【摘要】：隨著經(jīng)濟(jì)的迅速發(fā)展,重金屬和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)藥物對(duì)水體造成了極大的危害。重金屬不需要耗能就可以被有機(jī)體攝入,重金屬進(jìn)入生物體后不會(huì)被排出體外,有機(jī)體會(huì)顯現(xiàn)出毒性累積的效應(yīng)。擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)藥物與有機(jī)磷、有機(jī)氯和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥相比,具有高效、低毒、低殘留、易降解等特點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于害蟲(chóng)防治及糧食貯藏等。溴氰菊酯是菊酯類(lèi)藥物中毒性最強(qiáng)的一種,在水生生物魚(yú)的體內(nèi)缺乏擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥的水解酶系統(tǒng),因此溴氰菊酯不能在魚(yú)體內(nèi)被水解。乙酰膽堿酯酶(AChE)在神經(jīng)傳導(dǎo)過(guò)程中有著關(guān)鍵的作用,且AChE活性作為生物標(biāo)志物在水污染監(jiān)測(cè)中已被廣泛應(yīng)用。當(dāng)外界環(huán)境對(duì)有機(jī)體的生存產(chǎn)生危害時(shí),生物的行為會(huì)發(fā)生改變,乙酰膽堿酯酶的變化和生物的行為之間可能存在著某種對(duì)應(yīng)的關(guān)系。此外,膽堿能受體在整個(gè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)中存在著差異性表達(dá)。本文分別測(cè)定了氯化鎘和溴氰菊酯對(duì)受試生物斑馬魚(yú)的48h半數(shù)致死濃度,并以此作為一個(gè)毒性單位,即1.0 TU,以對(duì)兩種污染物對(duì)斑馬魚(yú)產(chǎn)生的毒性效應(yīng)進(jìn)行統(tǒng)一。設(shè)置濃度梯度,連續(xù)藥物暴露下檢測(cè)了氯化鎘和溴氰菊酯對(duì)斑馬魚(yú)肝臟AChE變化的影響。對(duì)不同組織(肌肉、肝臟、鰓、和腦)中AChE受抑制的時(shí)間差異進(jìn)行了相關(guān)的分析,對(duì)污染物暴露下毒蕈堿受體(M3a受體)表達(dá)量的變化進(jìn)行了研究,旨在從多方面對(duì)斑馬魚(yú)外在行為響應(yīng)的內(nèi)在作用機(jī)制進(jìn)行多方面合理的解釋,研究結(jié)果表明:(1)CdCl_2和DM對(duì)斑馬魚(yú)的48 h半數(shù)致死濃度(LC_(50)-48h)分別為42.60 mg/L和5.20μg/L,DM對(duì)斑馬魚(yú)是劇毒類(lèi)藥物,CdCl_2對(duì)斑馬魚(yú)來(lái)說(shuō)是高毒類(lèi)藥物,由此可以看出不同污染物對(duì)斑馬魚(yú)的毒性效應(yīng)有所不同。斑馬魚(yú)在CdCl_2和DM環(huán)境中的耐受程度也有所差異,這可能是由作用機(jī)制不同而導(dǎo)致的。(2)各濃度組DM、CdCl_2,48 h各濃度組連續(xù)暴露下,肝臟AChE活性整體呈現(xiàn)出control0.1 TU1.0 TU2.0 TU的變化,實(shí)驗(yàn)組肝臟的AChE活性相對(duì)于對(duì)照組均存在極顯著的差異,顯示了良好的劑量--效應(yīng)關(guān)系。在48 h,DM連續(xù)暴露下,1.0 TU和2.0 TU組肝臟AChE活性都于0.5 h處迅速下降,說(shuō)明了DM在暴露開(kāi)始階段就對(duì)斑馬魚(yú)產(chǎn)生了毒性效應(yīng)。1 h后不同濃度組開(kāi)始有了不同的變化。0.1 TU和2.0 TU組肝臟的AChE在DM暴露4 h后出現(xiàn)了極值點(diǎn),隨后出現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì),1.0 TU濃度組的相對(duì)酶活極值點(diǎn)于暴露后8 h左右出現(xiàn)。在CdCl_2,48h連續(xù)暴露下,0.1 TU、1.0 TU和2.0 TU組肝臟AChE酶活都在1 h內(nèi)迅速下降且在1 h左右出現(xiàn)了下降再上升的拐點(diǎn),說(shuō)明了CdCl_2在暴露早期階段就對(duì)斑馬魚(yú)產(chǎn)生了毒性效應(yīng)。