骨組織工程技術(shù)是目前公認(rèn)的最有希望修復(fù)骨缺陷的治療方法之一。生物反應(yīng)器是獲取大量骨組織種子的重要途徑。微球具有較大的比表面積,短時(shí)間細(xì)胞可以在微球表面大量增殖。并且培養(yǎng)過(guò)程中添加微載體就可以完成細(xì)胞的傳代,避免了傳統(tǒng)培養(yǎng)方法中使用胰酶消化對(duì)細(xì)胞的損害。但是目前商業(yè)化的微載體降解能力差,價(jià)格昂貴。因此,研制優(yōu)質(zhì)微載體生物材料仍是當(dāng)前研究熱點(diǎn)。本研究通過(guò)使用致孔劑聯(lián)合乳化揮發(fā)法制備出聚乳酸(Polylactide, PLA)和納米羥基磷灰石/聚乳酸(Nano-Hydroxyapatiten/ Polylactide, nHAP/PLA)中空多孔微球,考察不同的微球的物化性質(zhì),并將成骨細(xì)胞(Osteoblasts, OBs)接種在微球上,考察微球的生物相容性,以期制備出最適合成骨細(xì)胞生長(zhǎng)的微球。以二氯甲烷(CH2C12)為溶劑,明膠為分散劑,NH4HCO3為致孔劑制備中空多孔的PLA微球。微球的粒徑大小和粒徑分布受聚乳酸濃度、分散劑濃度、復(fù)乳攪拌速度和致孔劑濃度等因素影響。采用相同工藝制備了nHAP/PLA微球,通過(guò)比較不同nHAP加入量微球的表面形貌、吸水率、接觸角和懸浮能力,篩選出最適合...

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 骨組織工程種子細(xì)胞的研究進(jìn)展
    1.2 生物反應(yīng)器
    1.3 微載體制備研究現(xiàn)狀
        1.3.1 微載體的性能要求
        1.3.2 常用微載體
        1.3.3 多孔微載體的制備方法
        1.3.4 PLA微球
        1.3.5 納米羥基磷灰石及其復(fù)合材料
    1.4 選題依據(jù)及研究?jī)?nèi)容
2 PLA微球的制備工藝
    2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)藥品
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 聚乳酸空心多孔微球的制備
        2.2.2 單因素分析制備聚乳酸微球
        2.2.3 微球形態(tài)觀察
        2.2.4 微球支架的粒徑分布
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 中空多孔微球形成機(jī)理
        2.3.2 聚乳酸制備各因素的影響
    2.4 本章小結(jié)
3. 納米羥基磷灰石/聚乳酸空性多孔微球的制備
    3.1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)藥品
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 納米羥基磷灰石/聚乳酸空心多孔微球的制備
        3.2.2 微球形態(tài)觀察
        3.2.3 HA/PLA接觸角測(cè)試
        3.2.4 BSA蛋白吸附實(shí)驗(yàn)
        3.2.5 微球沉降性標(biāo)準(zhǔn)
        3.2.6 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 納米羥基磷灰石形態(tài)及粒徑
        3.3.2 微球形態(tài)觀察
        3.3.3 紅外檢測(cè)
        3.3.4 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析
    3.4 小結(jié)
4 納米羥基磷灰石/聚乳酸空心多孔微球細(xì)胞復(fù)合物的構(gòu)建
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
        4.1.2 藥品與試劑
    4.2 成骨細(xì)胞的原代培養(yǎng)及傳代培養(yǎng)
        4.2.1 成骨細(xì)胞的原代培養(yǎng)
        4.2.2 成骨細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
        4.2.3 成骨細(xì)胞的純化
        4.2.4 成骨細(xì)胞的形態(tài)學(xué)檢測(cè)
        4.2.5 成骨細(xì)胞體外礦化能力檢測(cè)
    4.3 微球的成骨細(xì)胞反應(yīng)檢測(cè)
        4.3.1 納米羥基磷灰石/聚乳酸微球接種成骨細(xì)胞
        4.3.2 微球上成骨細(xì)胞活性及形態(tài)檢測(cè)
    4.4 成骨細(xì)胞培養(yǎng)及鑒定實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 原代及傳代培養(yǎng)結(jié)果
        4.4.2 成骨細(xì)胞的生物學(xué)性能檢測(cè)
    4.5 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.5.1 成骨細(xì)胞黏附率
        4.5.2 CCK8細(xì)胞活性檢測(cè)
        4.5.3 微球上細(xì)胞生長(zhǎng)情況
        4.5.4 成骨細(xì)胞功能檢測(cè)
    4.6 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況



本文編號(hào)：3756884