雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、聚合酶循環(huán)放大技術(shù)和納米材料技術(shù),構(gòu)建了幾種能有效檢測離子和蛋白質(zhì)的分析方法,內(nèi)容如下:1、基于靶標(biāo)汞離子引發(fā)的雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和納米生物條碼的放大技術(shù),以表面增強(qiáng)拉曼作為檢測手段,設(shè)計(jì)了一種檢測汞離子的方法。首先利用T-Hg~(2+)-T的穩(wěn)定結(jié)合作用,將靶標(biāo)分子Hg~(2+)引入,然后利用雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)為拉曼信號(hào)分子的結(jié)合提供大量位點(diǎn),生物條碼中納米材料的應(yīng)用保證了大量信號(hào)分子的附著,最后利用生物素-鏈霉親和素的強(qiáng)相互作用,將信號(hào)分子引入到磁珠上,通過檢測磁珠上拉曼信號(hào)分子的強(qiáng)度,實(shí)現(xiàn)對(duì)Hg~(2+)的有效檢測。此方法新穎,簡單,有創(chuàng)新性,為檢測環(huán)境中的Hg~(2+)提供了一種新的方法。2、構(gòu)建了一種將生物納米材料與雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)相結(jié)合,利用SPR檢測Hg~(2+)的方法。利用T-Hg~(2+)-T的特殊結(jié)構(gòu),將兩條錯(cuò)配的DNA與Hg~(2+)相結(jié)合,在雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)與生物納米材料的雙重放大作用下,利用納米材料與等離子的耦合作用與增重效應(yīng),可以增強(qiáng)SPR的信號(hào)值,實(shí)驗(yàn)中的檢測到的最低濃度1.0×10-10 M。此方法可以快速、有效、高選擇性地檢測Hg~(2+),為定量檢測重金屬離子打開了新思路。3、此方案充分利用聚合酶的放大作用與生物納米材料的表面增強(qiáng)等離子效應(yīng),實(shí)現(xiàn)了對(duì)凝血酶的檢測。利用凝血酶與適體的特異性相互作用,將定量的凝血酶轉(zhuǎn)換為易于操作的DNA。發(fā)卡DNA與S1生物識(shí)別保證了實(shí)驗(yàn)的特異性,然后利用金膠納米粒子和量子點(diǎn)的耦合效應(yīng)來增強(qiáng)信號(hào)。DNA聚合酶可以進(jìn)行一系列重復(fù)大量的聚合置換反應(yīng),因此多重放大反應(yīng)的應(yīng)用實(shí)現(xiàn)了對(duì)凝血酶的有效檢測。此實(shí)驗(yàn)方案溫和,簡單,經(jīng)濟(jì),將適體與凝血酶的特異性結(jié)合換成別的識(shí)別作用,就可以廣泛應(yīng)用于小蛋白質(zhì)的檢測。
【關(guān)鍵詞】：表面等離子共振成像 表面增強(qiáng)拉曼 金膠納米粒子 適體
【學(xué)位授予單位】：青島科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：O657
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-9
• 第一章 前言9-27
• 1.1 紫外可見吸收光譜9-11
• 1.1.1 紫外可見吸收曲線9
• 1.1.2 紫外可見吸收光譜的特點(diǎn)9-10
• 1.1.3 光吸收基本定律10
• 1.1.4 紫外可見光譜儀的基本組成10-11
• 1.2 生物傳感器11-13
• 1.2.1 生物傳感器的基本組成11-12
• 1.2.2 生物傳感器的原理12
• 1.2.3 分子識(shí)別12
• 1.2.4 生物敏感物質(zhì)的固定化12-13
• 1.3 表面增強(qiáng)拉曼散射13-18
• 1.3.1 拉曼散射簡介13-14
• 1.3.2 表面增強(qiáng)拉曼散射簡介14
• 1.3.3 表面增強(qiáng)拉曼散射檢測生物化學(xué)組分14-17
• 1.3.4 激光拉曼光譜儀17-18
• 1.4 納米材料18-19
• 1.4.1 金納米粒子18
• 1.4.2 納米膠體金的標(biāo)記18-19
• 1.5 核酸與核酸反應(yīng)19-21
• 1.5.1 核酸組成19-20
• 1.5.2 DNA的結(jié)構(gòu)20
• 1.5.3 核酸分子雜交20
• 1.5.4 核酸DNA的功能20-21
• 1.6 表面等離子體共振生物傳感器21-25
• 1.6.1 表面等離子體共振基本原理21-22
• 1.6.2 SPR生物傳感器的原理22-23
• 1.6.3 SPR技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)23-24
• 1.6.4 表面等離子體共振技術(shù)的實(shí)際應(yīng)用24-25
• 1.7 立題依據(jù)和主要研究內(nèi)容25-27
• 第二章 基于雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的表面增強(qiáng)拉曼檢測Hg~(2+)27-37
