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原始態(tài)與老化態(tài)納米氧化鋅誘導細胞毒性與遺傳毒性差異的研究

發(fā)布時間:2017-04-12 15:23

  本文關(guān)鍵詞:原始態(tài)與老化態(tài)納米氧化鋅誘導細胞毒性與遺傳毒性差異的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:隨著納米科技的迅速發(fā)展,以及納米材料在食品、生物醫(yī)藥以及化妝品等領域的廣泛應用,使其被釋放進入環(huán)境的量逐漸增大,并在環(huán)境介質(zhì)的作用下發(fā)生賦存狀態(tài)、理化性質(zhì)以及生物有效性的轉(zhuǎn)變,進而對于人類健康和生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生不可忽視的影響。納米氧化鋅(znic oxid nanoparticles, ZnO-NPs)作為當今社會中最具代表性的一類納米金屬氧化物,廣泛應用于紫外吸收、防曬、促生長、抗菌抑菌以及光催化產(chǎn)品中。由于納米氧化鋅生產(chǎn)和使用范圍之廣,導致其在環(huán)境中的釋放量逐漸上升,并不可避免的受環(huán)境中各種因素的影響,從而發(fā)生理化性質(zhì)的轉(zhuǎn)變,由原始態(tài)納米氧化鋅(pristine ZnO-NPs)轉(zhuǎn)變?yōu)槔匣瘧B(tài)納米氧化鋅(transformed ZnO-NPs),最終可能引起生物毒性效應的變化。然而,現(xiàn)有的研究并未對原始態(tài)與老化態(tài)納米氧化鋅引起的毒性效應差異進行系統(tǒng)的、全面的研究。因此,本論文旨在研究原始態(tài)納米氧化鋅在純水環(huán)境條件下發(fā)生老化,轉(zhuǎn)變?yōu)槔匣瘧B(tài)納米氧化鋅后,誘導人鼠雜交瘤細胞產(chǎn)生毒性效應的差異。研究發(fā)現(xiàn),將原始態(tài)納米氧化鋅置于純水環(huán)境中將會發(fā)生理化性質(zhì)的變化,轉(zhuǎn)變?yōu)槔匣瘧B(tài)納米氧化鋅,這種理化性質(zhì)的變化繼而誘導人鼠雜交瘤細胞生物毒性效應性發(fā)生改變。經(jīng)深入研究發(fā)現(xiàn)相較于原始態(tài)納米氧化鋅,老化態(tài)納米氧化鋅誘導人鼠雜交瘤細胞產(chǎn)生細胞毒性減弱;老化態(tài)納米氧化鋅誘導與細胞內(nèi)源性凋亡密切相關(guān)的信號轉(zhuǎn)導通路關(guān)鍵蛋白-活化的Caspase 3蛋白表達量較原始態(tài)納米氧化鋅的誘導作用減弱;且誘導細胞內(nèi)ROS產(chǎn)生較原始態(tài)納米氧化鋅有所增強。另一方面通過研究原始態(tài)與老化態(tài)納米氧化鋅誘導人鼠雜交瘤細胞的遺傳毒性效應,我們發(fā)現(xiàn)與細胞毒性相反,原始態(tài)納米氧化鋅誘導人鼠雜交瘤細胞DNA雙鏈斷裂水平高于老化態(tài)納米氧化鋅的誘導作用,而細胞中含有的人11號染色體長短臂上的CD59基因協(xié)同其他基因的缺失現(xiàn)象降低。而納米二氧化鈦顆粒作為非可溶性納米金屬氧化物,深入研究原始態(tài)納米二氧化鈦在純水環(huán)境條件下發(fā)生老化后誘導的毒性效應變化,發(fā)現(xiàn)原始態(tài)與老化態(tài)納米二氧化鈦顆粒并未誘導人鼠雜交瘤細胞產(chǎn)生明顯的毒性效應差異。本研究明確原始態(tài)與老化態(tài)納米氧化鋅理化性質(zhì)轉(zhuǎn)變與其誘導人鼠雜交瘤細胞產(chǎn)生細胞毒性與遺傳毒性的差異相關(guān)。納米二氧化鈦的結(jié)果暗示可溶性納米金屬氧化物與非可溶性納米金屬氧化物的致毒效應機制存在差異。本論文為進一步研究可溶性納米金屬氧化物納米氧化鋅誘導哺乳動物細胞產(chǎn)生毒性效應的分子生物學以及細胞生物學作用機制提供研究基礎,為研究納米材料潛在的環(huán)境健康風險提供一定的理論參考。
