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苯系物暴露引起的仿刺參管足轉錄組差異表達基因分析

發(fā)布時間:2017-12-22 23:20

  本文關鍵詞:苯系物暴露引起的仿刺參管足轉錄組差異表達基因分析 出處:《大連海洋大學》2016年碩士論文 論文類型:學位論文


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【摘要】:仿刺參(Apostichopus japonicus)又名刺參,主要分布于我國北方、日本、朝鮮半島及俄羅斯的遠東地區(qū),是我國沿海重要的增養(yǎng)殖品種。近年來,沿海石油化工業(yè)的發(fā)展及海洋溢油事故造成近岸海域環(huán)境石油類污染。海洋環(huán)境中苯系物污染主要來源于海洋溢油事故以及沿海石油化工企業(yè)的廢水排放。到目前為止,從分子水平上研究苯系物聯(lián)合暴露對仿刺參的影響還未見報道。本文采用Illumina HiSeqTM 2000高通量測序技術分別對1.0 mg·L-1(B)苯系物聯(lián)合暴露12h后的仿刺參管足組織及對照組(C)進行轉錄組測序,獲得了大量的差異表達基因信息。探討了仿刺參基因表達變化在BTEXs聯(lián)合暴露響應過程中發(fā)揮的作用。(1)轉錄組基礎數(shù)據(jù)分析:對BTEXs聯(lián)合暴露后仿刺參管足組織與正常對照兩個轉錄組數(shù)據(jù)合并后經(jīng)Trinity軟件進行de novo組裝,獲得了145675條unigenes,平均長度為657.21 bp。對所有unigenes進行BLAST搜索(E10-5)發(fā)現(xiàn)共有35330個unigenes(24.25%)與蛋白質數(shù)據(jù)庫中的已知序列同源,其中注釋到COG、Blast2GO、KEGG基因的個數(shù)分別為8409、10532、7305。大量基因的獲得充分顯示出轉錄組測序手段在基因序列數(shù)據(jù)挖掘上的巨大潛力。(2)轉錄組差異表達基因分析:對比分析BTEXs聯(lián)合暴露組和對照組的轉錄組基因表達結果,獲得了2418個差異表達基因(DEGs)(|Log2 Fold changes|≥1且FDR≤0.001),其中,上調表達和下調表達基因分別為1049和1369個。GOseq分析結果顯示,158個DEGs顯著富集在149個GO terms中,包括103個生物學過程、17個細胞組分和29個分子功能(p0.05);KEGG代謝通路分析結果顯示994個差異基因映射到268條代謝通路,這些差異表達基因參與的生理過程與其他生物的同源基因參與的信號傳導、癌癥、外源性化合物的生物降解代謝等過程相類似。上述結果為在轉錄組水平篩選BTEXs的生物標志物,解析BTEXs對仿刺參毒性作用的分子機制提供了科學參考。(3)差異表達基因驗證:采用real-time PCR技術對轉錄組測序結果獲得的P450 A46、GST-σ、AchE、CAT等4個差異表達基因進行了驗證,其結果和轉錄組測定結果表達趨勢一致,進一步驗證了本研究中轉錄組測序和分析的準確性。研究結果對BTEXs聯(lián)合暴露仿刺參相關特異表達基因的鑒定和功能研究提供了基礎數(shù)據(jù)。
【學位授予單位】:大連海洋大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:X55;S917.4

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本文編號:1321470

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