發(fā)布時間：2017-10-10 22:41

  本文關(guān)鍵詞：一種快速測定牦牛皮膠和牛皮膠中18種氨基酸的PITC柱前衍生HPLC法

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【摘要】：建立一種有效測定牦牛皮膠與牛皮明膠中18種氨基酸含量的異硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生-高效液相色譜法。對PITC衍生方法進行了優(yōu)化,方法無需干燥和有機溶劑萃取過量PITC的步驟。牦牛皮使用胃蛋白酶在37℃下酶解72 h,酶解物冷凍干燥保存。樣品用6.0 mol/L鹽酸,110℃水解后,以PITC為衍生試劑進行衍生處理。采用Shiseido Capcell Pak C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色譜柱,流動相為0.14 mol/L乙酸鈉-0.5 m L/L三乙胺水溶液(p H 6.08)和60%乙腈,梯度洗脫,流速為1 m L/min,檢測波長為254 nm。18種氨基酸在0.2~80 mg/L濃度范圍內(nèi)與峰面積間的線性關(guān)系良好(r2≥0.999 2),檢出限為0.01~0.39 mg/kg,平均回收率為78.7%~121.0%,相對標準偏差(RSD)為0.05%~12.0%。結(jié)果表明,該方法衍生化步驟簡單、靈敏度高、前處理時間短,可用于牛科動物皮膠中多種氨基酸成分和含量的測定。
【作者單位】： 中國科學(xué)院西北高原生物研究所青海省藏藥藥理學(xué)和安全性評價研究重點實驗室;中國科學(xué)院藏藥重點實驗室;中國科學(xué)院大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： 牦牛皮明膠 牛皮明膠 氨基酸 柱前衍生 異硫氰酸苯酯 高效液相色譜法
【基金】：青海省自然科學(xué)基金青年項目(2015-ZJ-924Q) 中國科學(xué)院“西部之光”人才培養(yǎng)引進計劃
【分類號】：R284.1;O657.72
【正文快照】： 牦牛(Bos grunniens)是世界上除了人類之外生活在海拔最高處的哺乳動物,是高原畜牧業(yè)最重要的優(yōu)勢畜種[1-3]。牦牛皮膠由牦牛皮經(jīng)科學(xué)方法提煉而成,可益氣生血、健脾補腎,主要用于營養(yǎng)性貧血、久病氣虛無力等癥[4]。新鮮牛皮中蛋白質(zhì)高達30%~35%,氨基酸是蛋白質(zhì)的基本組成單位，

本文編號：1009049