【關(guān)鍵詞】:納米氧化鋅 原始態(tài)與老化態(tài) 細胞毒性 遺傳毒性 人鼠雜交瘤細胞
【學位授予單位】:安徽大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R114;TB383.1
【目錄】:
  • 摘要3-5
  • Abstract5-9
  • 第一章 緒論9-22
  • 1.1 納米氧化鋅概述9-14
  • 1.1.1 納米氧化鋅及其應用9-11
  • 1.1.2 環(huán)境中老化過程研究11-14
  • 1.2 生物效應研究14-20
  • 1.2.1 細胞毒性效應研究15-18
  • 1.2.2 遺傳毒性效應研究18-20
  • 1.3 研究內(nèi)容與意義20-22
  • 1.3.1 研究內(nèi)容20
  • 1.3.2 研究意義20-21
  • 1.3.3 內(nèi)容簡介21-22
  • 第二章 原始態(tài)與老化態(tài)納米氧化鋅誘導細胞毒性的差異研究22-36
  • 2.1 前言22-23
  • 2.2 材料23-25
  • 2.2.1 細胞系23
  • 2.2.2 納米材料23
  • 2.2.3 主要儀器與試劑23-25
  • 2.3 實驗方法25-30
  • 2.3.1 納米氧化鋅懸浮液配制25
  • 2.3.2 細胞培養(yǎng)25-26
  • 2.3.3 細胞染毒實驗26-27
  • 2.3.4 細胞存活率的檢測27-28
  • 2.3.5 細胞凋亡的檢測28-29
  • 2.3.6 細胞內(nèi)ROS的檢測29-30
  • 2.4 實驗結(jié)果30-33
  • 2.4.1 細胞細胞存活率的檢測30-31
  • 2.4.2 細胞內(nèi)活化的Caspase 3/7蛋白表達量檢測31-33
  • 2.4.3 細胞內(nèi)ROS的檢測33
  • 2.5 討論33-35
  • 2.6 小結(jié)35-36
  • 第三章 原始態(tài)與老化態(tài)納米氧化鋅誘導遺傳毒性的差異研究36-53
  • 3.1 前言36-37
  • 3.2 材料37-38
  • 3.2.1 細胞系37
  • 3.2.2 納米材料37
  • 3.2.3 主要儀器與試劑37-38
  • 3.3 實驗方法38-48
  • 3.3.1 細胞培養(yǎng)38
  • 3.3.2 細胞染毒實驗38-39
  • 3.3.3 γ-H2AX蛋白檢測39-41
  • 3.3.4 CD59協(xié)同其他基因的缺失檢測41-48
  • 3.4 實驗結(jié)果48-51
  • 3.4.1 DNA雙鏈斷裂檢測48-49
  • 3.4.2 突變譜分析49-51
  • 3.5 討論51-52
  • 3.6 小結(jié)52-53
  • 第四章 總結(jié)與展望53-56
  • 4.1 實驗總結(jié)53-54
  • 4.2 研究展望54-56
  • 參考文獻56-67
  • 致謝67-69
  • 攻讀學位期間發(fā)表的論文69

【參考文獻】

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  本文關(guān)鍵詞:原始態(tài)與老化態(tài)納米氧化鋅誘導細胞毒性與遺傳毒性差異的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:301591

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