基于納米材料的新型熒光傳感體系的構(gòu)筑
本文關(guān)鍵詞: 熒光 量子點(diǎn) 金納米簇 傳感器 出處:《江南大學(xué)》2015年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:隨著相關(guān)學(xué)科和新技術(shù)的迅猛發(fā)展,熒光分析法在靈敏度、選擇性、準(zhǔn)確度等方面都得到了很大程度的提升,其應(yīng)用范圍也遍布各個(gè)領(lǐng)域。因?yàn)榫哂袃?yōu)良的光學(xué)特性,納米材料為構(gòu)建新型靈敏的熒光傳感器提供了優(yōu)秀的敏感材料。本文研究了納米材料(量子點(diǎn)、金納米簇)在熒光檢測生物分子如葡萄糖、凝血酶、堿性磷酸酶和小鼠Ig G方面的應(yīng)用。量子點(diǎn)是一種發(fā)展成熟、應(yīng)用廣泛的熒光納米材料,具有好的光穩(wěn)定性,窄的發(fā)射光譜,高的發(fā)光強(qiáng)度,是目前研究的一個(gè)熱點(diǎn)。金納米簇是比量子點(diǎn)尺寸更小的一種熒光納米材料,直徑通常小于2 nm,是繼量子點(diǎn)之后的又一種新型熒光納米材料,由于其具有超小的尺寸,優(yōu)異的生物相容性,良好的水溶性,大的斯托克斯位移,低的毒性,高的量子產(chǎn)率和易于合成等優(yōu)點(diǎn),使其在生物檢測方面?zhèn)涫懿毮。本論文以量子點(diǎn)(Cd S、Cd Te量子點(diǎn))和金納米簇為研究對象,主要研究內(nèi)容如下:1、基于量子點(diǎn)熒光猝滅的葡萄糖傳感器構(gòu)建了一種新型靈敏的量子點(diǎn)-雙酶(葡萄糖氧化酶(GOD)和辣根過氧化物酶(HRP))復(fù)合體系用于葡萄糖直接檢測。HRP的兩種底物,鄰苯二胺(OPD)和3,3’-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)的氧化產(chǎn)物(ox OPD和ox DAB)能夠有效地猝滅巰基乙酸修飾的Cd S量子點(diǎn)的熒光。最佳實(shí)驗(yàn)條件下,量子點(diǎn)猝滅效果與葡萄糖濃度之間存在良好的線性關(guān)系。當(dāng)使用OPD(或DAB)作為HRP的底物時(shí),檢測限可達(dá)0.1μmol/L(或20 nmol/L)。本方法還成功地應(yīng)用于人血清中葡萄糖含量的檢測,檢測過程中不需要對血清樣本進(jìn)行預(yù)處理,檢測結(jié)果令人滿意。2、基于光誘導(dǎo)電子轉(zhuǎn)移與模擬酶信號放大作用的高靈敏凝血酶熒光傳感器利用光誘導(dǎo)電子轉(zhuǎn)移(PET)引起Cd Te量子點(diǎn)熒光猝滅的原理建立了一個(gè)新型靈敏檢測凝血酶的適體傳感器。具有模擬酶作用的二次配體Pt NPs/G-四面體/hemin和G-四面體/hemin在H2O2存在下催化對苯二酚(HQ)生成大量的2-羥基-對苯醌(HPB),HPB與Cd Te量子點(diǎn)之間存在PET作用,引起量子點(diǎn)熒光猝滅。另外,Cd Te量子點(diǎn)和與其相連的G-四面體/hemin中的hemin之間也有PET作用;诙闻潴w和G-四面體/hemin引導(dǎo)的雙重PET過程對熒光信號的輸出起到一個(gè)放大作用,由此提高檢測的靈敏度。最佳實(shí)驗(yàn)條件下,凝血酶在0.05 pmol/L到10 nmol/L范圍內(nèi)具有良好的線性響應(yīng),最低檢測限可達(dá)0.015 pmol/L。該方法思路新穎、靈敏度高、選擇性好。3、基于金納米簇的熒光增強(qiáng)型高靈敏堿性磷酸酶檢測及免疫分析應(yīng)用牛血清白蛋白(BSA)修飾的金納米簇中,簇與修飾模板BSA之間通過Au-S鍵相連,Au-S鍵對金納米簇的結(jié)構(gòu)及熒光起到穩(wěn)定和保護(hù)的作用。KMn O4能夠氧化金納米簇中的Au0及修飾模板BSA,破壞表面結(jié)構(gòu)進(jìn)而導(dǎo)致金納米簇?zé)晒獍l(fā)生猝滅。抗壞血酸(AA)則能夠還原被KMn O4氧化的Au3+及BSA,使表面結(jié)構(gòu)恢復(fù)從而使金納米簇?zé)晒獾玫交謴?fù)。另外,堿性磷酸酶(ALP)能夠催化其底物抗壞血酸磷酸三鈉鹽(AAP)分解生成AA;诖宋覀兘⒘艘环N靈敏檢測ALP的增強(qiáng)型熒光傳感器,檢測限可達(dá)0.003 U/L。另外,我們還拓展了該方法在小鼠Ig G免疫分析方面的應(yīng)用,檢測限可達(dá)1.5 pg/m L。本實(shí)驗(yàn)具有便捷、靈敏度高與選擇性好等優(yōu)點(diǎn),為構(gòu)建基于貴金屬納米簇的增強(qiáng)型熒光傳感器在生物檢測方面的應(yīng)用提供了借鑒。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:江南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:O657.3;TB383.1
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,本文編號:1466353
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