• 2.1 引言27-28
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分28-30
• 2.2.1 試劑28
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器28-29
• 2.2.3 金膠納米粒子的制備29
• 2.2.4 生物條碼的制備29
• 2.2.5 DNA在磁珠上的固定29-30
• 2.2.6 DNA分子雜交鏈?zhǔn)窖h(huán)放大反應(yīng)30
• 2.2.7 表面增強(qiáng)拉曼信號(hào)的檢測30
• 2.3 結(jié)果與討論30-36
• 2.3.1 實(shí)驗(yàn)方案原理30-32
• 2.3.2 金膠納米粒子的SEM表征32
• 2.3.3 紫外可見吸收光譜32-33
• 2.3.4 可行性實(shí)驗(yàn)33
• 2.3.5 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化33-35
• 2.3.6 不同濃度Hg~(2+)的SERS信號(hào)和工作曲線35
• 2.3.7 實(shí)驗(yàn)方案的選擇性研究35-36
• 2.4 小結(jié)36-37
• 第三章 基于生物納米材料的表面等離子體共振技術(shù)檢測Hg~(2+)37-49
• 3.1 實(shí)驗(yàn)部分37-40
• 3.1.1 試劑37-38
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器38
• 3.1.3 金膠納米粒子的制備38-39
• 3.1.4 鏈霉親和素包裹修飾納米金膠的制備39
• 3.1.5 金片表面DNA固定39-40
• 3.1.6 金片表面生物傳感器修飾40
• 3.1.7 SPR在線檢測40
• 3.2 結(jié)果與討論40-48
• 3.2.1 SPR檢測Hg~(2+)的實(shí)驗(yàn)原理40-41
• 3.2.2 金膠納米粒子的紫外光譜表征41-42
• 3.2.3 可行性實(shí)驗(yàn)42-43
• 3.2.4 電化學(xué)阻抗表征43-44
• 3.2.5 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化44-46
• 3.2.6 SPR檢測Hg~(2+)靈敏度的研究46-47
• 3.2.7 對(duì)Hg~(2+)的選擇性實(shí)驗(yàn)47-48
• 3.3 小結(jié)48-49
• 第四章 基于酶循環(huán)放大技術(shù)的表面等離子體技術(shù)檢測凝血酶49-61
• 4.1 實(shí)驗(yàn)部分49-52
• 4.1.1 試劑和儀器49-50
• 4.1.2 納米金膠的制備50
• 4.1.3 CdS量子點(diǎn)的合成及修飾DNA50
• 4.1.4 合成生物條碼50-51
• 4.1.5 SPR生物傳感器的構(gòu)建51-52
• 4.1.6 SPR在線監(jiān)測52
• 4.2 結(jié)果與討論52-59
• 4.2.1 實(shí)驗(yàn)方案原理52-53
• 4.2.2 實(shí)驗(yàn)可行性53-54
• 4.2.3 納米金膠的表征54-55
• 4.2.4 紫外-可見吸收光譜55
• 4.2.5 凝血酶靈敏度檢測55-56
• 4.2.6 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化56-59
• 4.2.7 凝血酶檢測的選擇性59
• 4.3 小結(jié)59-61
• 結(jié)論61-63
• 參考文獻(xiàn)63-71
• 致謝71-72
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文72-73

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 張雁;尹利輝;金少鴻;;表面增強(qiáng)拉曼光譜法檢測微量添加物質(zhì)的研究[J];中國藥事;2012年04期

2 顧振華;趙宇翔;吳衛(wèi)平;彭少杰;趙建豐;胡耀銘;喻文娟;韓奕奕;;表面增強(qiáng)拉曼光譜法快速檢測水產(chǎn)品中的孔雀石綠[J];化學(xué)世界;2011年01期

3 趙宇翔;彭少杰;趙建豐;胡耀銘;喻文娟;韓奕奕;;表面增強(qiáng)拉曼光譜法快速檢測牛奶中的三聚氰胺[J];乳業(yè)科學(xué)與技術(shù);2011年01期

4 王浩;劉艷琴;曹紅;楊紅梅;劉小力;閆龍寶;;固相萃取與高效液相色譜聯(lián)用測定寵物食品中三聚氰胺[J];分析化學(xué);2008年02期

5 吳泓橙;董守安;董穎男;唐春;楊生春;;金納米粒子的陽光光化學(xué)合成和晶種媒介生長[J];高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào);2007年01期

6 董守安;納米技術(shù)中的金元素[J];貴金屬;2003年01期

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本文編號(hào)：1037425