本文關(guān)鍵詞：不飽和脂肪酸對赤潮微藻氧化脅迫影響及細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： 赤潮 米氏凱倫藻 東海原甲藻 抑制機(jī)理 克生物質(zhì) 細(xì)胞凋亡機(jī)制

【摘要】：近年來,有害赤潮頻繁肆虐于世界各國,嚴(yán)重危害海洋生態(tài)環(huán)境的穩(wěn)定、近海養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和人類的健康生存。防治赤潮的方法主要有物理、化學(xué)和生物法三種,其中利用大型海藻的克生作用和克生物質(zhì)抑制有害赤潮的爆發(fā)具有獨(dú)特的優(yōu)勢。目前對克生物質(zhì)抑藻機(jī)理的研究主要集中在對藻細(xì)胞膜、光合系統(tǒng)、胞外酶等的影響,而對克生物質(zhì)的氧化脅迫及細(xì)胞凋亡機(jī)制的探索鮮見報(bào)道。不飽和脂肪酸—亞油酸(LA)和二十碳五烯酸(EPA),是從大型海藻中分離鑒定得來,其具有克生活性較高,在環(huán)境中降解迅速,對非靶標(biāo)生物毒性低等優(yōu)勢。米氏凱倫藻和東海原甲藻是我國新興赤潮優(yōu)勢種,兩者能一道形成雙相赤潮。本論文通過探究亞油酸誘導(dǎo)米氏凱倫藻、EPA誘導(dǎo)東海原甲藻發(fā)生氧化脅迫、膜脂過氧化,進(jìn)一步引起了細(xì)胞凋亡的現(xiàn)象,從新視角闡釋不飽和脂肪酸的抑藻機(jī)制。為克生物質(zhì)抑藻劑的研發(fā)和應(yīng)用提供理論依據(jù)。取得以下結(jié)果:1、亞油酸對米氏凱倫藻、EPA對東海原甲藻生長的影響低濃度的亞油酸對米氏凱倫藻的生長起到了促進(jìn)作用,之后亞油酸濃度增高,抑制作用加劇。EPA對東海原甲藻的影響同樣出現(xiàn)“低促高抑”趨勢。2、亞油酸對米氏凱倫藻、EPA對東海原甲藻氧化脅迫的研究(1)不同濃度的亞油酸處理米氏凱倫藻,藻細(xì)胞內(nèi)SOD、POD、CAT活性,GSH、AsA含量均出現(xiàn)“低促高抑”現(xiàn)象。暴露于EPA下的東海原甲藻亦表現(xiàn)出上述規(guī)律。(2)亞油酸脅迫引起米氏凱倫藻細(xì)胞活性氧積累和H2O2、O_2~(·-)、·OH三種活性氧自由基的積累。EPA作用于東海原甲藻,對藻細(xì)胞內(nèi)活性氧和氧自由基產(chǎn)生起了促進(jìn)作用。但兩種克生物質(zhì)對O_2~(·-)含量的影響沒有明顯規(guī)律性。(3)低濃度亞油酸處理,對米氏凱倫藻細(xì)胞的MDA含量無顯著影響;高濃度亞油酸處理時(shí),MDA含量急劇增高。EPA作用下東海原甲藻MDA含量持續(xù)增高。(4)亞油酸對米氏凱倫藻脅迫與EPA對東海原甲藻脅迫相比,各種指標(biāo)含量均不相同,這由于外源性克生物質(zhì)不同,不同藻類受到的影響不同。3、亞油酸對米氏凱倫藻、EPA對東海原甲藻細(xì)胞凋亡機(jī)制的探究(1)臺(tái)盼藍(lán)拒染實(shí)驗(yàn)表明亞油酸可以抑制米氏凱倫藻的細(xì)胞存活率、EPA可以抑制東海原甲藻的細(xì)胞存活率。(2)基于透射電鏡觀察亞顯微結(jié)構(gòu)表明,藻細(xì)胞出現(xiàn)質(zhì)壁分離,細(xì)胞壁凸起、細(xì)胞器排列紊亂,外膜溶解,質(zhì)體界限不清晰,藻細(xì)胞外形改變,出現(xiàn)淀粉粒、質(zhì)體溶解,細(xì)胞解體等現(xiàn)象。流式細(xì)胞術(shù)檢測,結(jié)果表明藻細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。(3)通過藻細(xì)胞內(nèi)線粒體膜電位降低、細(xì)胞色素C釋放、Caspase-3,9含量升高、Bcl-2蛋白表達(dá)量降低等生物化學(xué)方面進(jìn)一步揭示不飽和脂肪酸脅迫誘導(dǎo)藻細(xì)胞凋亡的機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：赤潮 米氏凱倫藻 東海原甲藻 抑制機(jī)理 克生物質(zhì) 細(xì)胞凋亡機(jī)制
【學(xué)位授予單位】：曲阜師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：X55
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-9
• 第一章 緒論9-22
• 1.1 赤潮9-13
• 1.1.1 赤潮及赤潮的發(fā)生情況9-11
• 1.1.2 赤潮的形成原因11
• 1.1.3 赤潮的危害11-12
• 1.1.4 赤潮的治理方法12-13
• 1.2 克生作用與赤潮防治13-17
• 1.2.1 克生作用13
• 1.2.2 克生作用在赤潮治理中的研究13-16
• 1.2.3 克生物質(zhì)對赤潮微藻抑制機(jī)理研究現(xiàn)狀16-17
• 1.3 本研究選題依據(jù)17-19
• 1.3.1 不飽和脂肪酸選擇依據(jù)17-18
• 1.3.2 藻類選擇依據(jù)18-19
• 1.4 本研究的目的、意義和技術(shù)路線19-22
• 1.4.1 研究目的、意義19
• 1.4.2 研究的技術(shù)路線19-22
• 第二章 亞油酸對米氏凱倫藻及EPA對東海原甲藻生長的影響22-27
• 2.1 引言22
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料22-23
