鎘是工業(yè)生產(chǎn)和日常生活中廣泛使用的有毒重金屬之一。毒死蜱是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中廣泛使用的有機(jī)磷農(nóng)藥之一。鎘和毒死蜱能夠造成環(huán)境污染,通過(guò)污染的空氣、土壤、水和食物積累于人類(lèi)和動(dòng)物體內(nèi),影響人類(lèi)和動(dòng)物健康。肝臟為鎘和毒死蜱中毒的靶器官之一。本試驗(yàn)旨在研究鎘和毒死蜱單一及聯(lián)合中毒對(duì)鯉魚(yú)肝臟的有害影響,為鎘和毒死蜱單一及聯(lián)合中毒導(dǎo)致鯉魚(yú)肝臟自噬提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù),為鎘和毒死蜱單一及聯(lián)合中毒對(duì)鯉魚(yú)肝臟的影響提供參考。將120條健康鯉魚(yú)隨機(jī)分為4組,對(duì)照組、鎘組、毒死蜱組和鎘毒死蜱聯(lián)合組。對(duì)照組飼養(yǎng)于去氯自來(lái)水中;鎘組飼養(yǎng)于添加CdCl_2·2.5H_2O(含Cd為0.26 mg/L)的去氯自來(lái)水中;毒死蜱組飼養(yǎng)于添加毒死蜱(含毒死蜱為14.5μg/L)的去氯自來(lái)水中;鎘毒死蜱聯(lián)合組飼養(yǎng)于添加CdCl_2·2.5H_2O(含鎘0.26 mg/L)和毒死蜱(含毒死蜱14.5μg/L)的去氯自來(lái)水中。每日各組飼喂標(biāo)準(zhǔn)日糧。在試驗(yàn)的第15、30和45天,每組分別隨機(jī)取6條魚(yú)處死,迅速切除肝臟組織。觀(guān)察鯉魚(yú)肝臟組織顯微結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu),檢測(cè)氧化應(yīng)激指標(biāo)(H_2O_2、MDA和GSH含量、CAT、SOD、GPx、GST和T-AOC活性)和自噬相關(guān)基因(TOR、LC3-II、Beclin 1、Dynein、ATG12和ATG5)mRNA表達(dá)。結(jié)論如下:(1)鎘和毒死蜱單一及聯(lián)合中毒引起鯉魚(yú)肝臟形態(tài)學(xué)變化。顯微結(jié)構(gòu)變化包括肝細(xì)胞空泡化,核致密,胞質(zhì)濃縮,細(xì)胞出現(xiàn)壞死,排列凌亂,細(xì)胞間隙紅細(xì)胞滲出。超微結(jié)構(gòu)變化包括核膜融合,線(xiàn)粒體空泡化,染色質(zhì)邊集,出現(xiàn)自噬體。鎘和毒死蜱導(dǎo)致鯉魚(yú)肝臟損傷和自噬,且鎘毒死蜱聯(lián)合組肝細(xì)胞損傷程度和自噬程度強(qiáng)于鎘組和毒死蜱組,表明鎘和毒死蜱具有聯(lián)合毒性。(2)鎘和毒死蜱單一及聯(lián)合中毒增加鯉魚(yú)肝臟內(nèi)H_2O_2和MDA含量,減少GSH含量,抑制CAT、SOD、GPx、GST和T-AOC活性,導(dǎo)致鯉魚(yú)肝臟氧化應(yīng)激。鎘毒死蜱聯(lián)合組鯉魚(yú)肝臟H_2O_2和MDA含量顯著高于鎘組和毒死蜱組,GSH含量、CAT、SOD、GPx、GST和T-AOC活性顯著低于鎘組和毒死蜱組。鎘和毒死蜱單一及聯(lián)合中毒導(dǎo)致鯉魚(yú)肝臟氧化應(yīng)激,且鎘毒死蜱聯(lián)合組鯉魚(yú)肝臟氧化應(yīng)激強(qiáng)于鎘組和毒死蜱組,表明鎘和毒死蜱具有聯(lián)合毒性。此外,鎘毒死蜱聯(lián)合組中H_2O_2含量,鎘組、毒死蜱組和鎘毒死蜱聯(lián)合組中CAT活性具有時(shí)間效應(yīng)。(3)鎘和毒死蜱單一及聯(lián)合中毒抑制鯉魚(yú)肝臟內(nèi)TOR mRNA表達(dá),誘導(dǎo)LC3-II、Beclin1、Dynein、ATG12和ATG5 mRNA表達(dá),導(dǎo)致鯉魚(yú)肝臟自噬。鎘毒死蜱聯(lián)合組中鯉魚(yú)肝臟TOR的mRNA表達(dá)顯著低于鎘組和毒死蜱組,LC3-II、Beclin 1、Dynein、ATG12和ATG5mRNA表達(dá)顯著高于鎘組和毒死蜱組。鎘和毒死蜱單一及聯(lián)合中毒導(dǎo)致鯉魚(yú)肝臟自噬,且鎘毒死蜱聯(lián)合組自噬強(qiáng)于鎘組和毒死蜱組,表明鎘和毒死蜱具有聯(lián)合毒性。此外,鎘組、毒死蜱組和鎘毒死蜱聯(lián)合組TOR和ATG12 mRNA表達(dá),鎘組LC3-II mRNA表達(dá),鎘毒死蜱聯(lián)合組Beclin 1、Dynein和ATG5 mRNA表達(dá)具有時(shí)間效應(yīng)。鎘和毒死蜱單一及聯(lián)合中毒通過(guò)氧化應(yīng)激導(dǎo)致鯉魚(yú)肝臟自噬,且鎘和毒死蜱具有聯(lián)合毒性。
【學(xué)位單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類(lèi)】：X503.225
【部分圖文】：

