黑木耳多糖分離純化及其對(duì)大豆分離蛋白糖基化的研究
本文關(guān)鍵詞:黑木耳多糖分離純化及其對(duì)大豆分離蛋白糖基化的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:本研究以黑木耳(Auricularia auricular)為試驗(yàn)原料,采用亞臨界水萃取法提取黑木耳多糖,通過(guò)響應(yīng)面法優(yōu)化提取工藝條件,并分析三氯乙酸法、酶解法、sevage法和AB-8樹(shù)脂法等脫除黑木耳多糖中蛋白質(zhì)的效果,得到脫蛋白的最佳工藝條件,在此基礎(chǔ)上,利用黑木耳多糖和大豆分離蛋白進(jìn)行復(fù)合,優(yōu)化糖基化反應(yīng)條件,并初步探討了黑木耳多糖-大豆分離蛋白復(fù)合物的功能特性,為黑木耳多糖的綜合利用及工業(yè)化生產(chǎn)提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.根據(jù)Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,在單因素的試驗(yàn)基礎(chǔ)上采用響應(yīng)面分析法優(yōu)化工藝條件,得到亞臨界水萃取法提取木耳多糖的最佳工藝條件為:提取溫度152.31℃,提取時(shí)間26.07 min,料液比130.79:1mL/g,提取壓力1.0 MPa,此時(shí)得到的木耳多糖提取率為24.51%。同時(shí),將優(yōu)化的亞臨界水萃取法與傳統(tǒng)的水浸提法、酶提取法、微波和超聲波輔助法進(jìn)行比較,結(jié)果表明黑木耳多糖的提取率較高,提取時(shí)間短,并且綠色環(huán)保,適合工業(yè)化生產(chǎn)以及應(yīng)用在食品藥物中。2.為了得到黑木耳多糖的最佳脫蛋白工藝,用三氯乙酸法、sevage法、酶解法、酶解-sevage法、等電點(diǎn)法、酶解-等電點(diǎn)法和AB-8樹(shù)脂等7種方法處理黑木耳多糖,其蛋白脫除率分別為76.85%、72.17%、72.42%、76.48%、50.71%、62.24%和78.37%,其中AB-8樹(shù)脂對(duì)蛋白質(zhì)的脫除效果最好,通過(guò)響應(yīng)面法對(duì)其進(jìn)行工藝優(yōu)化,結(jié)果表明:上樣濃度為2.07mg/n (?)L、吸附時(shí)間為2.06h、固液比為1:4.87時(shí)蛋白脫除率最高,為81.00%,此時(shí)多糖回收率為83.13%;并分析比較了脫除蛋白質(zhì)前后黑木耳多糖的體外抗氧化性,發(fā)現(xiàn)黑木耳多糖脫蛋白后其體外抗氧化活性有所增加,羥基自由基清除率提高32.36%,DPPH清除率最高為脫蛋白前的1.12倍,而還原能力為脫蛋白前的1.89倍。3.采用Box-Behnken模型優(yōu)化黑木耳多糖-大豆蛋白復(fù)合物的制備工藝,優(yōu)化后的工藝參數(shù)為:料液比40:1(m:V)、pH 9.21、溫度92.88℃、糖與蛋白質(zhì)量比4.18:1。并分析比較了黑木耳多糖-大豆蛋白復(fù)合物和普通大豆蛋白的功能特性,結(jié)果表明黑木耳多糖-大豆蛋白復(fù)合物的乳化活性、乳化穩(wěn)定性增加,與大豆蛋白相比分別增加10.75倍和6.15倍,同時(shí)黑木耳多糖-大豆蛋白復(fù)合物的溶解度在pH 2-10范圍內(nèi)溶解度顯著高于大豆蛋白,且熱穩(wěn)定性提高了9.24倍。黑木耳多糖與大豆蛋白復(fù)合后顯著改善了蛋白質(zhì)的功能特性,為黑木耳多糖廣泛的工業(yè)化應(yīng)用奠定了理論基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】:黑木耳 多糖 亞臨界水 脫蛋白 糖基化
【學(xué)位授予單位】:東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:TS219;TQ281
【目錄】:
- 摘要3-4
- Abstract4-9
- 1 緒論9-15
- 1.1 黑木耳多糖的簡(jiǎn)介9-10
- 1.1.1 多糖簡(jiǎn)介9
- 1.1.2 黑木耳多糖的生理功能9-10
- 1.2 多糖提取純化方法的研究進(jìn)展10-13
- 1.2.1 傳統(tǒng)提取方法10-12
- 1.2.2 亞臨界水萃取法12
