本文關(guān)鍵詞：裙帶菜中巖藻黃質(zhì)、巖藻多糖的綜合提取純化研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：裙帶菜屬于褐藻門翅藻科植物,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,可藥食同用,是海洋主要經(jīng)濟(jì)藻類之一,在我國(guó)資源十分豐富。巖藻黃質(zhì)屬于類胡蘿卜素中的葉黃素類脂溶性色素,巖藻多糖是一種含巖藻糖的硫酸酯雜多糖,二者都具有多樣的生理功能,都是裙帶菜中極其重要的生物活性物質(zhì),具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。目前國(guó)內(nèi)對(duì)裙帶菜的研究不多,主要集中于其蛋白質(zhì)、纖維素等營(yíng)養(yǎng)成分開發(fā)利用方面,對(duì)巖藻黃質(zhì)、巖藻多糖的提取利用涉及相對(duì)較少。 本論文對(duì)產(chǎn)自浙江舟山群島地區(qū)的裙帶菜進(jìn)行了研究,試圖對(duì)其重要活性成分巖藻黃質(zhì)、巖藻多糖等進(jìn)行綜合提取利用,并對(duì)藻類物質(zhì)所固有的砷含量極高的問題進(jìn)行了脫砷方法摸索,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 建立巖藻黃質(zhì)和巖藻多糖中巖藻糖含量的HPLC檢測(cè)方法,通過色譜峰分離度、標(biāo)準(zhǔn)曲線、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性、加樣回收實(shí)驗(yàn)等多方面綜合考察,顯示兩種檢測(cè)方法中各分析組分均可達(dá)到良好的基線分離,峰形勻稱,無干擾,專屬性好,結(jié)果穩(wěn)定,準(zhǔn)確度高。同時(shí),該檢測(cè)方法也可為當(dāng)前良莠不齊的市場(chǎng)產(chǎn)品質(zhì)量提供參考性檢測(cè)依據(jù)和標(biāo)準(zhǔn)。 從裙帶菜中提取分離巖藻黃質(zhì),分析單因素實(shí)驗(yàn)因素,并通過正交試驗(yàn)對(duì)提取條件進(jìn)行優(yōu)化。最終確定預(yù)處理后的裙帶菜原料,加入12倍的提取溶液,95%丙酮浸提2.5h,提取三次,效果較好。提取后的浸提液經(jīng)超濾除渣,用硅膠柱層析做進(jìn)一步的分離純化,最終巖藻黃質(zhì)產(chǎn)品純度可由原來的2.31%提取到24.2%,回收率達(dá)90.9%。 從裙帶菜中提取分離巖藻多糖,分析單因素實(shí)驗(yàn)因素,同樣以正交試驗(yàn)進(jìn)行提取條件的優(yōu)化。最終確定預(yù)處理后的裙帶菜原料,加入10倍量的pH2.0提取溶液,95℃水浴浸提2.5h,三次,效果較好。巖藻多糖去蛋白方法以酶解法效果較好；脫色方法綜合考慮,采用AB-8大孔樹脂吸附較好。進(jìn)一步純化可采用乙醇分級(jí)醇沉、DEAE-Cellulose柱層析純化等方式。 比較常溫(檸檬酸)水浸泡對(duì)裙帶菜原料中重金屬砷含量的去除效果,最終確定以pH3.0檸檬酸水浸泡過夜(約10h),中間更換溶劑3次,即每浸泡3h更換檸檬酸水1次,原料中砷含量可由處理前128.6ppm降到9.2ppm,去除率達(dá)92.8%。效果顯著,操作方式也極其簡(jiǎn)單。 LSA-AS螯合樹脂對(duì)檸檬酸水預(yù)處理后的裙帶菜浸提液進(jìn)行進(jìn)一步除砷處理,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示LSA-AS樹脂可將巖藻黃質(zhì)浸取物由上柱前的6.8ppm降低到0.7ppm,砷去除率為89.7%；同樣,對(duì)于巖藻多糖萃取物,砷含量由7.3ppm降低到0.9ppm,除砷率為87.7%。經(jīng)由檸檬酸水常溫浸泡預(yù)處理和LSA-AS螯合樹脂后處理,兩道脫砷工序結(jié)合,冷凍干燥,終產(chǎn)品巖藻黃質(zhì)0.7ppm和巖藻多糖0.9ppm的砷含量也完全符合《中國(guó)藥典》和市場(chǎng)對(duì)這兩個(gè)產(chǎn)品的質(zhì)控要求。 