發(fā)布時(shí)間：2021-04-20 03:26

　　在環(huán)境污染的生物修復(fù)過(guò)程中,常采取生物強(qiáng)化法（在污染地接種經(jīng)馴化的高效降解微生物）來(lái)提高降解效率。但海洋油污染的生物強(qiáng)化修復(fù)是一項(xiàng)復(fù)雜工程,涉及污染場(chǎng)地特性、石油烴降解菌群的構(gòu)成及其對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性等。為提高海洋油污染生物修復(fù)的有效性,本論文在前期實(shí)驗(yàn)室研究基礎(chǔ)上,采用單因素考察及正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),對(duì)構(gòu)成海洋油污染降解菌群的四株細(xì)菌Acinetobacter sp.Y9、Acinetobacter sp.W3、Gordonia sp.X1、Acinetobacter sp.F9（以下簡(jiǎn)稱(chēng)Y9、W3、X1、F9）的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行了篩選優(yōu)化,獲得4個(gè)菌株的優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基配方分別為:Y9菌株:葡萄糖1%、蛋白胨2%,磷酸鹽緩沖溶液0.1 mol/L;W3菌株:葡萄糖0.5%、玉米漿1.5%,磷酸鹽緩沖溶液0.05 mol/L;X1菌株:葡萄糖2.5%、玉米漿2%,磷酸鹽緩沖溶液0.1 mol/L;F9菌株:葡萄糖5%、蛋白胨2.5%,磷酸鹽緩沖溶液0.1 mol/L。四株菌培養(yǎng)基的其他無(wú)機(jī)鹽組分均為:氯化鈉0.05%;氯化鈣0.001%;硫酸鎂0.019%。對(duì)海洋油污染降解菌的發(fā)酵工藝進(jìn)行研究,建... 

【文章來(lái)源】：上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁(yè)數(shù)】：86 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 海洋油污染降解菌發(fā)酵培養(yǎng)基篩選及發(fā)酵工藝優(yōu)化
    第一節(jié) 海洋油污染降解菌發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選
        1 材料與方法
            1.1 材料
                1.1.1 主要培養(yǎng)基及菌種
                1.1.2 主要試劑
                1.1.3 儀器與設(shè)備
            1.2 方法
                1.2.1 菌種活化
                1.2.2 菌液樣品OD600值的測(cè)定
                1.2.3 四株降解菌發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選優(yōu)化
                    1.2.3.1 Y9發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選優(yōu)化
                    1.2.3.2 W3發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選優(yōu)化
                    1.2.3.3 X1發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選優(yōu)化
                    1.2.3.4 F9發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選優(yōu)化
        2 結(jié)果
            2.1 Y9菌株發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選優(yōu)化
                2.1.1 篩選優(yōu)化的碳源
                2.1.2 篩選優(yōu)化的氮源
                2.1.3 正交試驗(yàn)
            2.2 W3菌株發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選優(yōu)化
                2.2.1 篩選優(yōu)化的碳源
                2.2.2 篩選優(yōu)化的氮源
                2.2.3 正交試驗(yàn)
            2.3 X1發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選優(yōu)化
                2.3.1 篩選優(yōu)化的碳源
                2.3.2 篩選優(yōu)化的氮源
                2.3.3 正交試驗(yàn)
            2.4 F9發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選優(yōu)化
                2.4.1 篩選優(yōu)化的碳源
                2.4.2 篩選優(yōu)化的氮源
                2.4.3 正交試驗(yàn)
        3 討論
    第二節(jié) 海洋油污染降解菌發(fā)酵工藝的優(yōu)化
        1 材料與方法
            1.1 材料
                1.1.1 主要培養(yǎng)基與菌種
                1.1.2 主要試劑
                1.1.3 儀器與設(shè)備
            1.2 方法
                1.2.1 菌種活化
                1.2.2 搖瓶種子培養(yǎng)
                1.2.3 10L發(fā)酵罐分批發(fā)酵
                1.2.4 10L發(fā)酵罐補(bǔ)料分批發(fā)酵
                1.2.5 分析方法
                    1.2.5.1 菌液樣品OD600值的測(cè)定
                    1.2.5.2 還原糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
                    1.2.5.3 發(fā)酵液中葡萄糖殘留量的測(cè)定
        2 結(jié)果與討論
            2.1 優(yōu)化的Y9菌株發(fā)酵工藝
                2.1.1 還原糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
                2.1.2 初始糖濃度對(duì)Y9菌株分批發(fā)酵的影響
                2.1.3 溫度對(duì)Y9菌株分批發(fā)酵的影響
