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重金屬和農(nóng)藥脅迫對(duì)斑馬魚(yú)心電的影響研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-05 04:20
【摘要】:水環(huán)境作為人們賴以生存的環(huán)境,其污染問(wèn)題已經(jīng)不容忽視,并且已引起當(dāng)今世界的關(guān)注及重視。近年來(lái)水體中各種污染物逐漸增加,如除草劑、殺蟲(chóng)劑等有機(jī)農(nóng)藥毒物,以及一些鎘、鉛、銅、鉈、汞等重金屬類的化合物。這些污染物通過(guò)水途徑的傳播,并通過(guò)食物鏈發(fā)生富集,對(duì)生物體的內(nèi)臟、腸道、腦部、鰓部及生殖系統(tǒng)等造成損害,干擾內(nèi)分泌系統(tǒng),影響正常代謝及生理機(jī)能。由于水生生物對(duì)于水環(huán)境變化有著自身的感知反應(yīng),因此國(guó)內(nèi)外對(duì)生物水質(zhì)監(jiān)測(cè)法的使用越來(lái)越多。魚(yú)類的心電能反映出在接觸各種化學(xué)污染物后對(duì)自身所產(chǎn)生的毒性作用。以模式生物斑馬魚(yú)為受試生物,研究水環(huán)境中在不同污染物脅迫下斑馬魚(yú)心電參數(shù)的變化,探討環(huán)境污染物對(duì)斑馬魚(yú)心電的影響。本研究對(duì)斑馬魚(yú)心電采集方法從多方面進(jìn)行考慮及試驗(yàn),反復(fù)改進(jìn)不足之處,研究出對(duì)斑馬魚(yú)傷害最小、最方便操作、最有效的心電采集技術(shù)。本技術(shù)以直徑0.25mm的銀質(zhì)針做采集電極,將正負(fù)電極分別位于斑馬魚(yú)心臟左右兩側(cè),兩電極皆埋入圍心腔內(nèi),接地電極埋入斑馬魚(yú)的兩腹鰭中間(泄殖孔附近),將采集到的心電信號(hào)進(jìn)行去噪濾波處理,以獲取到最清晰的ECG信號(hào)。本研究主要分析了重金屬污染物硫酸銅(CuSO_4)和有機(jī)農(nóng)藥類污染物溴氰菊酯(DM)、阿特拉津(ATZ)脅迫下斑馬魚(yú)心電圖ECG參數(shù)的變化。根據(jù)污染物對(duì)斑馬魚(yú)的毒性濃度,將每個(gè)研究實(shí)驗(yàn)設(shè)定為4個(gè)組,即1個(gè)空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)組和3個(gè)污染物暴露實(shí)驗(yàn)組;3個(gè)暴露組分別為0.1TU組、0.5TU組和地表水標(biāo)準(zhǔn)濃度組,其中地表水標(biāo)準(zhǔn)濃度組是根據(jù)國(guó)家地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)濃度(GB3838-2002)所設(shè)定的。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組設(shè)定7個(gè)心電采樣時(shí)間點(diǎn)(0h,2h,4h,8h,16h,32h,48h),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)采集3條斑馬魚(yú)的ECG信號(hào),每組實(shí)驗(yàn)均設(shè)置3個(gè)平行實(shí)驗(yàn)。通過(guò)分析污染物脅迫下斑馬魚(yú)ECG參數(shù)的變化,以說(shuō)明不同ECG參數(shù)在環(huán)境脅迫壓力評(píng)估中的重要性。通過(guò)在重金屬類污染物的暴露(CuSO_4)以及農(nóng)藥類污染物的暴露(DM、ATZ)下,將兩類污染物對(duì)于斑馬魚(yú)ECG的參數(shù)(P波、R波、T波及PR間期、QRS間期、QT間期)以及心率的影響進(jìn)行分析,結(jié)果表明污染物對(duì)ECG和心率都具有一定的抑制作用,導(dǎo)致斑馬魚(yú)的心率降低,心電波的振幅減弱,心電間期延長(zhǎng),并且還具有一定的劑量效應(yīng)和時(shí)間效應(yīng)。通過(guò)不同的統(tǒng)計(jì)分析方法,將能夠評(píng)價(jià)水體的污染的相關(guān)性最好且有效合理的評(píng)估參數(shù)進(jìn)行了篩選和提取。最終獲得QRS間期和QT間期分別與CuSO_4脅迫和DM、ATZ脅迫SOM模式圖最相似并且顯著相關(guān)性最好的ECG參數(shù),它們結(jié)合得到的線性回歸方程擬合度最高模型最好。研究結(jié)果表明,斑馬魚(yú)QRS波群間期將是監(jiān)測(cè)水生環(huán)境中Cu~(2+)污染的有效指標(biāo),QT間期可以作為監(jiān)測(cè)水體環(huán)境中DM、ATZ污染的有效ECG參數(shù)。
【學(xué)位授予單位】:山東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:X503.225
【圖文】:

斑馬魚(yú)


圖 1-1 成年健康的斑馬魚(yú)Fig.1-1 Adult healthy zebrafish (Danio Rerio)型的熱帶觀賞魚(yú),如圖 1-1 所示。斑馬魚(yú)一般體1]。魚(yú)類的抗氧化防御系統(tǒng)對(duì)環(huán)境變化十分敏感,在我國(guó)有二百多個(gè)實(shí)驗(yàn)室將斑馬魚(yú)作為受試生物泛應(yīng)用于生理發(fā)育研究的脊椎動(dòng)物。斑馬魚(yú)的繁透明,容易觀察,生長(zhǎng)發(fā)育也很迅速,器官形成進(jìn)行研究,已被用作生物模型[54]。斑馬魚(yú)的心臟相似性[55-56];此外,它的基因與人類高度同源,魚(yú)的心臟中也同樣發(fā)揮了作用[51]。斑馬魚(yú)在細(xì)胞的研究,利用其開(kāi)發(fā)心血管藥物或藥物篩選等,

斑馬魚(yú),心電信號(hào),雙電極


第二章 心電采集技術(shù)的改進(jìn) 集技術(shù)的發(fā)展也是經(jīng)過(guò)很多實(shí)驗(yàn)實(shí)踐而來(lái)的。水生動(dòng)物時(shí)會(huì)產(chǎn)生不正常的行為活動(dòng),并且它們的心電信號(hào)也發(fā)物的心電信號(hào)的方法有很多,大多數(shù)方法是采用雙電極表進(jìn)行收集心電信號(hào),還有的研究者將參考電極置于水集信號(hào)等。由于魚(yú)體較小,心臟跳動(dòng)產(chǎn)生的電位也相對(duì)采用雙電極法埋入圍心腔來(lái)收集心電信號(hào)。由于水生生因此關(guān)于心電信號(hào)的采集方法也固然具有研究的意義。

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