- 1.2.3 多糖脫蛋白方法的研究進(jìn)展12-13
- 1.3 蛋白質(zhì)糖基化研究進(jìn)展13-14
- 1.4 本研究的目的意義14-15
- 2 黑木耳多糖的亞臨界水萃取工藝研究15-25
- 2.1 材料與方法15-16
- 2.1.1 試驗(yàn)原料15
- 2.1.2 試驗(yàn)試劑15
- 2.1.3 試驗(yàn)儀器15
- 2.1.4 黑木耳多糖的提取工藝流程15
- 2.1.5 多糖含量的測(cè)定15
- 2.1.6 多糖提取率的計(jì)算15-16
- 2.1.7 單因素試驗(yàn)16
- 2.1.8 響應(yīng)面分析試驗(yàn)16
- 2.2 結(jié)果與分析16-23
- 2.2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立16-17
- 2.2.2 液料比對(duì)多糖提取率的影響17-18
- 2.2.3 溫度對(duì)多糖提取率的影響18
- 2.2.4 時(shí)間對(duì)多糖提取率的影響18-19
- 2.2.5 壓力對(duì)多糖提取率的影響19-20
- 2.2.6 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果與分析20-22
- 2.2.7 亞臨界水萃取法與不同提取方法對(duì)比試驗(yàn)22-23
- 2.3 討論23-24
- 2.4 本章小結(jié)24-25
- 3 黑木耳多糖脫蛋白工藝的優(yōu)化25-40
- 3.1 材料與方法25-27
- 3.1.1 試驗(yàn)原料25
- 3.1.2 黑木耳多糖的提取25
- 3.1.3 多糖含量的測(cè)定25
- 3.1.4 蛋白質(zhì)含量的測(cè)定25
- 3.1.5 多糖中蛋白質(zhì)脫除方法25-26
- 3.1.6 多糖回收率及蛋白質(zhì)脫除率的計(jì)算26
- 3.1.7 最佳方法的工藝優(yōu)化26-27
- 3.1.8 體外抗氧化研究27
- 3.2 結(jié)果與分析27-38
- 3.2.1 黑木耳多糖除蛋白工藝的篩選27-32
- 3.2.2 AB-8樹(shù)脂脫蛋白工藝的優(yōu)化32-37
- 3.2.3 黑木耳多糖脫蛋白對(duì)體外抗氧化性的影響37-38
- 3.3 討論38-39
- 3.4 本章小結(jié)39-40
- 4 黑木耳多糖-大豆蛋白復(fù)合物的制備及其功能特性研究40-56
- 4.1 材料與方法40-42
- 4.1.1 試驗(yàn)原料40
- 4.1.2 黑木耳多糖的提取40
- 4.1.3 多糖含量的測(cè)定40
- 4.1.4 游離氨基酸含量量的測(cè)定40-41
- 4.1.5 單因素試驗(yàn)41
- 4.1.6 響應(yīng)面分析試驗(yàn)41
- 4.1.7 乳化性和乳化穩(wěn)定性的測(cè)定41-42
- 4.1.8 溶解性的測(cè)定42
- 4.1.9 熱穩(wěn)定性的測(cè)定42
- 4.2 結(jié)果與分析42-54
- 4.2.1 甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立42-43
- 4.2.2 pH對(duì)氨基酸結(jié)合率及乳化活性的影響43-44
- 4.2.3 溫度對(duì)氨基酸結(jié)合率及乳化活性的影響44-46
- 4.2.4 糖與蛋白質(zhì)量比對(duì)氨基酸結(jié)合率及乳化活性的影響46-47
- 4.2.5 料液比對(duì)氨基酸結(jié)合率及乳化活性的影響47-48
- 4.2.6 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果與分析48-51
- 4.2.7 黑木耳多糖-大豆蛋白復(fù)合物的功能特性分析51-54
- 4.3 討論54-55
- 4.4 本章小結(jié)55-56
- 結(jié)論56-57
- 參考文獻(xiàn)57-63
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文63-64
- 致謝64-65
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):269805
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