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油脂降解菌的篩選及生物法降解油脂的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-23 10:30
  餐飲廢水現(xiàn)已成為國(guó)內(nèi)主要水體污染源之一,高效去除餐飲廢水中的油脂已成為現(xiàn)如今急待解決的環(huán)境問題。物理法和化學(xué)法作為常用分離廢水油脂的方法,易造成二次污染并且能耗大、成本高。油脂生物降解法因其清潔、高效、簡(jiǎn)便而受到廣泛關(guān)注,但微生物降解油脂能力與其所處環(huán)境條件密切相關(guān),故本研究通過(guò)優(yōu)化處理工藝達(dá)到提高微生物油脂降解率的目的。本研究采樣自貴州大學(xué)各食堂和貴陽(yáng)市菜市場(chǎng)的污水口,通過(guò)分離篩選獲得具有較高降解油脂能力的微生物并探索其最佳降解油脂的工藝條件,同時(shí)研究435固定化脂肪酶降解油脂能力隨環(huán)境條件變化趨勢(shì),以期為后續(xù)微生物降解油脂能力優(yōu)化提供理論基礎(chǔ),主要結(jié)論如下:(1)從貴州大學(xué)學(xué)生四食堂排水溝、東區(qū)食堂排水溝、老朝陽(yáng)污水溝和貴陽(yáng)市太慈橋菜市場(chǎng)附近采集的含油污水樣中分離篩選出具有降解油脂能力的菌株17株,實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)菌株Xo和Mh油脂降解能力較好,其24 h油脂降解率分別為39.5%和29.8%。(2)對(duì)菌株Xo和Mh進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定,初步確定為粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcesens)和尖孢鐮刀菌(Fusaririu oxysporum)。分別對(duì)菌株Xo和Mh進(jìn)行菌種特性初步研... 

