膠質(zhì)類芽孢桿菌（Paenibacillus mucilaginosus）具有抗逆性強(qiáng)、固氮、解磷、解鉀和生物修復(fù)等多種功能,這使其可以作為生物肥料和生物絮凝劑的菌種而應(yīng)用于農(nóng)業(yè)和廢水處理等領(lǐng)域,具有廣闊應(yīng)用前景。研究表明,膠質(zhì)類芽孢桿菌這些功能均與其能產(chǎn)生肥厚莢膜和分泌大量胞外聚合物（EPS）有密切關(guān)聯(lián),故而對(duì)EPS的研究有重要價(jià)值。為進(jìn)一步認(rèn)識(shí)該細(xì)菌EPS功能的分子基礎(chǔ)及作用機(jī)制,本論文研究了膠質(zhì)類芽孢桿菌產(chǎn)EPS的發(fā)酵條件優(yōu)化,該菌培養(yǎng)物對(duì)重金屬離子的吸附特性,蛋白質(zhì)組測(cè)序和相關(guān)差異表達(dá)蛋白的實(shí)時(shí)熒光定量PCR鑒定等,以揭示該菌在特定條件下EPS分泌增多的分子機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:（1）通過(guò)正交試驗(yàn)確定了該細(xì)菌培養(yǎng)基中酵母提取物、礦粉和蔗糖添加量及pH值的最優(yōu)水平,其中,酵母提取物（0.1 g/100 mL）、礦粉（0.4 g/100 mL）、pH值（8）、蔗糖（2 g/100 mL）的優(yōu)化后培養(yǎng)基配方可以使膠質(zhì)類芽孢桿菌發(fā)酵液EPS含量顯著提高。（2）采用iTRAQ蛋白質(zhì)組測(cè)序技術(shù)研究了搖床培養(yǎng)條件下加蛇紋石礦粉與不加礦粉培養(yǎng)該菌的差異表達(dá)蛋白。結(jié)果表明,兩組之間總差異蛋白數(shù)為... 

【文章來(lái)源】：南京師范大學(xué)江蘇省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 膠質(zhì)類芽孢桿菌概述
    1.2 膠質(zhì)類芽孢桿菌相關(guān)組學(xué)研究及蛋白質(zhì)組學(xué)研究
        1.2.1 膠質(zhì)類芽孢桿菌相關(guān)組學(xué)研究
        1.2.2 蛋白質(zhì)組學(xué)研究進(jìn)展
        1.2.3 iTRAQ技術(shù)進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定原理及優(yōu)勢(shì)
    1.3 微生物絮凝劑的制作與絮凝重金屬研究
    1.4 立題背景、研究目標(biāo)及主要研究?jī)?nèi)容
        1.4.1 立題背景與研究目標(biāo)
        1.4.2 研究?jī)?nèi)容與技術(shù)路線
第2章 膠質(zhì)類芽孢桿菌發(fā)酵條件優(yōu)化
    2.1 材料與方法
        2.1.1 菌株及礦物
        2.1.2 培養(yǎng)基與試劑
        2.1.3 儀器設(shè)備
        2.1.4 細(xì)菌培養(yǎng)
        2.1.5 細(xì)菌在有氮和無(wú)氮培養(yǎng)條件下的染色
        2.1.6 細(xì)菌發(fā)酵液多糖和蛋白質(zhì)含量的測(cè)定
        2.1.7 優(yōu)化培養(yǎng)基正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.1.8 重金屬離子濃度對(duì)細(xì)菌發(fā)酵液多糖含量的影響
        2.1.9 接種量對(duì)細(xì)菌發(fā)酵液多糖含量的影響
        2.1.10 礦粉種類對(duì)膠質(zhì)類芽孢桿菌發(fā)酵的影響
        2.1.11 DART分析細(xì)菌發(fā)酵液多糖
    2.2 結(jié)果與討論
        2.2.1 膠質(zhì)類芽孢桿菌菌體形態(tài)觀察
        2.2.2 苯酚-硫酸法測(cè)定多糖含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        2.2.3 考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)含量標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        2.2.4 正交試驗(yàn)優(yōu)化培養(yǎng)條件及驗(yàn)證
        2.2.5 重金屬離子濃度對(duì)多糖含量影響的單因素實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 接種量對(duì)多糖含量影響的單因素實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 礦粉種類對(duì)膠質(zhì)類芽孢桿菌發(fā)酵的影響
        2.2.8 DART分析細(xì)菌發(fā)酵液多糖
    2.3 小結(jié)
第3章 蛋白質(zhì)組測(cè)序揭示胞外聚合物分泌增多的機(jī)理
    3.1 材料與方法
        3.1.1 儀器與試劑
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 蛋白質(zhì)組取樣時(shí)間點(diǎn)的確定
        3.2.2 總蛋白質(zhì)檢及定量
        3.2.3 蛋白質(zhì)組測(cè)序結(jié)果的數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估
        3.2.4 樣本比較分析
        3.2.5 全蛋白質(zhì)功能注釋
        3.2.6 差異蛋白分析
        3.2.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR驗(yàn)證
    3.3 討論
        3.3.1 碳水化合物代謝相關(guān)過(guò)程中的差異蛋白富集分析
        3.3.2 其他有機(jī)物質(zhì)代謝過(guò)程中的差異蛋白富集分析
        3.3.3 細(xì)菌抗逆性相關(guān)的差異蛋白富集分析
    3.4 小結(jié)
第4章 微生物絮凝劑對(duì)重金屬離子的吸附特性研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 絮凝劑的制備
        4.1.2 重金屬溶液配制
        4.1.3 吸附率的計(jì)算
        4.1.4 等溫吸附實(shí)驗(yàn)
        4.1.5 吸附動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)
    4.2 結(jié)果與討論
        4.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        4.2.2 吸附時(shí)間對(duì)吸附率的影響
        4.2.3 初始濃度對(duì)吸附率的影響
        4.2.4 等溫吸附方程擬合
        4.2.5 吸附的動(dòng)力學(xué)研究
    4.3 小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間已發(fā)表論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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