整合巖藻黃質(zhì)、巖藻多糖兩個(gè)成分的提取純化路線及脫砷工藝,確定裙帶菜主要活性成分綜合提取利用的最終工藝流程,即裙帶菜水洗去鹽漬后,pH3.0檸檬酸水浸泡過夜,加入10倍量的pH2.0酸水溶液,95℃水浴浸提2.5h,三次,分別收集濾液和濾渣；濾液部分分別經(jīng)過酶解去蛋白、AB-8樹脂脫色、LSA-AS樹脂脫砷、乙醇分級(jí)醇沉、DEAE-Cellulose柱層析純化等方式,制備巖藻多糖；而濾渣經(jīng)陰干后,加入12倍的丙酮溶液浸提2.5h,提取兩次,LSA-AS樹脂脫砷、硅膠柱層析純化等工藝,可同時(shí)制備巖藻黃質(zhì)。 進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),巖藻黃質(zhì)提取率為0.074%,巖藻多糖為3.94%,每100g裙帶菜可提取巖藻黃質(zhì)0.30g,HPLC含量為24.6%,砷含量為0.7ppm。同時(shí),每100g裙帶菜可提取巖藻粗多糖4.48g,其中總多糖含量為87.5%,有機(jī)硫酸根18.9%,巖藻糖20.7%,蛋白質(zhì)2.9%,砷含量為0.9ppm。本文工藝所得巖藻黃質(zhì)和巖藻多糖各項(xiàng)指標(biāo)均可達(dá)到市場(chǎng)要求。
【關(guān)鍵詞】：裙帶菜 巖藻黃質(zhì) 巖藻多糖 巖藻糖 柱層析 LSA-AS 螯合樹脂
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：TQ461
【目錄】：

• 目次5-7
• 致謝7-8
• 摘要8-10
• Abstract10-12
• 1 文獻(xiàn)綜述12-28
• 1.1 裙帶菜的植物來源12-13
• 1.2 裙帶菜中含有的主要活性成份13-24
• 1.3 裙帶菜中砷存在的問題24-25
• 1.4 裙帶菜的栽培種植分布與前景25-26
• 1.5 本課題的研究意義與思路26-28
• 2 巖藻黃質(zhì)與巖藻多糖檢測(cè)方法的建立28-37
• 2.1 高效液相色譜法測(cè)定巖藻黃質(zhì)的含量28-31
• 2.2 苯酚-硫酸法測(cè)定巖藻多糖的總含量31-32
• 2.3 高效液相色譜法測(cè)定巖藻糖的含量32-34
• 2.4 有機(jī)硫酸根的測(cè)定34-35
• 2.5 蛋白質(zhì)測(cè)定方法35-36
• 2.6 本章小結(jié)36-37
• 3 巖藻黃質(zhì)的提取分離純化37-46
• 3.1 儀器、材料與試劑37
• 3.2 巖藻黃質(zhì)提取實(shí)驗(yàn)方法與分析37-41
• 3.3 硅膠柱層析法純化巖藻黃質(zhì)41-44
• 3.4 本章小結(jié)44-46
• 4 巖藻多糖的提取分離純化46-56
• 4.1 儀器、材料與試劑46-47
• 4.2 巖藻多糖提取實(shí)驗(yàn)方法與分析47-51
• 4.3 巖藻多糖純化實(shí)驗(yàn)方法與分析51-55
• 4.4 本章小結(jié)55-56
• 5 脫砷工藝探索56-64
• 5.1 儀器、材料與試劑56
• 5.2 重金屬砷的檢測(cè)方法56-57
• 5.3 目前幾種常用的海藻重金屬脫除方法57-58
• 5.4 常溫浸泡除砷實(shí)驗(yàn)58-60
• 5.5 螯合樹脂除砷實(shí)驗(yàn)60-62
• 5.6 本章小結(jié)62-64
• 6 裙帶菜中巖藻黃質(zhì)與巖藻多糖的綜合提取純化工藝64-66
• 7 結(jié)論66-68
• 參考文獻(xiàn)68-74
• 附錄Ⅰ 市場(chǎng)巖藻黃質(zhì)5%產(chǎn)品規(guī)格單74-75
• 附錄Ⅱ 市場(chǎng)巖藻多糖85%產(chǎn)品規(guī)格單75-76
• 作者簡(jiǎn)歷76

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：裙帶菜中巖藻黃質(zhì)、巖藻多糖的綜合提取純化研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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