近年來(lái),我國(guó)沿海海域環(huán)境有逐漸惡化的趨勢(shì),重金屬、有機(jī)及無(wú)機(jī)污染日趨嚴(yán)重。厚殼貽貝是浙江舟山海域重要的特色經(jīng)濟(jì)貝類,具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。作為一種濾食附著生存的生物,厚殼貽貝對(duì)海洋環(huán)境中的污染物具有很強(qiáng)的生物富集作用。一方面貝類富集的重金屬和持久性有機(jī)物可通過(guò)食物鏈傳遞,進(jìn)而對(duì)人體造成傷害;另一方面當(dāng)富集超標(biāo)時(shí),對(duì)厚殼貽貝自身也會(huì)造成傷害,以致抗病力減弱,病害頻發(fā)。深入了解厚殼貽貝響應(yīng)外界環(huán)境刺激的應(yīng)激機(jī)制,篩選抗逆分子靶標(biāo),可為厚殼貽貝抗逆育種提供理論支持,對(duì)厚殼貽貝產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展意義重大。鑒于細(xì)胞色素P450超家族是一種亞鐵血紅素-硫醇鹽蛋白,在內(nèi)源性化合物的生物合成和外源性物質(zhì)的代謝轉(zhuǎn)化中起著關(guān)鍵作用,本研究克隆了厚殼貽貝CYP450家族重要成員CYP3A的兩個(gè)亞型:McCYP3A1和McCYP3A2,鑒定了其分子特征,分析了McCYP3A1和McCYP3A2在鎘和苯并芘單一及復(fù)合暴露下的時(shí)空表達(dá)模式。同時(shí)分析了鎘和苯并芘單一及復(fù)合暴露下厚殼貽貝脂質(zhì)過(guò)氧化水平（通過(guò)測(cè)定丙二醛MDA含量）以及抗氧化酶系統(tǒng)包括超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）的抗氧化反應(yīng)。主要研... 

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 厚殼貽貝及其養(yǎng)殖現(xiàn)狀
    1.2 主要海洋污染物及相關(guān)研究進(jìn)展
        1.2.1 海洋重金屬污染
        1.2.2 海洋有機(jī)物污染
        1.2.3 重金屬有機(jī)物污染的相關(guān)研究
    1.3 細(xì)胞色素P450 的結(jié)構(gòu)和功能
        1.3.1 細(xì)胞色素P450 的結(jié)構(gòu)特征
        1.3.2 細(xì)胞色素P450 的功能
    1.4 細(xì)胞色素P4503A
    1.5 抗氧化防御系統(tǒng)
        1.5.1 超氧化物歧化酶(SOD)
        1.5.2 過(guò)氧化氫酶(CAT)
        1.5.3 脂質(zhì)過(guò)氧化(LPO)與丙二醛(MDA)
    1.6 研究目的和意義
第二章 厚殼貽貝CYP3A基因CDNA克隆
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 樣品材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 總RNA的提取與質(zhì)量檢測(cè)
        2.2.2 逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA
        2.2.3 厚殼貽貝CYP3A核心序列擴(kuò)增
        2.2.4 PCR產(chǎn)物的鑒定和膠回收
        2.2.5 生物信息學(xué)分析
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 厚殼貽貝基因克隆及分子特征分析
        2.3.2 厚殼貽貝系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析
第三章 厚殼貽貝CYP3A基因在苯并芘和鎘暴露下在鰓和消化腺組織的表達(dá)模式
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)樣品
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 苯并芘脅迫
        3.2.2 重金屬鎘脅迫
        3.2.3 RNA的提取與cDNA的合成
        3.2.4 熒光定量PCR
        3.2.5 數(shù)據(jù)分析
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 厚殼貽貝CYP3A基因在鰓組織的表達(dá)模式
        3.3.2 厚殼貽貝CYP3A基因在消化腺組織的表達(dá)模式
    3.4 討論
第四章 苯并芘和鎘暴露對(duì)厚殼貽貝鰓和消化腺組織抗氧化系統(tǒng)的影響
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)樣品
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器和試劑
        4.1.3 樣品制備
    4.2 解毒代謝指標(biāo)測(cè)定方法
    4.3 數(shù)據(jù)處理和分析
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 厚殼貽貝鰓組織SOD,CAT活力及MDA含量的影響
        4.4.2 厚殼貽貝消化腺組織SOD,CAT活力及MDA含量的影響
    4.5 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果
附錄


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]大黃魚(yú)（Pseudosciaena crocea）細(xì)胞色素P450 CYP4F7基因的克隆及表達(dá)分析[J]. 婁繪芳,黃艷青,吳信忠.  海洋學(xué)報(bào)(中文版). 2008(04)
[3]厚殼貽貝人工繁殖技術(shù)的研究[J]. 常抗美,吳劍鋒.  南方水產(chǎn). 2007(03)
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博士論文
[1]鎘、銅分別脅迫蝦夷扇貝的毒性作用機(jī)制研究[D]. 孟曉林.中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2013
[2]幾種重金屬和有機(jī)污染物對(duì)文蛤Meretrxi meretrix生態(tài)毒理效應(yīng)的研究[D]. 王清.中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2010

碩士論文
[1]重金屬與苯并芘在貽貝體內(nèi)的復(fù)合毒性效應(yīng)[D]. 張翼飛.浙江大學(xué) 2017
[2]汞和鎘對(duì)紫貽貝（Mytilus edulis）的單一與聯(lián)合作用效應(yīng)[D]. 潘京津.中國(guó)海洋大學(xué) 2015
[3]多環(huán)芳烴化合物對(duì)櫛孔扇貝致毒機(jī)理的研究[D]. 苗晶晶.中國(guó)海洋大學(xué) 2006



本文編號(hào)：3710094