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三聚甲醛降解菌的篩選鑒定及其對聚甲醛廢水的生物強化研究

發(fā)布時間:2020-07-26 10:58
【摘要】:聚甲醛(Polyoxymethylene,簡稱POM)一種綜合性能優(yōu)異的熱塑性工程塑料,廣泛應用于汽車、醫(yī)療器械、農業(yè)機械和軍工等行業(yè),而其生產產生的聚甲醛廢水含大量甲醛、三聚甲醛(s-Trioxane,簡稱TOX)等有毒物質,是典型的高致癌,致畸、難降解有機工業(yè)廢水,對環(huán)境危害極大。針對聚甲醛廢水的處理常用的工藝有Fenton法、石灰預處理法、鐵碳微電解法、和電絮凝等,而生物法由于工藝成熟、處理效果較好、運行費用低、運營管理方便使其備受青睞。但甲醛、TOX等對微生物的抑制作用,增加了生物法處理聚甲醛廢水的難度。投加對目標污染物如甲醛、TOX有代謝作用的菌群的生物強化法,使通過生物法實現聚甲醛廢水的有效處理可行。從某煤化工企業(yè)聚甲醛污水廠調節(jié)池底泥中分離出一株能以TOX為單一碳源微生物Q1,通過形態(tài)學和分子生物學鑒定,確定其為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌(Bacillus methylotrophicus)。對B.methylotrophicus的TOX降解特性研究表明,維持搖床轉速為180r/min,該菌株降解TOX最適p H為7,最適溫度為30℃;在考察NaCl對B.methylotrophicus代謝TOX的影響中,當NaCl濃度為1%~3%時,菌株TOX降解率在64.8%以上,當NaCl濃度提升至4%和5%時,降解率驟降至32.7%和7.1%,對TOX的代謝受明顯抑制;B.methylotrophicus對不同濃度TOX的降解實驗發(fā)現,TOX濃度為100~400mg/L時,24h內菌株便可對其實現快速降解,且降解率均在92.7%以上,但隨著底物濃度的逐步提高,降解率驟降,當濃度提升至1600mg/L時,菌株64h內對其降解率趨近于0,表明此時已達到B.methylotrophicus的耐受上限。利用B.methylotrophicus與甲醛代謝復合菌Js復配對聚甲醛廢水降解研究發(fā)現,B.methylotrophicus與Js按2:1為最優(yōu)復配組合,記為FB,該組各項綜合指標效果較其他組合更優(yōu),且COD去除率最高?捎糜诤罄m(xù)生物強化中試實驗研究。利用復合菌劑FB對某聚甲醛污水廠好氧段進行中試模擬生物強化研究。當進水甲醛、TOX、COD濃度分別為170~250mg/L、140~240mg/L、1000~1600mg/L時,系統最終出水甲醛、TOX、COD濃度分別低于4mg/L、10mg/L、120mg/L,降解率分別達97.8%、94.2%、92.6%以上,相比同期污水廠除對甲醛的去除效果相差不大外,其TOX和COD去除能力分別提高了9和4倍以上,且面對負荷沖擊時,強化系統表現出了更優(yōu)越的穩(wěn)定性。采用PCR-TGGE技術對活性污泥群落結構進行研究表明,原活性污泥中并未存在菌株B.methylotrophicus,經強化后B.methylotrophicus穩(wěn)定根殖于系統中并始終成為優(yōu)勢菌,從而使系統獲得了良好的TOX降解能力,即使受負荷沖擊其去除TOX所需的主導地位仍未受影響。同時B.methylotrophicus與多株優(yōu)勢菌如變形桿菌屬(Proteobacterium sp.)、惡臭假單胞菌(Pseudomonsa putida)、紅假單胞菌屬(Rhodopseudomonas sp.)等存在著協同或拮抗關系,結合Shannon-wiener指數變化表明B.methylotrophicus在維持該系統微生物群落結構和多樣性的穩(wěn)定處于核心地位,從而使系統維持著對聚甲醛廢水中甲醛、TOX、COD的高效去除能力。
【學位授予單位】:重慶大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:X172;X783.2
【圖文】:

形態(tài)圖,菌株,菌落形態(tài),光學顯微鏡


重慶大學碩士學位論文 2 TOX 降解菌的分離2.2 結果與討論2.2.1 TOX 降解菌的分離經底泥不斷擴培,馴化篩選,最終于 TOX 為單一碳源的固體無機鹽培養(yǎng)得到一株長勢良好,能以 TOX 作為單一碳源的菌株,記為 Q1;將所得菌株劃線純化并于-20℃甘油管保種以用于展開后續(xù)實驗研究2.2.2 菌株鑒定①形態(tài)學鑒定將所得純菌株 Q1 于 LB 固體培養(yǎng)基上劃線得到單菌落(圖 2.1A)。由圖可該菌株菌落為乳白色,圓形,整體呈扁平狀,邊緣齊整光滑,中間干燥凹陷火山口狀;10×100 倍顯微鏡下時,可觀察到菌株 Q1 呈短桿狀(圖 2.1B),初步判斷其為桿菌。

照片,革蘭氏染色,菌株,照片


圖 2.2 菌株 Q1 革蘭氏染色照片 10×100 倍Fig. 2.2 Gram staining of Q1鑒定行 16S rDNA 的基因鑒定,結果表明:菌株 同源性達到了 98%以上,其中甲基營養(yǎng)型芽步鑒定 Q1 為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌,英該菌株測序結果如下:AGCGGACAGATGGGAGCTTGCTCCCTGACACGTGGGTAACCTGCCTGTAAGACTGGATACCGGATGGTTGTTTGAACCGCATGGCTACCACTTACAGATGGACCCGCGGCGCCTCACCAAGGCGACGATGCGTAGCCGAGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCA

工藝流程圖,聚甲醛,污水廠,工藝流程圖


圖 4.1 聚甲醛污水廠工藝流程圖Fig. 4.1 Process of POM wastewater treatment plant該污水廠目前厭氧段運行狀況良好,原水 COD 為 5000~6000mg/L,甲醛300~500mg/L,TOX300~350mg/L;經厭氧段工藝處理,其 COD、甲醛和 TOX 去除率均可達 65%以上,厭氧段出水 COD、甲醛、TOX 分別為 1500~2000mg/L、120~160mg/L、110~140mg/L,但經好氧段工藝處理,其出水 COD、甲醛、TOX分別高達 800~1200mg/L、30~50mg/L、100~120mg/L,COD 去除率極低,且 TOX幾乎不降解;與此同時系統好氧段常伴有污泥膨脹現象出現,沉降性差,且污泥流失嚴重,導致污泥濃度較低(2500mg/L 左右),目前 SV30僅為 5%,污泥活性極差。因此此次中試裝置模擬該污水廠好氧段(如圖 4.1),設計并建立中試連續(xù)流三級好氧反應器,并以復合菌劑外投進行生物強化,以期實現模擬好氧段活性污泥生物相恢復,為后續(xù)現場擴大化生物強化工程實踐提供依據。②反應器的設計此次中試模擬采用鋼筋混凝土罐作為連續(xù)流反應器,其簡圖如 4.2,其中各反

【參考文獻】

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本文編號:2770671

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