【文章來(lái)源】:貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:100 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 餐飲廢水的基本概況
        1.1.1 研究背景
        1.1.2 含油餐廚廢水的特征
            1.1.2.1 含油量高
            1.1.2.2 油脂存在形式復(fù)雜
            1.1.2.3 水質(zhì)污染程度高
    1.2 含油餐飲廢水的處理方法
        1.2.1 物理處理方法
            1.2.1.1 膜分離技術(shù)
            1.2.1.2 粗;
            1.2.1.3 重力分離法
            1.2.1.4 氣浮分離技術(shù)
            1.2.1.5 吸附法
            1.2.1.6 旋流分離技術(shù)
        1.2.2 化學(xué)處理方法
            1.2.2.1 化學(xué)絮凝法
            1.2.2.2 高級(jí)氧化法
        1.2.3 微生物處理方法
            1.2.3.1 生物流化床處理法
            1.2.3.2 活性污泥處理法
            1.2.3.3 生物膜法
            1.2.3.4 生物固定化技術(shù)
    1.3 降解油脂微生物來(lái)源
        1.3.1 自然界中分離篩選
        1.3.2 人工馴化
        1.3.3 誘變育種
        1.3.4 構(gòu)建基因工程菌
    1.4 微生物制劑在含油廢水中的研究
        1.4.1 微生物菌劑在水體修復(fù)領(lǐng)域國(guó)內(nèi)外的研究現(xiàn)狀
        1.4.2 脂肪酶在國(guó)內(nèi)外的研究現(xiàn)狀
    1.5 本課題研究的目的、意義及主要內(nèi)容
        1.5.1 本課題研究的目的和意義
        1.5.2 研究的主要內(nèi)容
            1.5.2.1 可降解油脂菌的分離篩選
            1.5.2.2 篩選菌株降解油脂的工藝優(yōu)化
            1.5.2.3 435脂肪酶降解油脂的初步應(yīng)用研究
第二章 可降解油脂微生物的分離及鑒定
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 主要溶液
        2.1.4 主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 降解油脂菌株的篩選
            2.2.1.1 樣品的采集
            2.2.1.2 降解油脂菌株的初篩
                2.2.1.2.1 馴化培養(yǎng)篩選法
                2.2.1.2.2 三丁酸甘油酯平板初篩
        2.2.2 降解油脂菌株的復(fù)篩
            2.2.2.1 種子培養(yǎng)
            2.2.2.2 油脂測(cè)定方法
                2.2.2.2.1 橄欖油標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
                2.2.2.2.2 樣品中油脂含量的測(cè)定
                2.2.2.2.3 油脂降解率計(jì)算方法
        2.2.3 菌株的保藏
            2.2.3.1 細(xì)菌的保藏
            2.2.3.2 霉菌的保藏
        2.2.4 菌種特性的初步研究
            2.2.4.1 生長(zhǎng)曲線的測(cè)定
            2.2.4.2 最適生長(zhǎng)溫度
        2.2.5 菌種鑒定
            2.2.5.1 細(xì)菌生理生化
            2.2.5.2 細(xì)菌分子生物學(xué)鑒定
            2.2.5.3 真菌分子生物學(xué)鑒定
            2.2.5.4 序列分析
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 馴化培養(yǎng)篩選法的篩選結(jié)果
        2.3.2 三丁酸甘油酯平板篩選法的篩選結(jié)果
        2.3.3 降解油脂菌株的復(fù)篩
            2.3.3.1 橄欖油標(biāo)準(zhǔn)曲線
            2.3.3.2 樣品中油脂含量的測(cè)定
        2.3.4 菌株Xo、Mh在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線
            2.3.4.1 細(xì)菌Xo在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線
            2.3.4.2 霉菌Mh在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線
        2.3.5 菌株Xo、Mh在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的最適生長(zhǎng)溫度
        2.3.6 菌株Xo、Mh在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的最適生長(zhǎng)pH
        2.3.7 菌株鑒定
            2.3.7.1 細(xì)菌生理生化測(cè)定
            2.3.7.2 菌株16S rRNA基因序列分析
            2.3.7.3 菌株18S rRNA基因序列分析
    2.4 本章小結(jié)
第三章 細(xì)菌Xo降解油脂的工藝優(yōu)化
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        3.1.2 主要培養(yǎng)基
        3.1.3 主要試劑
        3.1.4 主要儀器
    3.2 方法
        3.2.1 培養(yǎng)方法
            3.2.1.1 菌種活化
            3.2.1.2 種子培養(yǎng)
        3.2.2 分析方法
            3.2.2.1 樣品中油脂含量測(cè)定
            3.2.2.2 油脂降解率計(jì)算方法
            3.2.2.3 細(xì)菌Xo降解油脂單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
            3.2.2.4 Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
            3.2.2.5 Box-Behnken響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)
            3.2.2.6 回歸模型驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 單因素優(yōu)化實(shí)驗(yàn)
            3.3.1.1 培養(yǎng)時(shí)間對(duì)細(xì)菌Xo降解油脂的影響
            3.3.1.2 搖床轉(zhuǎn)速對(duì)細(xì)菌Xo降解油脂的影響
            3.3.1.3 培養(yǎng)溫度對(duì)細(xì)菌Xo降解油脂的影響
            3.3.1.4 接種量對(duì)細(xì)菌Xo降解油脂的影響
            3.3.1.5 NaCl添加量對(duì)細(xì)菌Xo降解油脂的影響
            3.3.1.6 初始pH對(duì)細(xì)菌Xo降解油脂的影響
            3.3.1.7 油脂添加量對(duì)細(xì)菌Xo降解油脂的影響
        3.3.2 Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)篩選影響油脂降解率的主要因素
        3.3.3 Box-Behnken實(shí)驗(yàn)篩選影響油脂降解率的主要因素
        3.3.4 Box-Behnken響應(yīng)面分析
        3.3.5 回歸模型驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
    3.4 本章小結(jié)
第四章 435脂肪酶降解油脂的初步應(yīng)用研究
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要儀器
    4.2 方法
        4.2.1 樣品中油脂含量測(cè)定
        4.2.2 油脂降解率計(jì)算方法
        4.2.3 435固定化脂肪酶水解油脂條件優(yōu)化
        4.2.4 435固定化脂肪酶可重復(fù)使用次數(shù)及消耗率測(cè)定
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 反應(yīng)時(shí)間對(duì)435固定化脂肪酶降解油脂的影響
        4.3.2 搖床轉(zhuǎn)速對(duì)435固定化脂肪酶降解油脂的影響
        4.3.3 反應(yīng)溫度對(duì)435固定化脂肪酶降解油脂的影響
        4.3.4 環(huán)境初始pH對(duì)435固定化脂肪酶降解油脂的影響
        4.3.5 435固定化脂肪酶添加量對(duì)其降解油脂的影響
        4.3.6 435固定化脂肪酶可重復(fù)使用次數(shù)及消耗率
            4.3.6.1 435固定化脂肪酶重復(fù)使用次數(shù)
            4.3.6.2 435固定化脂肪酶消耗率
    4.4 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
圖版


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
[1]餐廚垃圾廢水的生物處理實(shí)驗(yàn)研究[D]. 王罕.蘇州科技學(xué)院 2014
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[3]高效油脂降解菌株的篩選及在含油廢水處理中的應(yīng)用[D]. 康燕莉.蘭州交通大學(xué) 2013
[4]粘質(zhì)沙雷氏菌發(fā)酵生產(chǎn)D-乳酸的研究[D]. 蘇剛.華東理工大學(xué) 2013
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[8]餐廚垃圾快速分解菌的篩選鑒定及優(yōu)化組合[D]. 金建云.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
[9]高級(jí)氧化技術(shù)處理油田水中污染物的研究[D]. 孔凡貴.大慶石油學(xué)院 2003
[10]耐高濃度鐵離子的菌種馴化及其浸礦實(shí)驗(yàn)研究[D]. 周峨.昆明理工大學(xué) 2002



本文編號(hào):2933558

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