1 h后開(kāi)始有了不同的變化,0.1 TU在暴露8h左右上升到一個(gè)極值點(diǎn)而1.0 TU和2.0 TU的極值點(diǎn)則出現(xiàn)在2 h左右。這可能是由于在外界環(huán)境對(duì)斑馬魚(yú)產(chǎn)生毒性效應(yīng)時(shí),生物體為適應(yīng)脅迫所作出的調(diào)整和適應(yīng)。兩種藥物暴露下,斑馬魚(yú)肝臟AChE活性的變化總體都呈現(xiàn)出大致的下降-上升-再下降的趨勢(shì),這與SBRM是吻合的。(3)在DM暴露下,肝臟和肌肉的AChE較晚受到抑制。斑馬魚(yú)不同組織AChE受抑制的時(shí)間差異性在0.1 TU組中表明:在CdCl_2和DM暴露下,腦組織AChE首先被藥物抑制,其次是鰓,肌肉和肝臟(腦鰓肌肉肝臟),高濃度組(1.0 TU、2.0 TU)中斑馬魚(yú)不同組織AChE活性的抑制順序幾乎同步,同時(shí),較高的環(huán)境壓力會(huì)引起更快的AChE活性受到抑制。(4)在所有時(shí)間點(diǎn)中,腦組織M3a的相對(duì)表達(dá)量都最高,鰓組織M3a的相對(duì)表達(dá)量都最低。在0.1 TU-DM暴露下,有5個(gè)時(shí)間點(diǎn)M3a的相對(duì)表達(dá)量順序依次為腦肌肉肝臟鰓,肌肉比肝臟M3a的相對(duì)表達(dá)量高;有11個(gè)時(shí)間點(diǎn)M3a的相對(duì)表達(dá)量順序?yàn)槟X肝臟肌肉鰓,肝臟比肌肉M3a的相對(duì)表達(dá)量高;在10%地表水-DM暴露下,有7個(gè)時(shí)間點(diǎn)M3a的相對(duì)表達(dá)量順序依次為腦肌肉肝臟鰓,肌肉比肝臟M3a的相對(duì)表達(dá)量高;有9個(gè)時(shí)間點(diǎn)M3a的相對(duì)表達(dá)量順序?yàn)槟X肝臟肌肉鰓,肝臟比肌肉M3a的相對(duì)表達(dá)量高。
【圖文】：

山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文嚴(yán)重。劉曉宇等人[45]發(fā)現(xiàn)不僅不同藥物對(duì)鯽魚(yú) AChE 的影響不hE 的活性也不相同。受體中主要包括囊泡狀乙酰膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體、乙酰膽堿、高親和力膽堿膽堿、膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶、煙堿型乙酰膽堿受體和膽堿能受體等神經(jīng)遞質(zhì)，廣泛分布于動(dòng)物的外周神經(jīng)系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、統(tǒng)等。膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶以膽堿和乙酰輔酶 A 為底物合成乙酰膽會(huì)通過(guò)乙酰膽堿酯酶水解成乙酸和膽堿，，保證神經(jīng)沖動(dòng)正常傳

圖 1-2 成年斑馬魚(yú)（左上角為雌性，右下角為雄性）1-2 Adult zebra fish (Top left corner is female, lower right corner is 養(yǎng)條件由武漢中國(guó)斑馬魚(yú)資源中心提供，實(shí)驗(yàn)室斑馬魚(yú)養(yǎng)殖系統(tǒng)由實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng) 3 代以上，溫度設(shè)定在 26 ± 2℃，光照設(shè)定璃缸上方約 30 cm 處設(shè)定 3000--4500 lx 照明，于每天上魚(yú)代謝產(chǎn)物及排泄物每天兩次定期清理。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中隨喂食。成年斑馬魚(yú)的體重為 0.30±0.05 g，長(zhǎng)度為隨機(jī)
【學(xué)位授予單位】：山東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：X171.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2670805