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料22-23
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)藥品及試劑23
• 2.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器23
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法23-24
• 2.4 數(shù)據(jù)處理24
• 2.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-26
• 2.6 分析與討論26-27
• 第三章 亞油酸對米氏凱倫藻及EPA對東海原甲藻氧化脅迫的研究27-52
• 3.1 引言27-28
• 3.2 實(shí)驗(yàn)材料28-29
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料28
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)藥品及試劑28-29
• 3.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器29
• 3.2.4 實(shí)驗(yàn)所需試劑盒29
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法29-33
• 3.3.1 亞油酸對米氏凱倫藻及EPA對東海原甲藻抗氧化系統(tǒng)的影響29-32
• 3.3.2 亞油酸對米氏凱倫藻及EPA對東海原甲藻活性氧產(chǎn)生的影響32-33
• 3.3.3 亞油酸對米氏凱倫藻及EPA對東海原甲藻的膜脂過氧化傷害33
• 3.4 數(shù)據(jù)處理33-34
• 3.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果34-49
• 3.5.1 亞油酸對米氏凱倫藻及EPA對東海原甲藻抗氧化系統(tǒng)的影響34-42
• 3.5.2 亞油酸對米氏凱倫藻及EPA對東海原甲藻活性氧產(chǎn)生的影響42-48
• 3.5.3 亞油酸對米氏凱倫藻及EPA對東海原甲藻的膜脂過氧化傷害48-49
• 3.6 分析與討論49-51
• 3.7 小結(jié)51-52
• 第四章 亞油酸對米氏凱倫藻及EPA對東海原甲藻細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究52-71
• 4.1 引言52
• 4.2 實(shí)驗(yàn)材料52-53
• 4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料52
• 4.2.2 實(shí)驗(yàn)藥品52-53
• 4.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器、試劑盒53
• 4.3 實(shí)驗(yàn)方法53-55
• 4.3.1 臺(tái)盼藍(lán)染色初步鑒定藻細(xì)胞死亡方式53
• 4.3.2 透射電鏡觀察藻細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)變化53-54
• 4.3.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡54
• 4.3.4 藻細(xì)胞線粒體膜電位失衡的檢測54
• 4.3.5 藻細(xì)胞細(xì)胞色素C的釋放54
• 4.3.6 藻細(xì)胞Caspase-3,9 酶的檢測54
• 4.3.7 藻細(xì)胞Bcl-2 家族蛋白表達(dá)檢測54-55
• 4.4 數(shù)據(jù)處理55
• 4.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果55-68
• 4.5.1 臺(tái)盼藍(lán)染色初步鑒定藻細(xì)胞死亡方式55-56
• 4.5.2 透射電鏡觀察藻細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)變化56-60
• 4.5.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測藻細(xì)胞凋亡60-61
• 4.5.4 藻細(xì)胞線粒體膜電位失衡的檢測61-62
• 4.5.5 藻細(xì)胞細(xì)胞色素C的釋放62-64
• 4.5.6 藻細(xì)胞Caspase-3,9 酶的檢測64-67
• 4.5.7 藻細(xì)胞Bcl-2 家族蛋白表達(dá)檢測67-68
• 4.6 分析與討論68-69
• 4.7 小結(jié)69-71
• 第五章 結(jié)論與展望71-73
• 5.1 結(jié)論71-72
• 5.2 展望72-73
• 參考文獻(xiàn)73-80
• 致謝80

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ;Mechanism and control of lake eutrophication[J];Chinese Science Bulletin;2006年19期

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本文編號(hào)：783825