基于微流控芯片的數(shù)字等溫擴增技術(shù)作為一種新型分子檢測技術(shù),可以通過對采集到的熒光圖像進行特定的圖像處理,以實現(xiàn)對待測目標(biāo)的絕對定量分析。本研究利用本課題組研制的數(shù)字微流控芯片所采集到的熒光圖像為分析對象,并結(jié)合實際應(yīng)用環(huán)境,開發(fā)出配套的軟件分析系統(tǒng)。該系統(tǒng)中的熒光圖像處理分析部分具備圖像拼接、圖像傾斜校正、目標(biāo)區(qū)域的截取、圖像分割以及熒光亮點計數(shù)等功能。該系統(tǒng)能很好地滿足核酸分子數(shù)檢測的需求,并具有良好的人機交互性能。結(jié)果表明該系統(tǒng)的分析結(jié)果與Image J圖像處理軟件的統(tǒng)計結(jié)果不僅具有一致性,而且能夠?qū)z測到的結(jié)果實現(xiàn)自動化的計算分析,這為該款軟件分析系統(tǒng)的廣泛應(yīng)用奠定了堅實的基礎(chǔ)。

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【部分圖文】：

圖1數(shù)字等溫擴增系統(tǒng)結(jié)構(gòu)圖

本研究自主研發(fā)的整套數(shù)字等溫擴增系統(tǒng)是由多個子系統(tǒng)模塊構(gòu)成，主要的模塊為由電子多圈式編碼器、步進電機以及單維移動平臺組成的三維高精度位移平臺，由半導(dǎo)體制冷片、熱沉、散熱器組成的溫控模塊以及由大功率LED模組和超高分辨率的科研級數(shù)字相機組成的熒光檢測模塊（圖1）。通過對每個子系統(tǒng)的....

圖2熒光圖像拼接流程圖

該方法相比于其他圖像拼接方法魯棒性更好，能夠較好地適應(yīng)圖像的尺寸、平移、旋轉(zhuǎn)以及光照的變化，而其中所提取的特征點作為最基本的特征，其計算過程簡單，且能保持影像的灰度不受損壞。該方法解決了受制于相機性能的難題，有效地實現(xiàn)了萬級高密度芯片全景熒光圖像檢測。具體的局部圖像拼接步驟如圖2....

圖3三部分熒光圖像拼接過程

圖2熒光圖像拼接流程圖2.1.2熒光圖像的旋轉(zhuǎn)和目標(biāo)區(qū)域的截取

圖4熒光圖像旋轉(zhuǎn)校正和截取

為提高后續(xù)的熒光點計數(shù)的精度，應(yīng)盡可能減小待處理的目標(biāo)區(qū)域，將待分析處理熒光反應(yīng)微腔區(qū)域截選出來。通過獲取OpenCV中的鼠標(biāo)點擊事件，編寫相應(yīng)的回調(diào)函數(shù)，以實現(xiàn)通過點擊鼠標(biāo)拖動出現(xiàn)矩形框來輔助完成目標(biāo)區(qū)域的截取。獲取一個通道的整個反應(yīng)微腔之后，對該部分進行熒光點計數(shù)，如圖4所....

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