                2.1.4 轉(zhuǎn)速對(duì)Y9菌株分批發(fā)酵的影響
                2.1.5 接種量對(duì)Y9菌株分批發(fā)酵的影響
                2.1.6 pH對(duì)Y9菌株分批發(fā)酵的影響
                2.1.7 補(bǔ)糖濃度對(duì)Y9菌株發(fā)酵的影響
                2.1.8 補(bǔ)料方式對(duì)Y9菌株發(fā)酵的影響
            2.2 最優(yōu)發(fā)酵條件下Y9菌株在10L發(fā)酵罐中的生長(zhǎng)曲線
            2.3 W3、X1和F9菌株在10L發(fā)酵罐中的發(fā)酵生長(zhǎng)曲線
        3 結(jié)論
第二章 海洋油污染降解菌劑的制備
    第一節(jié) 固定化生物載體的制備
        1 材料與方法
            1.1 材料
                1.1.1 主要試劑
                1.1.2 儀器與設(shè)備
            1.2 方法
                1.2.1 載體制備
                1.2.2 載體性能測(cè)定
                    1.2.2.1 漂浮性測(cè)定
                    1.2.2.2 外觀評(píng)價(jià)
                    1.2.2.3 機(jī)械強(qiáng)度測(cè)定
                    1.2.2.4 微觀結(jié)構(gòu)測(cè)定
        2 結(jié)果與分析
            2.1 甘蔗渣的處理
            2.2 固定化載體制備條件
                2.2.1 海藻酸鈉質(zhì)量分?jǐn)?shù)
                2.2.2 甘蔗渣質(zhì)量分?jǐn)?shù)
                2.2.3 CaCl2濃度
                2.2.4 交聯(lián)時(shí)間
            2.3 正交實(shí)驗(yàn)
            2.4 載體的性狀與超微結(jié)構(gòu)
            2.5 載體漂浮性
        3 討論
    第二節(jié) 海洋油污染降解菌劑的制備
        1 材料與方法
            1.1 材料
                1.1.1 培養(yǎng)基及菌株
                1.1.2 主要試劑
                1.1.3 儀器與設(shè)備
            1.2 方法
                1.2.1 菌種活化及復(fù)合菌液制備
                1.2.2 菌劑制備方法
                1.2.3 分析方法
                    1.2.3.1 菌液樣品OD600值的測(cè)定
                    1.2.3.2 載菌量測(cè)定
                    1.2.3.3 柴油降解率的測(cè)定
        2 結(jié)果與分析
            2.1 單因素實(shí)驗(yàn)
                2.1.1 附著時(shí)間
                2.1.2 搖床轉(zhuǎn)速
                2.1.3 菌液與載體比例
            2.2 正交試驗(yàn)
            2.3 菌劑的性狀與超微結(jié)構(gòu)
            2.4 菌劑在油污染海水中的修復(fù)效果
        3 討論
    第三節(jié) 海洋油污染降解菌劑的中試生產(chǎn)工藝研究
        1 材料與方法
            1.1 材料
                1.1.1 培養(yǎng)基及菌株
                1.1.2 主要試劑與溶液配制
                    1.1.2.1 發(fā)酵罐相關(guān)溶液配制
                    1.1.2.2 菌劑相關(guān)溶液配制：
                1.1.3 儀器與設(shè)備
            1.2 方法
                1.2.1 中試生產(chǎn)流程
                1.2.2 菌種活化
                1.2.3 混合菌液的制備
                1.2.4 載體的中試制備
                    1.2.4.1 設(shè)備的實(shí)現(xiàn)
                    1.2.4.2 載體的中試制備
                1.2.5 菌劑的中試制備
        2 結(jié)果
        3 結(jié)論
    第四節(jié) 油污染生物修復(fù)模擬實(shí)驗(yàn)
        1 材料與方法
            1.1 材料
                1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
                1.1.2 儀器與設(shè)備
            1.2 方法
                1.2.1 海水池模擬實(shí)驗(yàn)
        2 結(jié)果
            2.1 海水池模擬實(shí)驗(yàn)
        3 討論
第三章 海洋柴油降解菌劑質(zhì)量控制技術(shù)的初步研究
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 主要試劑
            1.1.2 儀器與設(shè)備
        1.2 評(píng)價(jià)指標(biāo)與評(píng)價(jià)方法
            1.2.1 菌劑大小
            1.2.2 菌劑外觀
            1.2.3 漂浮性
            1.2.4 載菌量
            1.2.5 保存條件與時(shí)間
    2 結(jié)果
        2.1 菌劑大小
        2.2 菌劑外觀
        2.3 漂浮性
        2.4 載菌量
        2.5 保存條件
        2.6 菌劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)
            2.6.1 菌劑大小
            2.6.2 菌劑顏色
            2.6.3 菌劑形狀
            2.6.4 菌劑漂浮時(shí)間
            2.6.5 菌劑載菌量
            2.6.6 菌劑的保存條件
    3 結(jié)論
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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