3 結(jié)果與分析3.1 鯉魚(yú)肝臟組織的顯微結(jié)構(gòu)觀(guān)察如圖 3-1A-D 所示為鯉魚(yú)肝臟組織第 30 天的顯微結(jié)構(gòu)。對(duì)照組（圖 3-1A）肝細(xì)胞（hp）正常，細(xì)胞界限明顯，細(xì)胞由中央靜脈（cv）向外發(fā)散，排列正常。鎘組（圖 3-1B）肝細(xì)胞部分空泡化（vd），細(xì)胞排列凌亂。毒死蜱組（圖 3-1C）肝細(xì)胞部分空泡化，細(xì)胞排列凌亂，細(xì)胞界限不明顯。鎘毒死蜱聯(lián)合組（圖 3-1D1）肝細(xì)胞大量空泡化，核致密（nd）明顯，胞質(zhì)濃縮（cc），出現(xiàn)部分壞死（ne），細(xì)胞排列凌亂，肝細(xì)胞間隙紅細(xì)胞滲出（bc）。鎘毒死蜱聯(lián)合組（圖 3-1D2）和（圖 3-1D3）肝細(xì)胞大量空泡化，出現(xiàn)大量壞死細(xì)胞。

核膜進(jìn)一步融合，染色質(zhì)邊集加重，線(xiàn)粒體大量空泡化，自噬泡數(shù)量明顯增多。鎘毒死蜱聯(lián)合組（圖3-2D2）和（圖 3-2D3）能夠觀(guān)察到清晰明顯的自噬體，且數(shù)量較其余三組明顯增加。

死蜱組（P < 0.05）；所有時(shí)間點(diǎn)中，鎘組中 SOD 活性顯著高于毒死蜱組（P < 0.05）；對(duì)照組中 GSH 含量、CAT、SOD、GPx、GST 和 T-AOC 活性顯著高于鎘組、毒死蜱組和鎘毒死蜱聯(lián)合組（P < 0.05）；鎘組和毒死蜱組中的 GSH 含量、CAT、SOD、GPx、GST 和T-AOC 活性顯著高于鎘毒死蜱聯(lián)合組（P < 0.05）。鎘組和毒死蜱組在 45 天的 GSH 含量顯著低于 15 天和 30 天（P < 0.05）。鎘毒死蜱聯(lián)合組中的 45 天和 30 天的 GSH 含量顯著低于 15 天（P < 0.05）。鎘組、毒死蜱組和鎘毒死蜱聯(lián)合組中的 CAT 和 GPx 活性隨時(shí)間的增加而顯著降低（P < 0.05），具有時(shí)間效應(yīng)，除GPx 鎘毒死蜱聯(lián)合組。毒死蜱組在 30 天和 45 天的 SOD 活性顯著低于 15 天（P < 0.05）。鎘毒死蜱聯(lián)合組在 30 天和 45 天的 GST 活性顯著低于 15 天（P < 0.05）。毒死蜱組在 15天和 45 天的 T-AOC 活性顯著高于 30 天（P < 0.05）。
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2884583