親水磁性富集材料的制備及其在糖基化蛋白質(zhì)組學中的應用
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更多相關(guān)文章: 糖基化蛋白質(zhì)組學 磁性親水納米材料 代謝組學 生物標志物
【摘要】:蛋白質(zhì)糖基化是生命體內(nèi)最為重要和復雜的翻譯后修飾之一,研究發(fā)現(xiàn)其與重大疾病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān),在細胞與基質(zhì)間的生物信號傳導過程中起著重要作用。然而由于大量高豐度的非糖基化蛋白對微量糖基化蛋白的抑制作用,使得糖基化蛋白需要經(jīng)過富集分離,方能實現(xiàn)對其分析與檢測。本論文針對傳統(tǒng)的親水磁性納米材料制備時間長,步驟繁瑣等問題,制備了對糖肽富集的親水磁性納米材料。此外,還通過代謝組學策略對新疆維吾爾族和漢族大學生尿液的代謝輪廓差異進行了研究。具體如下:(1)采用碳化二亞胺活化將羧甲基環(huán)糊精(CMCD) 一步‖嫁接到磁性納米顆粒的表面,成功制備了羧甲基環(huán)糊精包覆磁性納米顆粒的糖肽富集材料。通過透射電子顯微鏡(TEM)、熱失重分析儀(TG)、X射線衍射(XRD)等方法對其進行表征。材料表面的羧甲基環(huán)糊精賦予了材料很好的親水性,良好的磁響應能力可以實現(xiàn)快速分離。將其應用于復雜樣品鼠肝富集,從65μg蛋白提取液共鑒定出494個糖基化蛋白質(zhì)666個N-糖基化位點。(2)采用簡單的 一鍋法‖制備了羧甲基纖維素包覆磁性納米顆粒的復合材料,用透射電子顯微鏡(TEM)、熱失重分析儀(TG)、傅立葉變換紅外光譜儀(FT-IR)等方法對其進行表征。表明材料表面被包覆了帶有豐富羧基和羥基的有機高分子羧甲基纖維素。將其應用于復雜樣品鼠肝富集,從65μg蛋白提取液共鑒定出206個糖基化蛋白質(zhì)231個N-糖基化位點。(3)以新疆兩個人口最多的世居民族維吾爾和漢族為對象,基于氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對35名維吾爾族和37名漢族的大學生尿液進行了代謝輪廓研究,并通過多種生物統(tǒng)計分析方法對所獲得的數(shù)據(jù)進行分析,表明兩個民族樣本聚類明顯,最終篩選出兩個民族大學生人群尿液中9個具有差異表達的代謝小分子。結(jié)果表明在新疆這個多民族共聚地區(qū),進行相關(guān)代謝組學研究應從源頭上避免或減少非疾病因素引入的差異變量,除年齡、性別等因素外,還需充分考慮族別因素的影響。
【學位授予單位】:新疆大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:TQ937;TB383.1
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,本文編號:1199439
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